饲养层的准备

实验方法原理接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前,中等密度,用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C仪器、耗材克隆培养用培养基X射线或6GCo源实验步骤1. 用胰蛋白酶消化原代培养的胚胎成纤维细胞(见方案 12.6、方案 13.2),以每毫升 105 个细胞再种入培养瓶中。2. 用以下其中之一的方法阻止进一步分裂:(a)通过放射处理i)原培养瓶中,细胞暴露于 60 Gy 照射细胞,用 X-光机或 γ 射线源 如 60Co(X 射线或 60Co源,能在 30 min 或更短时间内释放 30 Gy (可以取代丝裂霉素C))。ii)消化后细胞悬液,细胞暴露于 60 Gy 照射细胞,用 X-光机或 γ 射线源 如 60Co。然后以 1×105 ml 接种,或将照射过的细胞保存在 4°C,最长到 5 天。(b)......阅读全文

饲养层的准备

实验方法原理 接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前,中等密度,用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料 第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C仪器、耗材 克隆培养用培养基X射线或6GCo源实验步骤 1. 用胰蛋白酶消化原代培养的胚胎成纤维细胞(见方案 12.

饲养层的准备

            实验方法原理 接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前,中等密度,用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。 实验材料 第二代13天

饲养层的准备

实验方法原理接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前,中等密度,用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C仪器、耗材克隆培养用培养基X射线或6GCo源实验步骤1. 用胰蛋白酶消化原代培养的胚胎成纤维细胞(见方案 12.6、方案

饲养层的准备

实验方法原理接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前,中等密度,用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞                                                                

饲养层细胞的概念

饲养层细胞,通常是成纤维类细胞,这些细胞可以提供实验细胞更好的营养,有的分化研究则是必须有饲养层细胞。

饲养层细胞的功能特点

在正常机体内,细胞除了获得一些血液来的营养外,还在细胞与细胞之间互换特殊的物质,用于分裂分化和营养等。因而,在细胞体外培养中,除了正常的培养基外,先培养一层特殊的细胞,然后再在其上接种要实验的细胞,这样更能模拟体内环境。这些特殊的细胞就是饲养层细胞,通常是成纤维类细胞,这些细胞可以提供实验细胞更好的

丝裂霉素C处理制作饲养层

实验概要丝裂霉素C处理制作饲养层主要试剂细胞基础培养液、0.05%Trypsin、DPBS、0.1%明胶、1 mg/mL丝裂霉素C实验材料100 mm培养皿、15 mL离心管、离心机实验步骤(1)第三代的细胞长满达到90%的时候,弃掉培养液。(2)100 mm培养皿中加入4 mL新的细胞基础培养液,

单克隆抗体技术:饲养层细胞

在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feeder cell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细

斑马鱼胚胎细胞的培养——成纤维细胞饲养层

实验方法原理通过用链酶蛋白酶除去绒毛膜、用添加成分的 FGF 培养液培养细胞和采用不同的胰蛋白酶消化筛选成纤维细胞,用原肠胚期斑马龟的胚胎成纤维细胞制备饲养层 [ Sun et al., 1995a ]。实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA受精后8h的胚胎FB

饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞

试剂和材料:1. MSCs培养基;2. 6孔培养板;3. 丝裂霉素C,100μg/ml;4. 共培养的培养基:IMDM添加10%FBS,100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素;5. 细胞因子(干细胞因子,IL-6,Flt-3配体,促血小板生成素);实验方法:1. 将脐带血来源的间充质干细胞(C

原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选...

原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验饲养层技术取决于通过其他接触抑制细胞形成的单层预防成纤维细胞的过度生长。 饲养层技术并不能选择性抑制正常上皮细胞, W为正常表皮细胞和正常乳腺上皮都能在 汇合的伺养层上形成克隆。然而,神经胶质瘤研究的结果表明,在同种饲养层上选择培养等同的正常细胞是

原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选

            实验方法原理 在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3

原代肿瘤细胞选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验

实验方法原理在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆,而

水泥比表面积试验的试料层准备

  在水泥比表面积试验中,为了实现对测量误差的有效控制,需利用水泥标准 样检验试料层制备测量误差,但在水泥试样量确定过程中,为了达到试料层空隙 率计算目的,需在一般硅酸盐水泥试验中,将样品重量控制在 0.5g,而在过细水 泥比表面积测定中,需对取量进行调整。同时,待试样量确定的基础上,应在仪 器测量

胚胎干细胞中饲养层细胞的原代培养实验材料和步骤

实验材料12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、双抗、解剖器、培养箱、超净台实验步骤1.性成熟小鼠合笼(♀∶♂=2∶1)2.每天观察小鼠,见阴道栓后确定为怀孕0.5d。3.取12.5d孕鼠,断颈处死,在酒精中泡数秒消毒。控干酒精后置于一个无菌的培养皿中。4.无菌条件下暴露子宫。每打开一层要换一

饲养细胞的概念

饲养细胞(Feeder cell),也叫滋养细胞,在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞即为饲养细胞。

海水热带鱼饲养技术之饲养用水盐度的控制

海水是与淡水完全不同的两种水质,它不但表现在水的化学特性不同,还表现在动与静的差别。海水潮起潮落,永无休止。海水观赏鱼很难在淡水中生活,淡水观赏鱼也很难在海水中生活,因此海水观赏鱼饲养的前提,是充分了解海水的特性。关键词:海水盐度,水族馆,饲养用水,盐度计,海水比重(1)水温:海水观赏鱼对水温的要求

大鼠的饲养与管理

  大鼠(Rat),啮齿目、鼠科、大鼠属,属野生褐色大鼠(Rattus norvegicus) 的变种。原产于亚洲中部及原苏联部分的温暖地区。十八世纪后期开始人工饲养,十九世纪中叶首次用于心理学的研究。1906年这个鼠群中的一部分被送到费城(Philadelphia)的Wistar研究所,从而培育成

饲养细胞的主要作用

在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞,例如,在胚胎干细胞的增殖培养中,为抑制其分化可使用经紫外线照射后停止分裂的小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养细胞。

小鼠饲养需知的细节

早在17世纪的时候,人们就开始使用小鼠进行实验。目前,小鼠已经成为应用最广,研究最详尽的实验动物。然而,小鼠喜欢居住在较暗的环境中,没有汗腺,对环境适应性相对较差,所以,对于小鼠的饲养,我们需要时刻注意细节,避免小鼠状态不良。 一. 关于饲养“小白”的温馨提示作为一只白化小鼠,拥有其他小鼠羡慕的白色

小鼠的饲养与管理

  小鼠(Mouse. Mus. musculus)属哺乳纲(Mammalia)、啮齿目(Rodentia)、鼠科(Muridae)、小鼠属(Mus)。小鼠来源于野生鼷鼠,从17世纪开始用于解剖学研究及动物实验,经长期人工饲养选择培育,已育成多达千余个独立的远交群和近交系,分布遍及世界各地。由于小鼠

贝克曼库尔特管理层洗牌-为并入丹纳赫准备

  贝克曼库尔特(以下简称:贝克曼)出售给丹纳赫的交易预计将在6月晚些时候完成,贝克曼6月10日披露其管理层洗牌。  在向美国证券交易委员会提交的一份文件中,贝克曼公司表示:J. Robert Hurley将继续担任公司总裁兼首席执行官,同时还承担诊断部临时总裁的责任。原化学、仪器系统开发

大鼠的饲养与管理2

              第四节  繁殖和饲养管理     一、生殖生理    1. 性成熟     在正常的发育过程中,雄鼠出生后23-25天睾丸开始下降,30-35 日龄进入阴囊,45-60天产生精子,60日龄以后就可交配。雌鼠一般在70-75日龄阴道开口,不同品种品系开口时间不同,有的50日

小鼠的饲养与管理2

 第三节  常用品种及品系     一、远交群    1. 昆明小鼠(KM)  白色。1926年美国Rockfeller 研究所从瑞士引入白化小鼠培育成瑞士种小鼠(Swiss)。1946年我国从印度Haffkine 研究所将瑞士种小鼠引入云南昆明,1952年由昆明引入北京生物制品所,1954年推广到

实验动物饲养用水指南

在生命科学、医学和药学研究领域,对一些难以在人身上进行的工作,需要使用动物来代替人类进行实验研究。为了保证实验科学、准确和重复性,我们需要将研究的生理或病理活动相对稳定地显现在标准化的实验动物身上。这些标准化的动物就称之为实验动物。常见的实验动物包含:秀丽线虫(caenorhabditis eleg

酶蛋白的饲养用途相关介绍

  酶蛋白以植物蛋白为原料,酵母菌为主菌,辅以产酶、产维生素的7种菌进行复合发酵,改善了植物蛋白结构,富含消化酶系、菌体蛋白、维生素制作的饲料。通过试验表明:鸡,鸭等家禽在产蛋高峰期,体内消化酶相对不足,代谢极为旺盛,对营养因子和致病因子均非常敏感,体质相对虚弱,抗病力下降,消化酶活性减弱,同化作用

果蝇的形态、生活周期及饲养

实验概要1、了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点;  2、区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征;  3、掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。实验原理1、果蝇的生活史 果蝇属于昆虫纲,双翅目,果蝇属,与家蝇是不同的种。     果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30℃以上的温度

果蝇的形态鉴别和饲养管理实验

实验方法原理普通果蝇(Drosophila melanogaster)在分类上属昆虫纲、双翅目、果蝇属。它作为遗传学研究的材料是因为它具有以下几个优点:1.饲养简单:凡能发酵的东西都可以作为饲料。2.生活周期短,繁殖快:在25℃时由卵到成虫只需10天左右,并且易于获得较大的后代群体。一对果蝇交配后可

果蝇的形态鉴别和饲养管理实验

实验方法原理 普通果蝇(Drosophila melanogaster)在分类上属昆虫纲、双翅目、果蝇属。它作为遗传学研究的材料是因为它具有以下几个优点:1.饲养简单:凡能发酵的东西都可以作为饲料。2.生活周期短,繁殖快:在25℃时由卵到成虫只需10天左右,并且易于获得较大的后代群体。一对果蝇交配后

果蝇的形态、生活周期及其饲养实验

实验方法原理 雄蝇体型较小,末端钝而圆,颜色深,腹背面有4个腹片,第一对足的跗节前端有性梳,而雌蝇体型较大,末端尖,颜色浅,腹背面的有5条黑色条纹。腹面有6个腹片,无性梳。实验材料 大幼虫试剂、试剂盒 乙醚培养基仪器、耗材 麻醉瓶培养瓶高压锅实验步骤 一、材料和方法 1.  生活史观察:卵、幼虫、蛹