溶血、黄疸对酶活性测定的影响实验
实验方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验材料黄疸血清试剂、试剂盒ALT/GPT试剂仪器、耗材半自动生化分析仪试管加样器实验步骤1、稀释试剂.2、开机预温达37度.3、选取测定程序.4、测试:5、结果分析:......阅读全文
酶活性的测定方法
一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力,因为此时干扰因素较少,速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间,可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有,变化较大,而底物往往过量,其变化不易测准,所以多用产物来测定
酶活性测定的方式
酶促反应速度的测定可采用两种方式: 一、测定完成一定量反应所需的时间; 二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法,后者称为动力学法。 终点法 该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其
淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验
实验方法原理大麦(或小麦)种子萌发时,种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞(被称为GA3反应的“靶细胞”),刺激其合成或激活α-淀粉酶,然后进入胚乳,使贮藏的淀粉被水解为还原酶,因此,无胚种子不能释放GA3,也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用,从而诱导α-淀粉酶的合成。在一
淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验
实验方法原理大麦(或小麦)种子萌发时,种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞(被称为GA3反应的“靶细胞”),刺激其合成或激活α-淀粉酶,然后进入胚乳,使贮藏的淀粉被水解为还原酶,因此,无胚种子不能释放GA3,也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用,从而诱导α-淀粉酶的合成。在一
淀粉酶的诱导、提取和活性测定实验
实验方法原理 大麦(或小麦)种子萌发时,种胚产生GA3扩散到胚乳的糊粉层细胞(被称为GA3反应的“靶细胞”),刺激其合成或激活α-淀粉酶,然后进入胚乳,使贮藏的淀粉被水解为还原酶,因此,无胚种子不能释放GA3,也不能形成与激活α-淀粉酶。外加的GA3也可代替胚的释放作用,从而诱导α-淀粉酶的合成。在
溶血性黄疸的特征介绍
红细胞大量破坏(溶血)时,生成过量非结合胆红素,超过肝细胞摄取、结合、排泄的能力,致使非结合胆红素潴留于血中而发生黄疸。特征: (1)巩膜轻度黄疸,在急性发作(溶血危象)时有发热、腰背酸痛,皮肤黏膜往往明显苍白; (2)皮肤无瘙痒; (3)有脾肿大; (4)有骨髓增生旺盛的表现,如周围血
治疗溶血性黄疸的简介
溶血性黄疸的治疗,首先是针对溶血性疾病本身的治疗:清除病因(如疟疾引起的红细胞破坏需根治疟疾才能纠正)、去除诱因(如G-6-PD缺乏症患者应避免食用蚕豆和使用具有氧化性质的药物)、对症治疗(如对自身免疫性溶血性贫血使用肾上腺皮质激素、血浆置换,对遗传性球形红细胞增多症、某些类型地中海贫血、药物治
溶血性黄疸的病因分析
凡能引起溶血的疾病均可产生溶血性黄疸,包括先天性溶血性贫血和后天性获得性溶血性贫血。前者有海洋性贫血(地中海贫血)、遗传性球形红细胞增多症等;后者有自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病、不同血型输血后的溶血及蚕豆病、伯氨喹啉、蛇毒、毒蕈、阵发性睡眠性血红蛋白尿等。
如何诊断溶血性黄疸?
首先确定是否有黄疸,皮肤黏膜发黄不一定有黄疸,可能为摄入大量胡萝卜素的食物或某种药物所致。皮肤黏膜不黄,不一定没有黄疸(隐形黄疸),此时血清总胆红素>17.1μmol/L,但L,肉眼不易察觉,也称亚临床黄疸。黄疸的有无决定于血清总胆红素的量,凡血清胆红素>17.1μmol/L,均认为有黄疸。
什么是溶血性黄疸
新生儿溶血黄疸大多是指血型不合引起的溶血性黄疸,比如说ABO溶血血型不合、Rh溶血血型不合,这些血型不合造成的黄疸,可以造成常见的溶血性黄疸。此外,还有一些其他疾病也会有溶血表现,比如说蚕豆病、地中海贫血、红细胞形态的异常,都可以造成红细胞的破坏,释放这些胆红素会引起黄疸的表现。溶血性黄疸就是指
温度对酶活性影响具有双重性指的是什么?
化学速度随温度升高而加快,酶反应也不例外。 Q10值即温度增加10℃,化学速度的变化率。酶的Q10值约在1.5~2.5。(温度每增加10℃,酶促反应速度增加1~2倍左右。) 当温度超过一定范围,反应速度下降,(酶蛋白变性)应选最适反应温度。 37℃是目前使用最广泛的 测定酶催化活性浓度的温
溶血标本对检验项目的影响
1、血钾 红细胞内钾浓度为细胞外钾的20倍左右;2、血磷 红细胞内无机磷为细胞外磷的50倍左右;3、乳酸脱氢酶及同功酶 红细胞内乳酸脱氢酶及同功酶为细胞外的150倍左右;4、谷草转氨酶细胞内比细胞外高15倍左右;5、谷丙转氨酶细胞内比细胞外高7倍左右;6、胆红素 溶血会使总胆红素或直接胆红素
标本溶血对ELISA有影响吗
一生化项目(1)结果偏高的项目溶血对乳酸脱氢酶 (LDH)的影响最大,可使测定值升高达100-180;其次是肌酸激酶(CK),高达 约69倍;;再次,是血清磷(P)和钾(K),前者为50倍,后者为20-30倍。还有谷草转氨酶(AST),10-30倍;肌酸激酶同工酶(CK-MB)15倍;谷丙转氨酶(A
药物对动物体内NK细胞活性的影响实验
实验方法原理 肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材 酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤 1. 动物分组及用药(1)
药物对动物体内NK细胞活性的影响实验
瘤细胞悬液皮下接种法实验方法原理肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料小鼠试剂、试剂盒RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤1. 动物分组及
脂肪酶的活性测定
方法:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最
脂肪酶的活性测定
方法:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最
淀粉酶活性的测定
一、原理 淀粉酶(amylase)包括几种催化特点不同的成员,其中α-淀粉酶随机地作用于淀粉的非还原端,生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉浆的粘度下降,因此又称为液化酶;β-淀粉酶每次从淀粉的非还端切下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶;葡萄糖淀粉酶则从淀粉的非还原端每次切下一个葡萄糖。
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影响
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影
溶血性黄疸的临床表现
轻症的溶血性黄疸,一般只表现为轻度黄疸,皮肤、黏膜呈淡黄色,不伴有皮肤瘙痒。处于急性溶血期时,患者可以表现有发热、寒战、头疼、呕吐、腰痛,同时还伴有不同程度的贫血、血红蛋白尿,尿液的颜色可以表现出浓茶色或者酱油色,严重时可以发生急性的肾功能衰竭。 慢性溶血导致的黄疸,除了有贫血以外,还可以伴有
溶血性黄疸的检查及诊断
检查 血清总胆红素增加,以非结合胆红素为主,结合胆红素基本正常。由于血中非结合胆红素增加,结合胆红素形成也代偿性增加,从胆道排至肠道也增加,致尿胆原增加,粪胆素随之增加,粪色加深。肠内的尿胆原增加,重吸收至肝内者也增加,由于缺氧及毒素作用,肝处理较正常增多的尿胆原的能力降低,致血中尿胆原增加,
溶血性黄疸的临床表现
一般黄疸为轻度,呈浅柠檬色,急性溶血时可有发热、寒战、头痛、呕吐、腰痛,并有不同程度的贫血和血红蛋白尿(尿呈酱油色或茶色),严重者可有急性肾功能衰竭。慢性溶血多为先天性,除伴贫血外尚有脾肿大。
测定pH对微生物的影响实验
实验方法原理 实验材料 枯草芽孢杆菌细黄链霉菌酿酒酵母黑曲霉试剂、试剂盒 豆芽汁蔗糖培养液K2HPO4溶液H3BO3柠檬酸溶液NaOH溶液仪器、耗材 试管吸管实验步骤 1. 按表Ⅸ-3配制不同pH值的培养基,每种pH值配4管。2. 将配好的培养基,进行间歇灭菌(100℃蒸三次,每次20分钟)。3.
测定氧对微生物的影响实验
实验方法原理 本实验采用深层琼脂法来测定氧对细菌生长的影响,在葡萄糖牛肉膏蛋白胨琼脂培养基试管中接入某种细菌,通过适宜的培养条件,若细菌只生长在培养基表面,则为好氧菌;只生长在培养基底部,为厌氧菌;若表面及全部培养基中都生长,为兼性厌氧菌;生长在培养基中上部,为微好氧菌。这样,根据细菌在试管培养基中
血清总补体溶血活性(CH50)测定
绵羊红细胞(SRBC),与相应抗体(溶血素)结合后,可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关,但不是直线关系,而呈S曲线关系,故通常取反应曲线中间部位即50%溶血(CH50)为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途
血清总补体溶血活性(CH50)测定
绵羊红细胞(SRBC),与相应抗体(溶血素)结合后,可激活待检血清中的补体而导致SRBC溶血。其溶血程度与血清中补体的含量和功能有关。由于补体含量与溶血程度之间呈正相关,但不是直线关系,而呈S曲线关系,故通常取反应曲线中间部位即50%溶血(CH50)为判定终点。由于抗原抗体复合物激活的是补体的经典途
加工工艺对酶制剂活性的影响
酶是一种催化效率极高的生物催化剂,其催化效率比无机催化剂高107~1013倍,但酶的催化活性极易受到多种物理与化学因素的调控,如温度、pH值、水分、压力、紫外线等条件都会对酶活产生很大的影响。目前颗粒饲料、膨化饲料的大规模生产已经成为世界饲料工业的一个发展趋势,据不完全统计,国外饲料产品的70%以上
pH影响酶活性的主要原因
过酸、过碱影响了酶分子的结构,甚至使酶变性失活。应该注意的是,酶在试管中的最适pH与它在正常细胞中的生理pH值并不一定完全相同。这是因为一个细胞内可能会有几百种酶,不同的酶对此细胞内的生理pH的敏感性不同;也就是说此pH对一些酶是最适pH,而对另一些酶则不是,不同的酶表现出不同的活性。这种不同对于控