荧光染色显示Y染色质法
实验方法原理在间期细胞核中,女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体阳性,男性为阴性。男性Y染色质位于间期细胞核近中央部,易为盐酸阿的平着色,荧光显微镜下观察发较强荧光,呈点状小体,发光部分系Y染色体异固缩的长臂。初代培养细胞和二倍体细胞株均可观察到性染色质,传代细胞系表现不规律。试剂、试剂盒Sorensen PBSAtebrine实验步骤一、染色步骤1. 细胞盖片培养细胞用37 ℃的BSS漂洗后,立即投入染色液内染色5~10 分钟(亦可先固定再染色);如用涂片标本则应待涂片干后,迅速投入96 %酒精固定10~15 分钟后再染色; 2. 分化用96 %酒精分化1 分钟......阅读全文
细胞免疫荧光实验步骤
细胞免疫荧光主要用于蛋白定位研究和细胞内信号转导,细胞免疫荧光技术是利用免疫技术和荧光标记技术相结合,原理就是利用抗原-抗体反应之后,采用荧光标记,标记完成后,显微镜下观察细胞内某种抗原成分的多少,从而做出一个定位研究,也可以为细胞内信号传导提供一个明确的指导,细胞免疫荧光具有敏感性强、特异性高、速
NK细胞活性检测实验步骤
细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp
引物介导的原位标记技术实验
引物介导的原位标记技术(primed in situ labeling,PRINS) 是一种对细胞及组织的特异 DNA 序列染色的杂交技术,它能够得到和 FISH 技术相同类型的结果。实验材料中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X
植物细胞的脱分化和分化培养
一、实验原理 分化了的植物根、茎、叶细胞往往具有全能性,在一定条件下进行离体培养,给于一定的营养与激素,可以脱分化为愈伤组织,由愈伤组织制备成细胞悬浮液,在一定的条件下经振荡培养,逐渐形成具有两极性的胚状体,经过进一步的分化培养,给于不同的营养和激素成分,又可以生出完整的
光学和电子显微镜样品制备的制片法
显微制片法一般包括切片法、整体封片法、涂片法和压片法4类。①切片法。光学显微镜的切片厚度在2~25微米之间,一般动植物材料的切片以厚10微米左右为合适。切片法根据包埋剂的不同而有所不同。常用的是石蜡切片法、棉胶切片法、冰冻切片法、乙二醇甲基丙烯酸脂法(简称GMA法)。石蜡切片法包括固定、包埋、切片、
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验
脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞 试剂、试剂盒神经诱导
原始粒细胞白血病未分化型实验
实验方法原理急性原始粒细胞白血病(AML)是成人中最常见的类型,约占急性白血病的30.80%,平均约为50%,按FAB和我国分类的意见分为两个亚型,即为未分化型(M1)和部分分化型(M2),临床上除有急性白血病的共同表现外尚有以下特点:1. 大部病例起病突然,进展迅速,病情凶险、常伴严重感染,发热,
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验
实验方法原理 实验材料 脂肪干细胞试剂、试剂盒 神经诱导培养基PBSA仪器、耗材 培养瓶实验步骤 (a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱其他 培养基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁基羟基苯乙醚36μg/ml(0.2 mol/L)、氯化钾5 m
脂肪来源干细胞ASCs的特征及分化实验
脂肪干细胞的神经分化脂肪干细胞的脂肪分化脂肪干细胞的骨分化脂肪干细胞的软骨分化实验方法原理实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒神经诱导培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱其他培养基配方:DMEM 1×、EtOH溶的丁
原始粒细胞白血病未分化型实验
实验方法原理急性原始粒细胞白血病(AML)是成人中最常见的类型,约占急性白血病的30.80%,平均约为50%,按FAB和我国分类的意见分为两个亚型,即为未分化型(M1)和部分分化型(M2),临床上除有急性白血病的共同表现外尚有以下特点:1. 大部病例起病突然,进展迅速,病情凶险、常伴严重感染,发热,
谷胱甘肽的测定实验——免疫组织法
实验方法原理抗生物素蛋白具有与4个生物素亲和力极高的结合点,ABC法是利用抗生物素蛋白分别连接生物素标记二抗和生物素标记的酶。实验材料抗生物素蛋白试剂、试剂盒Tris-HClDAB丙酮PBS苏木素二甲苯仪器、耗材恒温培养箱实验步骤一、材料准备1. DAB-H2O2配制:以0.05 mol/l Tr
甲基绿复染试剂盒产品说明书(中文版)使用说明
甲基绿复染试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 YIJI甲基绿复染试剂是一种旨在通过甲基绿染料的使用,使细胞核呈现淡绿色,从而与组织化学中的 样品染色产生色彩差异和对比,便于观察分析的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、 成功实验证明的。广泛应用于组织化学
病原微生物染色实验——抗酸杆菌
实验方法原理结核杆菌和麻风杆菌通常称为抗酸杆菌,由于菌体内含有脂质蛋白质和多糖类物质,并由糖脂形成一个蜡质的外壳,当染色剂结合形成复合物后,用含酸分化剂处理也不易脱色,具有抵抗酸的作用,所以被称为抗酸杆菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸杆菌染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙
TUNEL细胞凋亡检测程序
实验概要本实验用TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可
间接原位PCR(原位杂交PCR)
间接原位PCR(原位杂交PCR) 实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒
物组织化学显微镜标本片制作方法_整体封藏法
实验方法原理将小而扁平的检物材料全部封藏起来,所以用此法制作的玻片标本可显示出植物或植物某部分器官的整体。这种方法适用于微小或扁平的材料,例如丝状或叶状的藻类、菌类蕨类的原叶体抱子襄、纤小的苔鲜植物,以及被于植物的表皮、花粉粒、幼胚等幼小的器官。可以制成临时装片,也可以制成水久制片。实验材料检物材料
原位PCR实验步骤
原位PCR实验步骤,原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术,使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞(爬片、甩片或涂片)或组织(石蜡、冰冻切片)上直接对靶基因片段进行扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马
细胞分化的检测
细胞角蛋白抗原(CK)实验步骤癌胚抗原(CEA,CD66e)实验步骤
细胞群的分化
从分子水平看,细胞分化意味着各种细胞内合成了不同的专一蛋白质(如水晶体细胞合成晶体蛋白,红细胞合成血红蛋白,肌细胞合成肌动蛋白和肌球蛋白等),而专一蛋白质的合成是通过细胞内一定基因在一定的时期的选择性表达实现的。因此,基因调控是细胞分化的核心问题。
干细胞分化性
胚胎干细胞具有万能分化性(pluripotency)功能,特点是可以细胞分化(Cellular differentiation)成多种组织的能力,但无法独自发育成一个个体。它可以差转成为外胚层、中胚层及内胚层三种胚层的成员,然后再差转成为人体的220多种细胞种类。 万能分化性是胚胎干细胞与在成
细胞分化的特点
细胞分化的特点包括:① 细胞分化的潜能随个体发育进程逐渐“缩窄”,在胚胎发育过程中,细胞逐渐由“全能”到“多能”,最后向“单能”的趋向,是细胞分化的一般规律;② 细胞分化具有时空性,在个体发育过程中,多细胞生物细胞既有时间上的分化,也有空间上的分化;③ 细胞分化与细胞的分裂状态和速度相适应,分化必须
细胞分化的检测
细胞角蛋白抗原(CK) 癌胚抗原(CEA,CD66e) 实验步骤
细胞分化的检测
细胞角蛋白抗原(CK) 癌胚抗原(CEA,CD66e) 实验步骤
干细胞分化路径
传统观点认为细胞进行分化时,路径和目的地是统一的,由固定的细胞信号通路决定。然而来自5月底《自然》(Nature)杂志的一项新的研究报告表明,干细胞分化路径是通过基因的选择性行为形成的一系列分化网络路径,但是分化终点却是相对固定的。研究人员用了一个形象的比喻:就如同山上的一块石头能够通过无限可能的路
细胞分化与医学
恶性肿瘤是自主持续生长的异常组织块,是危害人类生命健康的最严重的疾病之一(每年的发病人数在上千万)。肿瘤已被作为一种细胞周期异常性疾病(cell cycle disease),肿瘤的基本特征是细胞的失控性生长,包括细胞的死亡(凋亡)的减少或增殖的增加,以及细胞的去分化等多个细胞生命活动,它们
细胞分化的简介
细胞分化(cell differentiation)是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是在空间上细胞产生差异,在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。细胞分化的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达,通过不同基因表达的开启或关闭,最终产生标志性蛋白质。
细胞的分化潜能
一、全能性的细胞细胞的全能性(cell totipotency)是指单个细胞在一定条件下分化发育成为完整个体的能力,具有这种能力的细胞称为全能性细胞(totipotent cell)。此种现象在植物和低等动物中较常见。如某些植物的单个体细胞,经过体外培养后,可分裂成许多细胞,生长成一个完整的
细胞分化的本质
细胞分化的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达,通过不同基因表达的开启或关闭,最终产生标志性蛋白质。一般情况下,细胞分化过程是不可逆的。然而,在某些条件下,分化了的细胞也不稳定,其基因表达模式也可以发生可逆性变化,又回到其未分化状态,这一过程称为去分化(dedifferentiation)。
什么是细胞分化?
细胞分化就是由一种相同的细胞类型经过细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异,产生不同细胞类群的过程。细胞分化的特点主要可以概括成三点:(1)持久性:细胞分化贯穿于生物体整个生命进程中,在胚胎期达到最大程度(2)稳定性和不可逆性:一般来说,分化了的细胞将一直保持分化后的状态,直到死亡;(3)
T细胞的分化
一、T细胞在胸腺分化过程中的表型改变淋巴干细胞早期即在胸腺内开始分化,应用小鼠胸腺细胞实验模型研究表明,在胚胎11-12天淋巴干细胞已进入胸腺,在胸腺微环境的影响下胸腺细胞迅速发生增殖和分化。已知,诱导T淋巴细胞在胸腺内分化、成熟的主要因素包括:⑴胸腺基质细胞T淋巴细胞与激活的血小板(thymuss