荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验

试剂、试剂盒冰乙酸甲醇牛血清白蛋白柠檬酸钠低渗液胃蛋白酶HCl福尔马林SSC甲醛缓冲液仪器、耗材显微载玻片培养瓶巴斯德吸管微量移液器架金刚石笔洗耳球解剖显微镜倒置显微镜小型喷灯毛细吸管恒温箱微型离心机漩涡振荡器离心管实验步骤一、用于 FISH 分析的 PB1、PB2 和卵裂球(从卵母细胞和胚胎分离后)的制备PBl、PB2 标本的制备1.在 50 mL 培养瓶准备新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1),在冰柜中保存备用。2.将毛细吸管在小型喷灯的火焰上拉出内径约 50pm 的尖,内径太大可能会丢失极体。3.加几滴固定液再处理预先处理过的玻片以清除可能存在的油脂或灰尘,用无尘纸吸干。4.用巴斯德吸管吸少许 HPLC 纯水加到可悬挂液滴的载玻片上。5.从卵母细胞或受精卵成功取出极体后,可以用相差显微镜(10X、20X 物镜)来观察极体,极体存在于显微操作仪上的平皿里的 20uL 培养液滴里(液滴上面用矿物油覆盖)[6]。6.极体定位好后,......阅读全文

荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验

试剂、试剂盒冰乙酸甲醇牛血清白蛋白柠檬酸钠低渗液胃蛋白酶HCl福尔马林SSC甲醛缓冲液仪器、耗材显微载玻片培养瓶巴斯德吸管微量移液器架金刚石笔洗耳球解剖显微镜倒置显微镜小型喷灯毛细吸管恒温箱微型离心机漩涡振荡器离心管实验步骤一、用于 FISH 分析的 PB1、PB2 和卵裂球(从卵母细胞和胚胎分离后

荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验-一

试剂、试剂盒 冰乙酸甲醇牛血清白蛋白柠檬酸钠低渗液胃蛋白酶HCl福尔马林SSC甲醛缓冲液仪器、耗材 显微载玻片培养瓶巴斯德吸管微量移液器架金刚石笔洗耳球解剖显微镜倒置显微镜小型喷灯毛细吸管恒温箱微型离心机漩涡振荡器离心管实验步骤 一、用于 FISH 分析的 PB1、PB2 和卵裂球(从卵母细胞和胚胎

荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验-三

洗脱步骤以下是我们实验室常用的两种洗脱步骤,无需甲酰胺且省时。快速洗脱程序 I该洗脱程序适合 1~3 种颜色的探针混合物和 MdtiVysionPGT(13、18、21、X 和 Y 染色体)。1.将装有 0.4XSSC/0.3%NP-40(pH7.4) 溶液的染色缸放入 73°C 水浴中预热,在对标

荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用实验-二

三、探针制备、杂交及洗脱探针混合物1.三色探针混合:先将盛探针的三个离心管离心,然后用涡旋振荡器振荡理想的探针及 LSI 探针杂交缓冲液 10s。配 IOjuL 的探针杂交液,也就是 13、18 和 21 号染色体探针各取 lfxL,加到盛有 7;xLLSI 探针杂交缓冲液的微量离心管中,振

运用间期核荧光原位杂交对-常见非整倍体产前诊断实验

运用间期核荧光原位杂交对常见非整倍体的产前诊断             试剂、试剂盒 乙醇 HCl NaOH

运用间期核荧光原位杂交对常见非整倍体的产前诊断实验

荧光原位杂交(FISH) 包括荧光素标记的特异性探针与患者染色体 DNA 杂交,并用荧光显微镜检测信号。FISH 不仅能用于中期染色体,也可用于间期核的诊断,因此不需要培养细胞进行诊断。FISH 作为一种在临床细胞遗传学中很有潜力的诊断技术,在大约 15 年前问世。已经证实:用特异性探针 FISH

荧光原位杂交体植入的应用实验

荧光原位杂交体植入的应用实验PBl、PB2 标本的制备 1.在 50 mL 培养瓶准备新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1),在冰柜中保存备用。 2.将毛细吸管在小型喷灯的火焰上拉出内径约 50pm 的尖,内径太大可能会丢失极体。 3.加几滴固定液再处理预先处理过的玻片以清除可能存在的油脂或灰尘,用无尘

荧光原位杂交技术(FISH)在疾病分型诊断中的应用

 生命科学的发展,生物技术的进步使我们对疾病本质的认识不断地深入,也使我们拥有更多新的治疗方法和药物应对疾病的威胁。如何准确有效地利用这些新的治疗方法和药物治愈疾病是我们迫切需要研究的内容。如何对疾病进行正确的分型和诊断却是上述工作的基础。只有全面地把握病情,并在此基础上进行准确的判断和分析,才能为

临检中心开展胚胎植入前非整倍体遗传学检测室间质量评价计划调查

关于开展胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)室间质量评价计划调查的通知各有关单位实验室:  胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)是对体外受精产生的胚胎进行的检测,以帮助患者选择最佳胚胎进行移植,提高成功怀孕的机会。目前,PGT-A在辅助生殖机构应用十分广泛,为了解从事胚胎植入前非整倍体遗

非整倍体的概念

个体染色体数目不是成倍增加或者减少,而是成单个或几个的增添或减少。在二倍体植物中,获单倍体容易,获单体(缺少一条染色体)很难,说明缺少单条染色体的影响较少一套染色体的影响还要大。在多倍体植物中,获得单体就比较容易,说明遗传物质的缺失对多倍体的影响比对二倍体的影响来得小。

荧光原位杂交实验——荧光原位杂交技术

荧光原位杂交可应用于:(1)动植物基因组结构研究;(2)染色体精细结构变异分析;(3)病毒感染分析;(4)肿瘤遗传学和基因组进化研究。实验方法原理用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵

复合非整倍体的概念

中文名称复合非整倍体英文名称complex aneuploid定  义细胞中有两种或两种以上的染色体数目异常的个体。如同时有21-三体和X-三体。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

非整倍体的常见类型

常见有五种类型:①超二倍体,染色体数目多于二倍体;②假二倍体,染色体数目为二倍数,但有某号染色体的增减;③亚二倍体,染色体数目少于二倍数;④嵌合体,一个体中同时存在两个或两个以上染色体数目不同的细胞系;⑤异源嵌合体,一个体同时存在两个染色体数目不同的细胞系,且两个细胞系分别来自两个受精卵。形成非整倍

单细胞-DNA-和-FISH-分析应用于植入前基因诊断实验1

单倍体细胞具体基因位点的分析实验材料0.5ml 管中的单细胞或(卵)裂球用石蜡油覆盖使其溶化并中和试剂、试剂盒10 X 游离钾扩增缓冲液4dNTP 混合液正反引物Taq DNA 聚合酶MgCl2 扩增缓冲液轻石蜡油次级 PCR 正反内外引物10 X TBE 缓冲液DNA 凝胶上样缓冲液溴化二氨乙啡唆

单细胞-DNA-和-FISH-分析应用于植入前基因诊断实验2

单个卵裂球 FISH实验材料活检好的卵裂球试剂、试剂盒胚胎培养液和洗涤液低渗 部分固定液LSI杂交缓冲液乙醇DAPI Ⅱ甲酰胺冲洗液2 X SSC仪器、耗材FISH 探针橡皮泥微管Nunc 培养板带刻蚀环的Clay Adams玻片玻片染色缸盖玻片Hybrite热板荧光显微镜实验步骤1.大于 8 细胞

荧光原位杂交的应用

  该技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位,而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。  FISH最初用于中期染色体。从正在分化的细胞核中制备的这种染色体是高度凝缩的,每条染色体都具有可识别的形态,它们染色后将显现出特征性的着丝粒位置

荧光原位杂交实验

实验方法原理 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变

荧光原位杂交实验

 实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、

荧光原位杂交实验

            实验方法原理 用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴呈线性排列,因而可以探针直接与染色体进行杂交从而将特定的基因在染色体上

关于非整倍体的基本介绍

  个体染色体数目不是成倍增加或者减少,而是成单个或几个的增添或减少。在二倍体植物中,获单倍体容易,获单体(缺少一条染色体)很难,说明缺少单条染色体的影响较少一套染色体的影响还要大。在多倍体植物中,获得单体就比较容易,说明遗传物质的缺失对多倍体的影响比对二倍体的影响来得小。

关于非整倍体的类型介绍

  常见有五种类型:  ①超二倍体,染色体数目多于二倍体;  ②假二倍体,染色体数目为二倍数,但有某号染色体的增减;  ③亚二倍体,染色体数目少于二倍数;  ④嵌合体,一个体中同时存在两个或两个以上染色体数目不同的细胞系;  ⑤异源嵌合体,一个体同时存在两个染色体数目不同的细胞系,且两个细胞系分别来

荧光原位杂交(FISH)技术的应用与实验流程

分子诊断是诊断市场增长最快的部分。萤光原位杂交和FISH分析包括700万人口的5亿美元的市场。。FISH市场预计为11%,较去年同期成长为下一个五年。400至500万人口的市场,在美国产生。FISH测试是用来识别生物标记DNA / RNA的形式。它是用于遗传作图和基因表达分析公知的方法。这种

二维及彩色多普勒超声在胎盘植入诊断中的应用价值

  胎盘植入属于产科常见并发症,由多种因素引起,是一种严重并发症,若不及时进行治疗,将易造成大出血等问题,危害孕妇及胎儿的生命健康,所以尽早对胎盘植入患者进行诊断和治疗有着重要作用。胎盘植入的发生与多种因素有关,包括剖宫产、引产、产褥感染、高龄等因素,主要表现为胎盘滞留、剥离面大出血。临床在对胎盘植

概述荧光原位杂交的技术应用

  作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。  荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染

荧光原位杂交的技术应用

作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产

荧光原位杂交的技术应用

(一)基因(或DNA片段)染色体定位和基因图谱绘制目前应用的基因定位的主要方法是FISH。分离到的DNA序列直接通过FISH,同时采用多种颜色荧光素的标记探针,结合中期染色体和间期细胞方面的信息,可快速确定一-系列DNA序列之间的相互次序和距离,完成基因制图。用不同颜色炎光索标记2个不同的DNA链,

荧光原位杂交的技术应用

作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产

荧光原位杂交的主要应用

作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产

​-荧光原位杂交的技术应用

作为一种可视化特定DNA序列的分子细胞遗传学技术,荧光原位杂交技术目前被广泛应用于染色体畸变。如非整倍体、染色体重组。其基本流程包括探针标记、探针的变性、样本变性、杂交和荧光信号采集。荧光原位杂交技术在基因定性、定量,整合、表达等方面的研究中颇具优势,目前已经被广泛应用于遗传病诊断、病毒感染分析、产

荧光原位杂交技术的应用

  该技术不但可用于已知基因或序列的染色体定位,而且也可用于未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。  FISH最初用于中期染色体。从正在分化的细胞核中制备的这种染色体是高度凝缩的,每条染色体都具有可识别的形态,它们染色后将显现出特征性的着丝粒位置