完整蛋白质从SDSPAGE胶中的电洗脱及其MALDITOFMS分析...
试剂、试剂盒：电泳缓冲液 蛋白质染色液 &n......阅读全文
完整蛋白质从－SDSPAGE－胶中的电洗脱及其－MALDITOF－MS－分析...
试剂、试剂盒：电泳缓冲液 蛋白质染色液
完整蛋白质从－SDSPAGE－胶中的电洗脱及其－MALDITOF－MS－分析...
试剂、试剂盒 电泳缓冲液蛋白质染色液微量离心管仪器、耗材 水平凝胶电泳仪器电洗脱试剂盒真空离心浓缩仪实验步骤 3.1 蛋白质检测一 般而言，凝胶染色和脱色非常易于操作。在本实验方法中，我们使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考马斯亮蓝染色液显色蛋白质（见注释 1) 。( 1 ) SDS
完整蛋白质从SDSPAGE胶中的电洗脱及其MALDITOF－MS－分析实验
试剂、试剂盒电泳缓冲液蛋白质染色液微量离心管仪器、耗材水平凝胶电泳仪器电洗脱试剂盒真空离心浓缩仪实验步骤3.1 蛋白质检测一 般而言，凝胶染色和脱色非常易于操作。在本实验方法中，我们使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考马斯亮蓝染色液显色蛋白质（见注释 1) 。( 1 ) SDS-PA
SDSPAGE胶制备
一. 实验原理： SDS-PAGE是对蛋白质进行量化，比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样
蛋白质SDSPAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12胶红线左右可以用12或10跑几百的很大的用6的胶小蛋白12的10的一般都能跑如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2，看样品浓度多少，以及你想用几次通常我们是定到4微每微，总量100微，用10次如果浓度小的话定到2用5次
SDSPAGE胶的干燥
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态，使其真空压力波动极少。(1)试剂与配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70）(2)电泳后的凝胶用
SDSPAGE胶的干燥方法
凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态，使其真空压力波动极少。(1)试剂与配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70）(2)电泳后的凝胶用
SDSPAGE梯度胶怎么配置
操作步骤（ 1 ）在制板支架上置一专用有机玻璃槽，将固定好的玻璃板下部插入槽内，中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂，冷凝后封闭胶腔底部。（ 2 ）用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。（ 3 ） 30% 胶液的配制取 50ml 烧杯一只，加凝胶贮液①
如何配制sdspage梯度胶
操作步骤（ 1 ）在制板支架上置一专用有机玻璃槽，将固定好的玻璃板下部插入槽内，中部用两个文具夹固定在支架竖板上。在槽内倒入已充分溶化的琼脂，冷凝后封闭胶腔底部。（ 2 ）用直径约 2mm 的聚乙烯管连接好梯度混合器、恒流泵、凝胶模。（ 3 ） 30% 胶液的配制取 50ml 烧杯一只，加凝胶贮液①
电泳跑胶SDSPAGE的定义
聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由shapiro建立，他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶
电泳跑胶SDSPAGE的定义
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳详细资料如下：聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构，具有分子筛效应，它有两种形式，一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在电泳中保持完整的状态，蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小，形状和电荷。而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是1967年由s
怎样根据蛋白质大小确定SDSPAGE电泳分离胶的浓度
按的是你丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量与胶总体积的质量体积比（m/v）首先你要将上述药品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液（一般为30%,也是m/v）而10%,12%,16%你自然也就知道应该用多少的母液去配制了.相信如何配胶你是知道的.
怎样根据蛋白质大小确定SDSPAGE电泳分离胶的浓度
你可以用12%的胶浓度，如果marker是fermentas家的SDS非预染marker（批号SM0431）的话，可以看到116kd 66.2kd 45kd 35kd 25kd 18.4kd 14.4kd，这样你的目的条带20kd就差不多在整块胶的中间
2D－凝胶的蛋白－Edman－测序实验
试剂、试剂盒 SDS 抽样缓冲液分离胶缓冲液浓缩胶缓冲液SDS-PAGE 电泳缓冲液实验步骤 3.1 Cleveland 肽图谱[5]( 1 ) 样品进行 2D-PAGE 分离，然后用考马斯亮蓝（CBB ) 染色，去除含有蛋白质点的凝胶碎片。( 2 ) 用电泳浓缩仪洗脱凝胶中的蛋白质，2W 恒功率洗
2D－凝胶的蛋白－Edman－测序实验
试剂、试剂盒SDS 抽样缓冲液分离胶缓冲液浓缩胶缓冲液SDS-PAGE 电泳缓冲液实验步骤3.1 Cleveland 肽图谱[5]( 1 ) 样品进行 2D-PAGE 分离，然后用考马斯亮蓝（CBB ) 染色，去除含有蛋白质点的凝胶碎片。( 2 ) 用电泳浓缩仪洗脱凝胶中的蛋白质，2W 恒功率洗脱
2D－凝胶的蛋白－Edman－测序实验
试剂、试剂盒：SDS 抽样缓冲液 分离胶缓冲液
SDSPAGE凝胶－自配？配胶试剂盒？预制胶？
蛋白质印迹的发明者一般认为是美国斯坦福大学的乔治·斯塔克(George Stark)。在尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化学》(Analytical Biochemistry)中首次被称为Western Blot。蛋白免疫印迹( Western Blot)
SDSPAGE蛋白质电泳－配胶缓冲液系统对电泳的影响
在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低;而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介
SDSPAGE蛋白电泳配胶不凝固
我分析原因是过硫酸胺失效，过硫酸氨最好是先用现配，如果怕麻烦而且跑胶的频率很高的话，那么用完之后ap要放在4℃保存，一周之后必须新配。另外可以适当的增加temed的量，从5μl提高到8μl并无大碍。如你所说，是不是就是ap失效呢，还有，我强烈建议你复查一边浓缩胶，分离胶各各buffer的组分是否配制
小型垂直电泳槽仪器介绍
仪器介绍该电泳系统有四部分组成：A电泳槽外壳、相对应的模块、缓冲液槽和盖；B玻璃板和梳子；C加样引导器；D制胶支架和制胶框。该系统设计zui大特点是功能灵活，即可以做普通的蛋白电泳、Western印迹，又可以做电洗脱和双向凝胶电泳。另外制胶简便，大大节约了整个电泳的时间。主要特点1. 模块化设计，使
免疫共沉淀－简介
蛋白质间相互作用研究方法：免疫共沉淀1．用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2．将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3．收集上清（约30 ml）并加入30μg的适当抗体，4℃摇动免疫沉
蛋白质间相互作用研究方法2：免疫共沉淀
相互作用在生理上的证实和探索l 通过免疫共沉淀确定结合蛋白1．用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2．将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3．收集上清（约30 ml）并加入3
蛋白质间相互作用研究方法：免疫共沉淀
相互作用在生理上的证实和探索l 通过免疫共沉淀确定结合蛋白1．用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2．将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3．收集上清（约30 ml）并加入3
电洗脱的概念
中文名称电洗脱英文名称electroelution定 义将在某些支持物中含有的目的成分电泳迁移出来的技术。如琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳后，将含有所分离成分的凝胶切出来，放在适当的电场中，使凝胶内所要的成分移到缓冲液中。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
免疫共沉淀实验操作方法介绍
1．用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。 2．将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中，在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。 3．收集上清（约30 ml）并加入30μg的适当抗体，4℃摇动免疫沉淀物1 h。 4．加入
蛋白质的SDSPAGE电泳
蛋白质的SDS-PAGE电泳 试剂、试剂盒 过硫酸铵 含 2-巯基乙醇的样品缓冲液
蛋白质的SDSPAGE实验
实验材料蛋白质溶液团粒状细胞蛋白试剂、试剂盒4X浓缩胶缓冲4X分离胶缓冲10X电泳缓冲液2XSDS-PAGE上样缓冲液正丁醇甲醇SDS储存液仪器、耗材离心机电泳装置凝胶上样吸头玻璃板加热器实验步骤一、灌制平板胶1.清洗玻璃板。a.将玻璃板放人 2%PCC-54 清洗液中浸泡 3?24 h。b.自来水
蛋白质的SDSPAGE电泳
试剂、试剂盒 过硫酸铵含 2-巯基乙醇的样品缓冲液样品缓冲液 (2X) 储液电泳缓冲液电极缓冲液压缩胶缓冲液分离胶缓冲液实验步骤 铸分离胶（下层胶)装置的清洗为使角蛋白的污染减至最少，将玻板、梳子和隔条浸泡在含强碱性去垢剂〔2%RBS 35 液（Pierce Chemical Co.)〕提浓物的
蛋白质的SDSPAGE电泳
按所用小型平板凝胶装置调整溶液体积，胶板大小约在 8X10X0.15 cm。在此大小范围内有几种形式可以利用。制胶的装置有玻璃板、塑料隔条（通常厚度为 0.1~0.2 cm) 和铸胶时成孔用的 Teflon 梳子。下面逐步示教 SDS-PAGE 的操作程序。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者
SDSPAGE－蛋白质样品的制备
试剂、试剂盒SDS-PAGE Loading BufferddH2O30%丙烯酰胺混合液1.5M Tris(pH8.8)10%SDS10%过硫酸铵TEMEDTris-甘氨酸电泳缓冲液溴酚蓝考马斯亮蓝 R-250 染色液考马斯亮蓝脱色液仪器、耗材离心机冷室水浴锅电泳装置微量移液器水平摇床滤纸实验步骤实