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农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒利福平卡那霉素仪器、耗材MG L 培养基实验步骤1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,调到合适的 pH 后 ,过滤灭菌(使用瓶顶过滤器, 0.22 μm 微孔滤膜,Millipore) 。使用前将 2x 凝胶和 2x 培养基在水浴锅中加热至 60℃。将所需储备液在无菌条件下加入到热的培养基中,培养基和植物凝胶混合后倒入 9 cm 培养皿中(Sterilin ) 。分化培养时,将培养基倒入较深的组织培养皿中(100 mm X 20 mm, Falcon) 。2. 根瘤农杆菌接种前的准备工作 ( 1 ) 标准接种液制备采用文献 [ 2 ] 中介绍的方法,稍作修改。( 2 ) 挑取一个含有 pBract 质粒和 pSoup ......阅读全文

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒利福平卡那霉素仪器、耗材MG L 培养基实验步骤1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,调到合适的

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料:植物凝胶                                                                  pBract 质粒                                                                 

农杆菌介导的大麦转化方法实验

实验材料 植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒 利福平卡那霉素仪器、耗材 MG L 培养基实验步骤 1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀

农杆菌介导水稻转化

实验概要本实验介绍了农杆菌介导的水稻转化。主要试剂GUS染色液:100 mmol/L NaPO4 (pH7.0);0.1% Triton X-100;10 mmol/L EDTA;0.5 mmol/L亚铁氰化钾头抱霉素,乙醇,次氯酸钠溶液主要设备高速离心机,培养箱,人工气候室实验材料水稻种子实验步骤

农杆菌介导转化拟南芥

实验概要1. 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。2. 掌握农杆菌介导转化拟南芥 的实验方法,了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用实验原理拟南芥(Arabidopsis thaliana)是一种十字花科植物,二年生草本,高7~40厘米,花期3~5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验

试剂、试剂盒缓释肥乙酰丁香酮仪器、耗材盆钵植物支撑器LB 培养基通用型试管YEP 固体培养基TSIM 培养基实验步骤一、材料1. 母体植株的生长( 1 ) 将母体植株种植于 12 , 7F ( 直径为 13 cm) 的盆钵中,每盆 4 株。( 2 ) 用 Levingtons  M2 培养土,并施用

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验

试剂、试剂盒:缓释肥                                                                  乙酰丁香酮  仪器、耗材:盆钵                                                          

农杆菌介导的植物遗传转化

农杆菌介导的植物遗传转化   【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。   【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。   【内容】:1、烟草无菌苗的准备  2、带有外源基因农杆菌的培养  

农杆菌介导的植物遗传转化

实验概要以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。主要试剂70%乙醇0.1% HgCl2无菌水卡那霉素(kan)羧苄青霉素(Cb)培养基:LB培养基100ml;MS 盐溶液(pH 7.0)100ml,

农杆菌介导的植物遗传转化

农杆菌介导的植物  遗传转化   【目的】:学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。   【要求】:以烟草叶片为材料,与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养,遗传转化烟草叶片,筛选抗性再生植株。   【内容】:1、烟草无菌苗的准备   2、带有外源基因农杆菌的培养   3、烟草叶片与对