技术和方案21EMS诱变

实验步骤1.培养酵母细胞过夜,使細胞密度达到 2X108 个/ml。2.从同一培养物中转移两份 lml 的样品至离心管中,5000 g,离心 10s 收集细胞。3.丢弃上清,用无菌蒸馏水悬浮细胞,再离心收集细胞。4.重悬细胞在 1 ml 的无菌 0.1mol/L 磷酸钠中。5.用血球记数板测定细胞密度。6.向其中一离心管中加入 30^x1EMS 并剧烈振荡分散(另一管作为未诱变的对照)。两份样品在 30°C 温育 lh,不时晃动。7.离心收集细胞,弃上清至 EMS 废液收集瓶中。重悬细胞在 200ul 的 5% 硫代硫酸钠溶液中,转移至新的离心管中并将使用过的离心管丢弃至 EMS 废液收集瓶中。8.用 200|ul 的 5% 硫代硫酸钠溶液洗细胞两次(废液弃至 EMS 废液收集瓶中),重悬细胞在 lml 的无菌水中。9.细胞可以直接涂布平板,但在有些情况下让细胞在选择培养基上生长之前先生长一段时间十分重要,这样能使细胞内的野生型......阅读全文

“纳米快递员”通过EMS实现远程精准递药

在好莱坞电影《奇妙旅程》中,为了救治病人,外科医生可以缩小为一百万分之一,进入人体内进行血管手术。如今,科幻照进现实,随着智能时代的到来,能在微观尺度执行任务的微纳机器人因其在药物输送、微创手术、医疗诊断、治疗等方面的应用受到广泛关注。北京时间2月23日,一项发表于国际学术期刊Science Adv

“纳米快递员”通过EMS实现远程精准递药

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/2/494428.shtm在好莱坞电影《奇妙旅程》中,为了救治病人,外科医生可以缩小为一百万分之一,进入人体内进行血管手术。如今,科幻照进现实,随着智能时代的到来,能在微观尺度执行任务的微纳机器人因其在药物输送

盒式诱变的简介

  盒式诱变(cassette mutagenesis)是一种定点诱变技术,其方法是利用一段人工合成的具有突变序列的双链寡核苷酸片段,取代野生型基因中相应序列。这种诱变的双链寡核苷酸片段是由两条人工合成的寡核苷酸链组成的,当它们退火时,会按照设计要求产生出克隆需要的粘性末端。这些合成的寡核苷酸片段就

定点诱变(DpnI法)

1、引物设计:每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。2、反应:使用高保真的pyrobest DNA聚合酶 ;循环次数少,一般为12个循环。反应体系:10x pyrobest Buffer                         5 uldN

定点诱变(DpnI法)

1、引物设计:每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。2、反应:使用高保真的pyrobest DNA聚合酶 ;循环次数少,一般为12个循环。反应体系:10x pyrobest Buffer 5 uldNTP Mixture(10mM) 1ul模板DN

饱和诱变的定义

对基因的某一小区域内碱基进行所有形式或所有可能存在形式的诱变。

常用化学诱变剂介绍

化学诱变剂主要有烷化剂(包括EMS、EI、NEU、NMU、DES、MNNG、NTG等),天然碱基类似物,氯化锂、亚硝基化合物、叠氮化物、碱基类似物、抗生素、羟胺和吖啶等嵌入染料。

关于基因诱变的室温等离子体诱变剂的介绍

  常压室温等离子体(Atmospheric and Room Temperature Plasma)的简称,(缩写为ARTP)能够在大气压下产生温度在25-40 °C之间的、具有高活性粒子(包括处于激发态的氦原子、氧原子、氮原子、OH自由基等)浓度的等离子体射流。按照热力学平衡状态,等离子体可分为

EMS单调可变气隙电磁铁技术指标

锦正茂EMS单调可变气隙电磁铁EMS型电磁铁:磁场气隙单向可调,双轭构成闭合磁路,有较好的刚性,磁场方向垂直;直立座放,样品可置于下极头平面上,取放样品方便,适用于多次重复测量。广泛应用于霍尔效应研究,磁电阻效应研究、磁滯伸缩研究、转矩磁强计、力法磁强计、磁化率测量装置、磁性材料测量装置以及对磁性器

酵母菌细胞的诱变实验

实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材 试管摇床离心机平板实验步骤 1.  将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基,于30℃继续培养。检查细胞密度,记录并调整到2×108细胞/ml。2.  转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5

甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂盒介绍

主要用途YIJI甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂是一种旨在使用烷化剂甲磺酸乙酯诱导细胞发生变异而产生HPRT或TK基因功能缺失的突变株,成为筛选应用标记细胞的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于动物细胞和人体细胞。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,突变频率高。技术背

区域特异性诱变实验

区域特异性诱变             实验方法原理 可在长达3‘的克隆化DNA片段上产生大量的随机分布的核苷酸替换突变,在将DNA克隆到一个可用来分离单链DNA的载体后,用各种可造

区域特异性诱变实验

区域特异性诱变实验,用于(1)基因诱导改造(2)基因的特定表达(3)临床抗肿瘤等靶点的发挥。实验方法原理可在长达3‘的克隆化DNA片段上产生大量的随机分布的核苷酸替换突变,在将DNA克隆到一个可用来分离单链DNA的载体后,用各种可造成特定碱基损伤的化学试剂处理。实验材料DNA试剂、试剂盒乙酸钠亚硝酸

DNA的接头分区诱变实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 雾水乙醇EDTAT4 DNA连接酶TENaCl仪器、耗材 培养箱水浴锅实验步骤 1.  用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核酸酶在质粒的目的区域产生一嵌套式的5’或3端'缺失突变体。首先在目的序列附近用一限制酶使质粒线性化,在用Bal 31消化时,应确定其切割效

插入诱变技术的作用机理

细菌、植物和动物的基因转化具有重要的研究和商业价值。定向的外源基因的导入可以鉴定原来内源基因的功能,因为导入的外源基因可以导致被插入内源基因的突变或表达改变。这种突变技术被称为插入诱变,通常使用逆转录病毒作为DNA传递的载体。这种插入突变多被用于肿瘤细胞特定位置癌基因的鉴定。

探秘丹参太空诱变育种基地

  2008年9月,天士力集团将源自商洛的5克丹参种子,搭载“神七”飞船进入太空,航行68小时27分。近日,“天士力太空丹参第二代种苗移栽仪式”举行。经过两年多努力,该种苗正式移栽大田试验,将生产高质量丹参,通过复方丹参滴丸走向世界――  天士力商洛太空丹参实验基地是中药

区域特异性诱变实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 乙酸钠亚硝酸钠TE无水乙醇dNTP反转录酶RNA酶洗脱液溴化乙锭仪器、耗材 水浴锅培养箱实验步骤 1.  用限制性内切核酸酶消化DNA以获得目的DNA片段,将靶片段双向克隆到M13噬菌体载体或含有M13复制起始子的质粒载体中。从100 ml 感染细抱培养物中提取单链DN

DNA的接头分区诱变实验

            实验材料 DNA 试剂、试剂盒 雾水乙醇 EDTA T4 DNA连接酶 TE

诱变物质的微核测定

实验概要1、了解微核测定的方法与意义 2、寻找新的测试系统及新的更安全有效的植物诱变剂实验原理微核(micronuclei)简称(MCN)是真核类生物细胞中的一种异常结构,往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期,微核呈圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3以下。微核的折光率及细胞化学

DNA的接头分区诱变实验

Linker scanner mutations (接头分区突变):体外在限制性片段加上位点,使两个DNA分子发生重组产生,结果在重组的位点加上连接序列。实验材料DNA试剂、试剂盒雾水乙醇EDTAT4 DNA连接酶TENaCl仪器、耗材培养箱水浴锅实验步骤1.  用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核

微生物的诱变育种

诱变育种是利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群,促进其突变率大幅度提高,然后采用简便、快速和高效的筛选方法,从中挑选少数符合育种目的的突变株,以供生产实践或科学研究用. 当前发酵工业和其他生产单位所使用的高产菌株,几乎都是通过诱变育种而大大提高了生产性能的菌株.诱变育种除能提高产量

关于诱变后代的基本介绍

  经诱变处理产生的诱变一代,以M1表示。由于受射线等诱变因素的抑制和损伤,M1的发芽率、出苗率、成株率、结实率一般较低,发育延迟,植株矮化或畸形,并出现嵌合体。但这些变化一般不能遗传给后代。诱变引起的遗传变异多数为隐性,因此M1一般不进行选择,而以单株、单穗或以处理为单位收获。诱变二代(M2)是变

常用物理诱变剂介绍

物理诱变剂主要有紫外线,ARTP,X—射线,γ-射线,快中子,激光,微波,离子束等。1等离子体常压室温等离子体(Atmospheric and Room Temperature Plasma)的简称,能够在大气压下产生温度在25-40 °C之间的、具有高活性粒子(包括处于激发态的氦原子、氧原子、氮原

人工诱导多倍体诱变

实验概要1、了解人工诱发多倍体植物的原理、方法及其意义; 2、观察植物染色体数目的各种变异及其在有丝分裂过程中的细胞学特征。实验原理植物染色体数目一般为二倍体(2n),但是在自然条件下和人工条件下可以诱发染色体数目的变异。染色体数目变异分为整倍性变异和非整倍性变异。整倍性变异有同源多倍体变异和异源多

枯草芽孢杆菌的紫外线诱变选育实验——紫外线诱变法

紫外线对微生物有诱变作用,主要引起是DNA的分子结构发生改变(同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体),从而引起菌体遗传性变异。将细胞计数后的平板,分别向菌落数在5-6个左右的平板内加碘液数滴,在菌落周围将出现透明圈。分别测量透明圈直径与菌落直径并计算其比值(HC值),并与对照平板进行比

位点专一诱变的概念

中文名称位点专一诱变英文名称site-specific mutagenesis;site-directed mutagenesis定  义使DNA分子中某一特定的核苷酸序列发生改变。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

定点诱变实验——基本方案

定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段。实验材料DNA试剂、试剂盒TE寡核

关于诱变剂的基本介绍

  凡是能引起生物体遗传物质发生突然或根本的改变,使其基因突变或染色体畸变达到自然水平以上的物质,统称为诱变剂。当各种诱变剂被人为地强加于地球环境中之后,生物基因的情报系统由于诱变剂的作用受到损伤而发生紊乱,不能正确地传递遗传信息,具体地说就是发生了突变。那么这类诱变剂则被认为是环境诱变剂。未经人工

关于基因定点诱变的概述

  对于任何一种遗传学研究,尤其是有关基因的结构与功能的分析,突变都是最基本的手段。经典的方法是,应用能够修饰DNA分子的化学诱变剂或物理诱变剂处理生物体。此类诱变方法虽然已得到了广泛的应用,获得了大量的突变体,但亦存在着诸多的不便之处。  第一、经受诱变剂处理的生物体,它的任何基因都有可能发生突变

关于诱变剂的利弊介绍

  环境诱变剂的利弊。1927 年,美国遗传学家H.J.Muller 首次利用x 射线成功地诱发了果蝇突变,开拓了诱发突变的新领域。从此以后,人们利用诱发突变进行育种工作,取得了极大的成功,并在农学、工业微生物学、生物学、医学等领域也都取得了巨大的成绩。然而,当时的人们并不明白环境诱变剂也会对人体产