荧光染色显示Y染色质法

实验方法原理在间期细胞核中,女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体阳性,男性为阴性。男性Y染色质位于间期细胞核近中央部,易为盐酸阿的平着色,荧光显微镜下观察发较强荧光,呈点状小体,发光部分系Y染色体异固缩的长臂。初代培养细胞和二倍体细胞株均可观察到性染色质,传代细胞系表现不规律。试剂、试剂盒Sorensen PBSAtebrine实验步骤一、染色步骤1. 细胞盖片培养细胞用37 ℃的BSS漂洗后,立即投入染色液内染色5~10 分钟(亦可先固定再染色);如用涂片标本则应待涂片干后,迅速投入96 %酒精固定10~15 分钟后再染色; 2. 分化用96 %酒精分化1 分钟......阅读全文

细胞转染实验的实验步骤

细胞传代(1)试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液,消化1分钟(37。C,5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁,

常规切片制备的注意事项(二)

  6. 包埋   用包埋剂来支持组织的过程称包埋。最常用的是石蜡包埋法。包埋的关键一是平整,二是方位。要求在包埋时,应采用镊子轻压组织块拱起部份,使之平贴于底部,通常采用组织的最大面包埋。囊壁、管腔组织应竖直包埋。小块多颗组织,应尽量放在一起,并保证在一个平面上。修去两边的余蜡(所谓的两边,

将基因转移至未分化ES细胞实验

ES细胞电穿孔 将ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上细胞用于冻存和体外分化 融化96孔板上的细胞            

将基因转移至未分化ES细胞实验

ES细胞电穿孔 将ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上细胞用于冻存和体外分化 融化96孔板上的细胞             实验材料

组织病理实验_石蜡切片法

实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。实验

将基因转移至未分化ES细胞实验

分配96孔板上细胞用于冻存和体外分化 试剂、试剂盒 DMSOPBS胰酶溶液冻存液 仪器、耗材 平底 96 孔板移液器ES 生长培养基ES 分化培养基 实验步骤 1. 准备下列试剂和材料: DMSO(组织培养级) 平底 96 孔板 多道移液器 无菌多道

尼氏染色实验

实验方法原理尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏

尼氏染色实验

基本方案             实验方法原理 尼氏染色法(Nissl Staining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种

ES细胞分化培养实验——培养皿ES细胞集落

实验材料ES 细胞单一胚胎样体仪器、耗材细菌培养皿ES 分化培养基实验步骤1. 准备下列试剂和材料:悬滴培养的 ES 细胞单一胚胎样体100 mm 细菌培养皿ES 分化培养基2. 在 100 mm 细菌培养皿中加 10 ml 预热的分化培养基。3. 从温箱中取出培养 2 天的悬滴培养物。小心翻转培养

石蜡切片和半薄切片的制作

实验概要本方法介绍了石蜡切片和半薄切片的制作流程。主要试剂4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸缓冲液),乙醇,二甲苯,纯石蜡,蜂蜡,树脂胶主要设备真空泵,AO手摇式切片机,Olypmus BH-2型显微镜,LKB超薄切片机实验步骤1. 石蜡切片的制作   1) 取材固定新鲜配置4%戊二醛固定液(pH7.

细胞的脱分化和再分化

各种植物细胞在植物体内都处于分化状态。要使植物细胞从分化状态过渡到有繁殖能力的分生状态,其细胞结构必须发生深刻的变化,否则无法完成这个过渡。这种在植物体上已分化的细胞和组织,在培养条件下逐渐恢复到分生状态的过程,叫作脱分化。已经脱分化的细胞在一定条件下,又可经过愈伤组织或胚状体,再分化出根和芽,形成

培养细胞的染色实验——Feulgen染色法

实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸,使嘌呤碱基与糖苷犍破坏,嘌呤碱脱掉,脱氧核糖的中的醛基游离;醛基能与Schiff试剂相结合,形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要,若温度过低

细胞凋亡检测:形态学特征的检测方法1

一、普通光学显微镜观察方法(一)苏木素-伊红染色(HE 染色法)石蜡组织切片的HE染色1、取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。2、切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇

小鼠肥大细胞的形态学观察实验

实验方法原理肥大细胞的胞质中充满许多粗大的水溶性、嗜碱性和异染性的颗粒,颗粒中含有多巴胺,组胺,肝素。5-羟色胺等活性物质。这些物质中含有多硫酸脂和硫酸黏多糖类,能与异染性染料结合,因此,用中性红、美蓝、甲苯胺蓝等染料处理上皮组织均可将肥大细胞胞质中的水溶性、嗜碱性和异染性的颗粒显示出来。实验材料成

引物介导的原位标记技术实验

            实验材料 中期染色体分裂相 抗地高辛抗体 试剂、试剂盒 三磷酸核苷 Tth 或 Taq DNA 聚

细胞转染实验的步骤

细胞传代(1)试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液,消化1分钟(37。C,5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁,

细胞伤口愈合实验步骤

1.细胞在含有10%FBS的DMEM培养基中生长。2.细胞以一定密度接种到24孔细胞培养板中,生长24小时后,单层细胞融合度应达到70-80%。3.不要更换培养基。用新的1ml枪头轻轻的在单层培养细胞间划痕,划痕横穿过孔,枪头尽量与板孔的底部垂直,不要倾斜。这样产生的gap的距离才与枪头末端的外直径

多聚螯合物酶组化实验——PowerVision-法

实验方法原理PowerVision 系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子,呈串珠状排列,由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子,与酶和免疫球蛋白交联,排列紧密,形成串珠状多聚物,因此相对分子质量较小。其特点是简便、敏感。其操作流程同 EnVision 法,但一抗的稀释

肥大细胞染色实验

肥大细胞来源于未分化的间质细胞,分布于血管周围黏膜下、疏松结缔组织、肿瘤组织及过敏性疾病等组织中,易被异染性染料着色。内容来源《免疫组织化学实验技术及应用》实验方法原理肥大细胞形态较大(20~30 μm),细胞核较小,细胞质内充满许多的圆形嗜碱性颗粒。由于颗粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也属于硫酸黏

甲基绿复染试剂盒产品说明书(中文版)使用说明

  甲基绿复染试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   YIJI甲基绿复染试剂是一种旨在通过甲基绿染料的使用,使细胞核呈现淡绿色,从而与组织化学中的   样品染色产生色彩差异和对比,便于观察分析的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、   成功实验证明的。广泛应用于组织化学

甲基绿复染试剂盒产品说明书(中文版)使用说明

主要用途YIJI甲基绿复染试剂是一种旨在通过甲基绿染料的使用,使细胞核呈现淡绿色,从而与组织化学中的样品染色产生色彩差异和对比,便于观察分析的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。广泛应用于组织化学的深色染料,例如BCIP/NBT,BCIP/INT或DAB等苏木素效果欠

荧光原位杂交实验步骤

荧光原位杂交实验步骤1)探针变性将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。2)标本变性①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。       ②取出玻片标本,将其浸在70~75

引物介导的原位标记技术实验

引物介导的原位标记技术(primed in situ labeling,PRINS) 是一种对细胞及组织的特异 DNA 序列染色的杂交技术,它能够得到和 FISH 技术相同类型的结果。实验材料中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X

植物细胞的脱分化和分化培养

一、实验原理 分化了的植物根、茎、叶细胞往往具有全能性,在一定条件下进行离体培养,给于一定的营养与激素,可以脱分化为愈伤组织,由愈伤组织制备成细胞悬浮液,在一定的条件下经振荡培养,逐渐形成具有两极性的胚状体,经过进一步的分化培养,给于不同的营养和激素成分,又可以生出完整的

谷胱甘肽的测定实验——免疫组织法

实验方法原理抗生物素蛋白具有与4个生物素亲和力极高的结合点,ABC法是利用抗生物素蛋白分别连接生物素标记二抗和生物素标记的酶。实验材料抗生物素蛋白试剂、试剂盒Tris-HClDAB丙酮PBS苏木素二甲苯仪器、耗材恒温培养箱实验步骤一、材料准备1.  DAB-H2O2配制:以0.05 mol/l Tr

病原微生物染色实验——抗酸杆菌

实验方法原理结核杆菌和麻风杆菌通常称为抗酸杆菌,由于菌体内含有脂质蛋白质和多糖类物质,并由糖脂形成一个蜡质的外壳,当染色剂结合形成复合物后,用含酸分化剂处理也不易脱色,具有抵抗酸的作用,所以被称为抗酸杆菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸杆菌染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙

光学和电子显微镜样品制备的制片法

显微制片法一般包括切片法、整体封片法、涂片法和压片法4类。①切片法。光学显微镜的切片厚度在2~25微米之间,一般动植物材料的切片以厚10微米左右为合适。切片法根据包埋剂的不同而有所不同。常用的是石蜡切片法、棉胶切片法、冰冻切片法、乙二醇甲基丙烯酸脂法(简称GMA法)。石蜡切片法包括固定、包埋、切片、

间接原位PCR(原位杂交PCR)

间接原位PCR(原位杂交PCR)             实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒

脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验

脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞                                                                                      试剂、试剂盒神经诱导

脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验

脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒神经诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱其他培养基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁