丝裂霉素C处理制作饲养层
实验概要丝裂霉素C处理制作饲养层主要试剂细胞基础培养液、0.05%Trypsin、DPBS、0.1%明胶、1 mg/mL丝裂霉素C实验材料100 mm培养皿、15 mL离心管、离心机实验步骤（1）第三代的细胞长满达到90%的时候，弃掉培养液。（2）100 mm培养皿中加入4 mL新的细胞基础培养液，再加入40μL丝裂霉素C溶液。（3）在培养箱内孵育2 h后，吸弃培养液，并用DPBS冲洗洗3～4遍。（4）0.05% Trypsin消化2～3 min，等量细胞基础培养液终止消化，将细胞转移到15 mL离心管中，1000 r/min离心3 min；（5）用细胞基础培养液重悬细胞后直接接种于0.1%明胶包被的100 mm培养皿中，或冻存以备后续使用。细胞接种时应进行细胞计数，细胞接种密度大致为2×105细胞/cm2，重悬后接种到0.1%明胶包被的培养皿中。！注意： 0.1%明胶包被培养皿时，一般在培养皿中加入刚好盖住皿底的明胶，室温或者......阅读全文
饲养层的准备
实验方法原理接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C仪器、耗材克隆培养用培养基X射线或6GCo源实验步骤1. 用胰蛋白酶消化原代培养的胚胎成纤维细胞（见方案 12.6、方案
饲养层的准备
实验方法原理接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞
饲养层的准备
实验方法原理 接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料 第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C仪器、耗材 克隆培养用培养基X射线或6GCo源实验步骤 1. 用胰蛋白酶消化原代培养的胚胎成纤维细胞（见方案 12.
饲养层的准备
实验方法原理 接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。 实验材料 第二代13天
饲养层细胞的概念
饲养层细胞，通常是成纤维类细胞，这些细胞可以提供实验细胞更好的营养，有的分化研究则是必须有饲养层细胞。
饲养层细胞的功能特点
在正常机体内，细胞除了获得一些血液来的营养外，还在细胞与细胞之间互换特殊的物质，用于分裂分化和营养等。因而，在细胞体外培养中，除了正常的培养基外，先培养一层特殊的细胞，然后再在其上接种要实验的细胞，这样更能模拟体内环境。这些特殊的细胞就是饲养层细胞，通常是成纤维类细胞，这些细胞可以提供实验细胞更好的
丝裂霉素C处理制作饲养层
实验概要丝裂霉素C处理制作饲养层主要试剂细胞基础培养液、0.05%Trypsin、DPBS、0.1%明胶、1 mg/mL丝裂霉素C实验材料100 mm培养皿、15 mL离心管、离心机实验步骤（1）第三代的细胞长满达到90%的时候，弃掉培养液。（2）100 mm培养皿中加入4 mL新的细胞基础培养液，
单克隆抗体技术：饲养层细胞
在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞称之为饲养细胞（Feeder cell）。在细胞融合和单克隆的选择过程中，就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体，因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞
试剂和材料：1. MSCs培养基；2. 6孔培养板；3. 丝裂霉素C，100μg/ml；4. 共培养的培养基：IMDM添加10%FBS，100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素；5. 细胞因子（干细胞因子，IL-6，Flt-3配体，促血小板生成素）；实验方法：1. 将脐带血来源的间充质干细胞（C
斑马鱼胚胎细胞的培养——成纤维细胞饲养层
实验方法原理通过用链酶蛋白酶除去绒毛膜、用添加成分的 FGF 培养液培养细胞和采用不同的胰蛋白酶消化筛选成纤维细胞，用原肠胚期斑马龟的胚胎成纤维细胞制备饲养层 [ Sun et al., 1995a ]。实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA受精后8h的胚胎FB
单克隆抗体制备饲养细胞的相关介绍
在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞称之为饲养细胞（Feedercell）。在细胞融合和单克隆的选择过程中，就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体，因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞
原代肿瘤细胞的选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选...
原代肿瘤细胞的选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验饲养层技术取决于通过其他接触抑制细胞形成的单层预防成纤维细胞的过度生长。 饲养层技术并不能选择性抑制正常上皮细胞， W为正常表皮细胞和正常乳腺上皮都能在 汇合的伺养层上形成克隆。然而，神经胶质瘤研究的结果表明，在同种饲养层上选择培养等同的正常细胞是
原代肿瘤细胞选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验
实验方法原理在指数生长中期，用丝裂霉素C处理饲养层细胞，将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞，或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞，然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上（图24.1）。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆，而
原代肿瘤细胞的选择性培养：汇合饲养层肿瘤细胞筛选
实验方法原理 在指数生长中期，用丝裂霉素C处理饲养层细胞，将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞，或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞，然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上（图24.1）。上皮性肿瘤细胞可以在3
核纤层和富含核纤层组分的制备实验
哺乳动物组织/组织培养细胞 爪蟾卵母细胞 果蝇胚 SPISULA 实验材料 组织
核纤层和富含核纤层组分的制备实验
实验材料 组织试剂、试剂盒 溶液 H仪器、耗材 尼龙网匀浆器实验步骤 组织制备1. 切碎组织，用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗组织/组织培养物：溶液 H：15 mmol/L PIPES，pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2
核纤层和富含核纤层组分的制备实验
哺乳动物组织/组织培养细胞爪蟾卵母细胞果蝇胚SPISULA实验材料组织 试剂、试剂盒溶液 H
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——SPISULA
实验材料海蚌试剂、试剂盒溶液 S仪器、耗材Millipore 滤器离心机实验步骤卵母细胞收集和制备1. 从成年海蚌中剥离卵巢和卵母细胞。然后在 1 g 重力作用下，用经 0.22 μm Millipore 滤器过滤的海水清冼几次卵母细胞。匀浆2. 为了在不激活卵母细胞的情况下使卵黄膜去稳定，将洗过的
胚胎干细胞中饲养层细胞的原代培养实验材料和步骤
实验材料12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、双抗、解剖器、培养箱、超净台实验步骤1.性成熟小鼠合笼（♀∶♂=2∶1）2.每天观察小鼠，见阴道栓后确定为怀孕0.5d。3.取12.5d孕鼠，断颈处死，在酒精中泡数秒消毒。控干酒精后置于一个无菌的培养皿中。4.无菌条件下暴露子宫。每打开一层要换一
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——果蝇胚
实验材料果蝇胚试剂、试剂盒溶液 E仪器、耗材研杵匀浆器实验步骤胚收集和制备1. 可用任一种方法收集果蝇胚（Oregon R P2 或任何其他的野生系）。制备匀浆2. 直接在 9 倍体积的抽提缓冲液（溶液 E ) 中融化冻存胚。溶液 E：250 mmol/L 蔗糖50 mmol/L NaCl50 mm
饲养细胞的概念
饲养细胞（Feeder cell），也叫滋养细胞，在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞即为饲养细胞。
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——爪蟾卵母细胞
实验材料卵巢试剂、试剂盒NaClKClMgSO4Ca（NO3）2CaCl2NaHCO3苯青霉素硫酸链霉素Na-HEPES仪器、耗材培养皿实验步骤卵母细胞收集和制备1. 从成熟的雌性非洲爪蟾取整个或部分卵巢，在含 88 mmol/L NaCl，1 mmol/L KCl，0.9 mmol/L MgSO4
海水热带鱼饲养技术之饲养用水盐度的控制
海水是与淡水完全不同的两种水质，它不但表现在水的化学特性不同，还表现在动与静的差别。海水潮起潮落，永无休止。海水观赏鱼很难在淡水中生活，淡水观赏鱼也很难在海水中生活，因此海水观赏鱼饲养的前提，是充分了解海水的特性。关键词：海水盐度，水族馆，饲养用水，盐度计，海水比重(1)水温：海水观赏鱼对水温的要求
人胚胎干细胞系:衍生与培养—小鼠胚胎饲养细胞的制备
实验步骤2.3 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞（MEF) 的 制 备最广泛地用于支持 h E S 的伺养层细胞来自小鼠胚胎 [丁]^〇 1113 〇 1161&1,， 1998;Reu-binoffetal. ， 2000]，如小鼠胚胎饲养细胞（MEFs) ，尽管它们可能是最原始的间叶细胞的前体细胞
饲养细胞的主要作用
在细胞融合和单克隆的选择过程中，就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体，因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞，例如，在胚胎干细胞的增殖培养中，为抑制其分化可使用经紫外线照射后停止分裂的小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养细胞。
小鼠饲养需知的细节
早在17世纪的时候，人们就开始使用小鼠进行实验。目前，小鼠已经成为应用最广，研究最详尽的实验动物。然而，小鼠喜欢居住在较暗的环境中，没有汗腺，对环境适应性相对较差，所以，对于小鼠的饲养，我们需要时刻注意细节，避免小鼠状态不良。 一. 关于饲养“小白”的温馨提示作为一只白化小鼠，拥有其他小鼠羡慕的白色
小鼠的饲养与管理
小鼠（Mouse. Mus. musculus）属哺乳纲（Mammalia）、啮齿目（Rodentia）、鼠科（Muridae）、小鼠属（Mus）。小鼠来源于野生鼷鼠，从17世纪开始用于解剖学研究及动物实验，经长期人工饲养选择培育，已育成多达千余个独立的远交群和近交系，分布遍及世界各地。由于小鼠
实验动物饲养用水指南
在生命科学、医学和药学研究领域，对一些难以在人身上进行的工作，需要使用动物来代替人类进行实验研究。为了保证实验科学、准确和重复性，我们需要将研究的生理或病理活动相对稳定地显现在标准化的实验动物身上。这些标准化的动物就称之为实验动物。常见的实验动物包含：秀丽线虫(caenorhabditis eleg
大鼠的饲养与管理
大鼠(Rat)，啮齿目、鼠科、大鼠属，属野生褐色大鼠(Rattus norvegicus) 的变种。原产于亚洲中部及原苏联部分的温暖地区。十八世纪后期开始人工饲养，十九世纪中叶首次用于心理学的研究。1906年这个鼠群中的一部分被送到费城(Philadelphia)的Wistar研究所，从而培育成
核纤层和富含核纤层组分的制备实验——哺乳动物组织细胞
实验材料组织试剂、试剂盒溶液 H仪器、耗材尼龙网匀浆器实验步骤组织制备1. 切碎组织，用加 250 mmol/L 蔗糖的 H 溶液清洗组织/组织培养物：溶液 H：15 mmol/L PIPES，pH 7.280 mmol/L KCl15 mmol/L NaCI0.5 mmol/L 精咪0.2 mmo