技术和方案21EMS诱变
实验步骤1.培养酵母细胞过夜，使細胞密度达到 2X108 个/ml。2.从同一培养物中转移两份 lml 的样品至离心管中，5000 g，离心 10s 收集细胞。3.丢弃上清，用无菌蒸馏水悬浮细胞，再离心收集细胞。4.重悬细胞在 1 ml 的无菌 0.1mol/L 磷酸钠中。5.用血球记数板测定细胞密度。6.向其中一离心管中加入 30^x1EMS 并剧烈振荡分散（另一管作为未诱变的对照）。两份样品在 30°C 温育 lh，不时晃动。7.离心收集细胞，弃上清至 EMS 废液收集瓶中。重悬细胞在 200ul 的 5% 硫代硫酸钠溶液中，转移至新的离心管中并将使用过的离心管丢弃至 EMS 废液收集瓶中。8.用 200|ul 的 5% 硫代硫酸钠溶液洗细胞两次（废液弃至 EMS 废液收集瓶中），重悬细胞在 lml 的无菌水中。9.细胞可以直接涂布平板，但在有些情况下让细胞在选择培养基上生长之前先生长一段时间十分重要，这样能使细胞内的野生型......阅读全文
技术和方案21－EMS诱变
实验步骤1.培养酵母细胞过夜，使細胞密度达到 2X108 个/ml。2.从同一培养物中转移两份 lml 的样品至离心管中，5000 g，离心 10s 收集细胞。3.丢弃上清，用无菌蒸馏水悬浮细胞，再离心收集细胞。4.重悬细胞在 1 ml 的无菌 0.1mol/L 磷酸钠中。5.用血球记数板测定细胞密
EMS电磁搅拌的简介
电磁搅拌是广泛应用的连铸生产技术，通过产生的电磁力，改善消除结晶器内钢水的过热度，可提高铸坯的等轴晶率，得到良好凝固组织的铸坯，从而改善成品的性能。电磁搅拌的实质就是借助在铸坯的液相穴内感生的电磁力强化液相穴内钢水的运动，由此强化钢水的对流、传热和传质过程，从而控制铸坯的凝固过程。
电磁搅拌(EMS)的发展历程
电磁搅拌，简称EMS。是由瑞典ASEA公司首先提出的，1932年Dreyfus博士从法拉第的电磁感应原理中发现，低速移动着的感应磁场能在钢水中产生强力的搅拌作用，并与Sandvik厂合作，于1948年研制成第一台用于电弧炉炼钢的电磁搅拌器，后来该技术逐渐应用于感应熔炼炉、钢包精炼炉和连铸机。电磁
常用化学诱变剂抗生素介绍
如平阳霉素（PYM），PYM是一种抗生素，属于博莱霉素的一类。目前主要作为抗肿瘤药应用于临床，对多种癌症具有较好的疗效。抗生素具有高度选择性，能抑制细胞的生长，其中的大多数对维持生命有重要意义。作为一种新的诱变剂，平阳霉素能直接作用于DNA，高浓度时可使DNA链断开，低浓度时能抑制连接酶，阻止胸腺嘧
关于诱变的化学诱变剂抗生素的介绍
如平阳霉素（PYM），PYM是一种抗生素，属于博莱霉素的一类。目前主要作为抗肿瘤药应用于临床，对多种癌症具有较好的疗效。抗生素具有高度选择性，能抑制细胞的生长，其中的大多数对维持生命有重要意义。作为一种新的诱变剂，平阳霉素能直接作用于DNA，高浓度时可使DNA链断开，低浓度时能抑制连接酶，阻止胸
电磁搅拌(EMS)的作用原理简介
电磁搅拌的实质就是借助在铸坯的液相穴内感生的电磁力强化液相穴内钢水的运动，由此强化钢水的对流、传热和传质过程，从而控制铸坯的凝固过程，对提高铸坯质量具有积极的作用。 连铸坯液相穴内钢水对流运动对消除过热度、改善铸坯凝固组织和成分偏析等有重大影响。而钢水流动的驱动力来自铸流的动能和外力，前者与浇
基因突变的诱变机制定向诱变
利用重组DNA技术使DNA分子在指定位置上发生特定的变化,从而收到定向的诱变效果。例如将DNA分子用某一种限制性核酸内切酶处理,再用分解DNA单链的核酸酶S1处理,以去除两个粘性末端的单链部分,然后用噬菌体T4连接酶将两个平头末端连接起来,这样就可得到缺失了相应于这一限制性内切酶的识别位点的几个核苷
电磁搅拌－(EMS)操作时应注意哪些
（1）可能卷入结晶器保护渣，使铸坯夹杂物含量增加。M -EMS 搅拌能改善铸坯质量，搅拌强度越大，效果越明显，但搅拌强度过大，会引起保护渣的卷入，反而使夹杂物含量增加。同时，电磁搅拌还直接影响结晶器液面的检测效果，目前普遍采取降低搅拌线圈安装位置来解决这一问题，但使M-EMS 的冶金作用受到了
常用化学诱变剂烷化剂介绍
烷化剂通常带有1个或多个活性烷基，此基团能够转移到其它电子密度高的分子上去，使碱基许多位置上增加了烷基，从而在多方面改变氢键的能力。例如EMS被证明是最为有效而且负面影响小的诱变剂。与其他烷化诱变剂类似，是通过与核苷酸中的磷酸、嘌呤和嘧啶等分子直接反应来诱发突变。EMS诱发的突变主要通过两个步骤来完
关于基因诱变的化学诱变剂烷化剂的介绍
烷化剂通常带有1个或多个活性烷基，此基团能够转移到其它电子密度高的分子上去，使碱基许多位置上增加了烷基，从而在多方面改变氢键的能力。例如EMS被证明是最为有效而且负面影响小的诱变剂。与其他烷化诱变剂类似，是通过与核苷酸中的磷酸、嘌呤和嘧啶等分子直接反应来诱发突变。EMS诱发的突变主要通过两个步骤
诱变－PCR－实验
试剂、试剂盒 氯仿 异戊醇乙醇矿物油或者一个蜡珠3mol L NaOAc5 mmol L MnCl2突变 PCR 缓冲液DNA 聚合酶Native Taq 或 AmpliTaq DNA 聚合酶高纯度的脱氧核苷 5'-三磷酸dNTP 混合物模板 DNA引物琼脂糖凝胶用溴化乙锭染色仪器、
诱变－PCR－实验
诱变 PCR 最大的优势是以一种没有偏好的方式引入了各种类型的突变，而不是获得高水平的单一的扩增。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒氯仿 异戊醇乙醇矿物油或者一个蜡珠3mol L NaOAc5 mmol L MnCl2突变 PCR 缓冲液DNA 聚合酶Nati
USE－诱变实验
本方法中，两条寡核苷酸引物杂交到变性重组质粒 DNA 双链的同一条链上。一条引物（诱变引物）携带一个拟引进靶 DNA 序列的突变，第二条引物携带一个能破坏质粒单一限制酶位点的突变。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料带 mutS 表型（
USE－诱变实验
实验材料 带 mutS 表型（例如BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态试剂、试剂盒 退火缓冲液贮存液合成缓冲液噬菌体 T4DNA 连接酶噬菌体 T4DNA 聚合酶或测序酶单一位点的限制性内切核酸酶琼脂糖凝胶诱变引物选择引物质粒 DNA仪器、耗材 70°C
USE－诱变实验
实验材料 带 mutS 表型（例如 BMH71-18) 的转化用大肠杆菌感受态 带 mut+表型的转化用大肠杆菌感受态 试剂、试剂盒
诱变－PCR－实验
试剂、试剂盒 氯仿 异戊醇 乙醇 矿物油或者一个蜡珠 3mol L NaOAc 5 mmol L MnCl2 突变 PCR 缓冲液
关于基因诱变的微波诱变剂的介绍
微波辐射属于一种低能电磁辐射，具有较强生物效应的频率范围在300MHz~300GHz，对生物体具有热效应和非热效应。其热效应是指它能引起生物体局部温度上升，从而引起生理生化反应；非热效应指在微波作用下，生物体会产生非温度关联的各种生理生化反应。在这两种效应的综合作用下，生物体会产生一系列突变效应
关于基因诱变的激光诱变剂的介绍
激光在微生物诱变育种方面的研究与开发应用比较晚。激光诱变育种技术研究始于20世纪60年代，经过世界各国40多年的开发应用研究，不仅证明激光和普通光在本质上都是电磁波，它们发光的微观机制都与组成发光物质的原子、分子能量状态和变化密切相关。激光是一种与自然光不同的辐射光，它具有能量高度集中、颜色单一
关于基因诱变的γ射线诱变剂的介绍
γ-射线属于电离辐射，是电磁波.一般具有很高的能量，能产生电离作用，因而能直接或间接地改变DNA结构.其直接效应是，脱氧核糖的碱基发生氧化，或脱氧核糖的化学键和糖-磷酸相连接的化学键断裂，使得DNA的单链或双链键断裂.其间接效应是电离辐射使水或有机分子产生自由基，这些自由基与细胞中的溶质分子起作
定点诱变与盒式诱变的比较介绍
构建一个位点导向的文库涉及使用含有一个或多个简并密码子的合成DNA片段替代一个基因片段。这可以通过双链盒式诱变或单链寡核苷酸定向诱变来实现。我们相对倾向于寡核苷酸定向诱变，因为不同于盒式诱变，它不需要在目的区域附近有独特的限制性酶切位点，并且构建一个文库只需要一个寡核苷酸片段。因此，这个方法相当
酵母菌细胞的诱变实验——甲乙硫醚诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材试管摇床离心机平板实验步骤1. 将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基，于30℃继续培养。检查细胞密度，记录并调整到2×108细胞/ml。2. 转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5~10
关于诱变的化学诱变剂的介绍
1、碱基类似物 碱基类似物是与DNA正常碱基结构类似的化合物，能在DNA复制时取代正常碱基掺入并与互补碱基配对。如5-溴尿嘧啶（BU）和2-氨基嘌呤（AP），都能引起AT碱基对转换为GC碱基对。 2、氯化锂 氯化锂诱变，普遍认为是它导致AT-GC碱基对的转换或导致碱基的缺失。 3、叠氮化
酵母菌细胞的诱变实验——紫外光诱变
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD刀豆氨酸仪器、耗材紫外光杀菌灯紫外光放射量测定器实验步骤1. 将过夜培养的酵母菌培养液接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养。离心5~10 s，用1 ml 无菌水重悬沉淀细胞，重复洗涤1次，再用1 ml 无菌水重悬。 2. 检查细胞密度，记录数据后将细胞密度调
定点诱变实验
基本方案 利用PCR引物点突变 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
定点诱变实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE寡核苷酸引物质粒dNTPDNA聚合酶氯仿石蜡油无水乙醇仪器、耗材 离心管热循环仪离心机实验步骤 1. 利用突变区两侧的限制性内切酶位点将待诱变的DNA片段亚克隆进高拷贝数的载体中。 2. 用小量制备的质粒提取模板DNA，用TE缓冲液重悬100 ng DNA至终浓
复合诱变的概念
复合诱变包括：两种或多种诱变剂的先后使用，同一种诱变剂的重复作用和两种或多种诱变剂的同时使用.普遍认为，复合诱变具有协同效应.如果两种或两种以上诱变剂合理搭配使用复合诱变较单一诱变效果好. 如贺筱蓉等采用紫外同平板梯度浓度的亚硝基胍、纯铜蒸气混合诱变，筛选到高产菌株效价提高了53.2%，其原理可能是
诱变育种的概念
是人为的措施诱导植物遗传基因产生变异，然后在产生变异的植株中按照需要选育出新的优良品种。诱变育种常用的有物理因素和化学因素，物理因素如各种射线、微波或激光等处理诱变材料，习惯上称之为辐射育种；化学因素是运用能导至遗传物质改变的一些化学药物——诱变剂处理诱变材料促使变异，常称之为化学诱变。
关于基因诱变的离子束诱变剂的介绍
离子注入是20世纪80年代初兴起的一项高新技术，主要用于金属材料表面的改性。1986年以来逐渐用于农作物育种，近年来在微生物育种中逐渐引入该技术 [2] 离子注入诱变是利用离子注入设备产生高能离子束（40~60keV）并注入生物体引起遗传物质的永久改变，然后从变异菌株中选育优良菌株的方法。离子束
关于基因诱变的紫外线诱变剂的介绍
我们知道，DNA和RNA的嘌呤和嘧啶有很强的紫外光吸收能力，最大的吸收峰在260nm，因此波长260nm的紫外辐射是最有效的诱变剂.对于紫外线的作用已有多种解释，但研究的比较清楚的一个作用是使DNA分子形成嘧啶二聚体，即两个相邻的嘧啶共价连接，二聚体出现会减弱双键间氢键的作用，并引起双链结构扭曲
常用化学诱变剂介绍
化学诱变剂主要有烷化剂（包括EMS、EI、NEU、NMU、DES、MNNG、NTG等），天然碱基类似物，氯化锂、亚硝基化合物、叠氮化物、碱基类似物、抗生素、羟胺和吖啶等嵌入染料。