干货!小鼠肝组织dna的提取详细步骤

实验原理 DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。在匀浆后提取 DNA 的反应体系中, SDS 可破坏细咆膜、核膜,并使组织蛋白与 DNA 分子分离, EDTA 抑制细胞中 DNase 活性,蛋白酶 K 或链霉蛋白酶 E 将蛋白质降解成小肽或氨基酸,使 DNA 分子完整地分离出来。再用酚、酚/氯仿抽提除去蛋白质,接着用氯仿抽提以除去 DNA 溶液中微量酚的污染。最后用无水乙醇沉淀 DNA 。为获得高纯度 DNA ,操作过程中常加入 RNase 除去 RNA 。获得高分子量 DNA 的关键是防止 DNase 降解 DNA 。故标本必须新鲜,在提取前细胞就保持完整,核、溶酶体等细胞器应没有明显破坏,提取 DNA 用的离心管等器皿及试剂应消毒。操作在4 ℃以下进行。 试剂及器材 1 .试剂 ① 蛋白酶 K :称取 20mg......阅读全文

人类肝脏与小鼠肝脏更接近,还是与人类心脏?

  西班牙基因组调控中心的Alessandra Breschi通过鉴定多个物种各个器官的RNA-Seq图谱,发现一些基因的表达是随物种而变化,而另一些是随器官类型而变化。她表示,那些随物种而变化的基因更可能是看家基因。  在近日召开的2015冷泉港基因组生物学会议(The Biology Of Ge

“透视”肝脏:中国科学家构建小鼠肝脏高精度时空图谱

·首次成功构建了小鼠肝脏的高精度时空图谱,探索了肝脏的空间分子特征与损伤修复中的分子机制,为未来肝脏疾病的治疗提供了新思路。在所有的器官中,肝脏可能是最“神秘”的一个。它不仅是最大的实体器官,包含最多的血液,具备器官中最强的再生能力,还担负着代谢、合成、消化、免疫等多种功能。古代人曾认为肝代表着欲望

我研究团队主导构建小鼠肝脏高精度时空图谱

4月16日,深圳华大生命科学研究院研究团队利用自研时空组学技术和单细胞转录组测序技术,构建出小鼠肝脏高精度时空图谱。这一图谱,分别揭示小鼠肝脏稳态的空间分子特征,以及肝部分切除、胆汁淤积损伤与修复过程中的复杂分子机制。两项研究以不同角度解析了肝脏损伤与再生复杂机制,有望为肝脏疾病治疗、肝脏再生与移植

小分子药物可促进肝脏修复再生-小鼠实验取得结果优异

  中国研究人员17日说,一种小分子药物会促进受损的肝脏修复与再生,并在小鼠实验中取得了优异的治疗效果。  这项研究发表在新一期美国《科学转化医学》杂志上。研究负责人之一、厦门大学生命科学学院副院长周大旺教授对新华社记者说,以往促进组织修复与再生方面的研究更多关注把生物材料递送至特定位置的复杂治疗策

《Nature》清除炎症,保护小鼠免受动脉硬化和肝脏疾病影响

  加州大学圣地亚哥分校医学院的研究人员发现,新开发的一种氧化磷脂(oxidized phospholipids,OxPL)结合抗体可以阻断小鼠体内炎症。形成抗体保护后,即使小鼠食用高脂肪饮食,也不会形成动脉斑块、动脉硬化和肝脏疾病,而且还能延寿。  这项研究发表在6月6出版的《Nature》,标志

营养所发现小鼠肝脏小RNA存在多种修饰并和糖尿病相关

  近日,Analytical Chemistry在线发表了中科院上海生命科学研究院营养科学研究所翟琦巍研究组的最新研究进展:A high-throughput quantitative approach reveals more small RNA modifications in mou

翟琦巍等发现小鼠肝脏小RNA修饰和糖尿病相关

  中科院上海生科院营养科学研究所研究员翟琦巍小组在一项研究中,建立了一种同时检测单个RNA样品中超过40种核苷的方法,发现小鼠肝脏小RNA中存在多种修饰,并初步发现小RNA修饰和糖尿病存在相关性。相关论文在线发表于《分析化学》。   近年来,蛋白质修饰和DNA修饰研究引人关注,但目前对RNA修饰

基本方案1-尾静脉注射传递重组腺病毒到小鼠肝脏

实验材料成年小鼠试剂、试剂盒乙醇重组腺病毒悬液仪器、耗材带铁丝盖的鼠笼加热灯小鼠限制器棉纱店注射器实验步骤1.一个鼠笼装 6 只小鼠,加热灯置铁丝盖上方 6~10in(15~25 cm) 给小鼠取暖。观察小鼠,约 5 min 后,它们会在角落里缩做一团,准备注射。不要在角落的位置照射小鼠。2.取一只

AVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达敲除应用与分析

  AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:   l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。   Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子,用于肝脏特异性转外源基因表达。   Ø Cre重组酶是

AAVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用...

AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用与优势分析AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子

肝脏特异性TMEM16A敲除小鼠在发现治疗非酒精性脂肪肝...

肝脏特异性TMEM16A敲除小鼠在发现治疗非酒精性脂肪肝的新靶点的应用非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver,NAFLD)是一种无过量饮酒史,但产生代谢应激性肝脏损伤的病症,可从单纯性脂肪肝进展为非酒精性脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,甚至肝癌、肝衰竭,是临床上最常见、发病率

肝脏中的PPARγ或许可以帮助治疗肝脏疾病

  在我国,近年来由于乙肝疫苗的普遍应用,乙肝的发病率已明显下降;而由于饮酒之风盛行,酒精性脂肪肝的发病率却在明显上升,长期大量饮酒可以导致酒精性脂肪肝或酒精性肝炎,更加严重的可导致酒精性肝硬化,一次大量饮酒也可以导致急性酒精性肝炎。  2015年10月,隶属于世界卫生组织的国际癌症研究机构,将酒精

肝脏的代谢功能

1.糖代谢:肝脏是维持血糖浓度相对稳定的重要器官。肝脏通过肝糖原的合成分解及糖异生作用维持血糖浓度的恒定。2.蛋白质代谢:(1)合成自身结构蛋白并合成多种血浆蛋白质,其中合成量最多的是白蛋白。(2)肝脏合成的许多凝血因子和纤维蛋白原等,在血液凝固功能上起重要作用。(3)有丰富的氨基酸代谢酶,转化和分

人类发育中肝脏的细胞图谱揭秘人类胎儿肝脏造血

  在一项新的研究中,英国研究人员在世界上首次构建出人类发育中肝脏的细胞图谱,它提供了关于胎儿中血液和免疫系统如何产生的重要见解。这种图谱描绘了在妊娠的头三个月和第二个三个月之间的发育中肝脏的细胞景观变化,包括来自肝脏的干细胞如何播种到其他组织,以支持生长所需的高氧气需求。相关研究结果近期发表在Na

基因传递到肝脏实验

实验材料 成年小鼠试剂、试剂盒 乙醇重组腺病毒悬液仪器、耗材 带铁丝盖的鼠笼加热灯小鼠限制器棉纱店注射器实验步骤 1.一个鼠笼装 6 只小鼠,加热灯置铁丝盖上方 6~10in(15~25 cm) 给小鼠取暖。观察小鼠,约 5 min 后,它们会在角落里缩做一团,准备注射。不要在角落的位置照射小鼠。2

肝脏病变弥漫的病因

  任何原因如肝炎病毒、血吸虫病、酒精、药物及毒物等长期持续损害肝脏,都将导致肝纤维化形成,所以肝纤维化的病因是多样的、复杂的。[1]

肝脏病变弥漫的诊断

  a、肝活检病理学检查仍是诊断肝纤维化的金标准,是明确诊断、衡量炎症活动度、纤维化程度以及判定药物疗效的重要依据[1]。目前一般采用半定量计分系统。但是,由于肝纤维化在肝内分布不均匀,而且肝穿刺组织仅占全肝的五万分之一,可造成诊断误差。因此强调肝活检标本至少15 mm,并包含6个以上汇管区。Bed

肝脏病变弥漫的简介

  “肝脏弥漫性病变”是肝脏组织病变在影像学检查的一种表现,也可以称之为肝纤维化。肝纤维化是肝脏内弥漫性细胞外基质的过度沉积,是多种致病因子刺激下,活化的肝星状细胞生成大量胶原沉积于肝细胞间隙的结果。如果纤维组织不断增生,侵入肝细胞内,破坏正常肝组织的结构,形成许多由纤维组织包绕的结节,肝脏质地变硬

肝脏震颤试验检查作用

  肝脏震颤试验检查是用于检查腹部肝脏是否正常的一项辅助检查方法。用浮沉触诊法当手指压下时,如感到一种微细的震动感,即为肝震颤。见于肝包虫病。是由于包囊中的多数子囊浮动,撞击囊壁引起,此征对其诊断有特异性。

肝脏病变弥漫的鉴别

  应注意与肝脏囊肿,肝肿瘤等疾病相鉴别。  a、肝活检病理学检查仍是诊断肝纤维化的金标准,是明确诊断、衡量炎症活动度、纤维化程度以及判定药物疗效的重要依据[1]。目前一般采用半定量计分系统。但是,由于肝纤维化在肝内分布不均匀,而且肝穿刺组织仅占全肝的五万分之一,可造成诊断误差。因此强调肝活检标本至

肝脏移植术的简介

  肝移植是治疗终末期肝病的惟一有效的方法。1963年Starzl施行了第1例成功的肝移植术。以后肝移植虽然在各地陆续开展,但整体疗效较差。1977~1983年,我国亦相继有18个单位共施行57例临床肝移植,其中原位肝移植55例,异位肝移植2例,最长存活264d,死于癌复发。作者单位于1978~19

血液——肝脏再生的关键!

  肝脏是人体唯一可以再生的器官,然而,一些接受了肝脏切除手术的病人由于再生过程不起作用,最终不得不需要肝脏移植。  密歇根州立大学发表在《Blood》杂志上的一项新研究表明,凝血蛋白——纤维蛋白原(fibrinogen)可能是导致这种情况发生的关键。  “我们发现,手术后纤维蛋白原在剩余肝脏内迅速

肝脏细胞RNA的提取

一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的,

肝脏血液检测——ALT--AST

肝脏血液检测是最常见的血液检测,可用于评估肝脏功能或肝损伤。肝损伤检测的第一步是进行简单的血液检测,以确定血液中特定肝酶(蛋白质)的水平。目前临床上最敏感、应用最广泛的肝酶是转氨酶,包括门冬氨酸转氨酶(AST或 SGOT)和丙氨酸转氨酶 (ALT 或 SGPT)。这些酶主要存在于肝细胞内,一小部分存

动物肝脏DNA的提取

一、目的:了解分离提取DNA的一般原理,掌握从动物肝脏中提取DNA的方法。二、原理:在浓氯化钠(1—2mol·L-1)溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很大,核糖核蛋白的溶解度很小。在稀氯化钠(0.14mol·L-1 )溶液中,脱氧核糖核蛋白的溶解度很小,核糖核蛋白的溶解度很大。因此,可利用不同

从小鼠脾脏分离小鼠天然杀伤细胞

实验步骤 基本方案 12.为 检 验 细 胞 纯 度 ,可 加 入 终 浓 度 为 lOug/ml 的 抗 C D 3- F I T C 和 P K 136-PE (抗N K 1. 1 ) 抗体,进 行 流 式 分 析(第四章)。 展

小鼠中的黄金矿脉RenMabTM小鼠

  前几天有“砖家”同学写了两篇《鼠年说鼠》(一)和(二)。为了留作永久的学习材料,小编在经过原作者同意后,现进行转载。本文将两部分内容融在一起,并对(一)和 (二)顺序进行了调换。   抗体药发现的两大矿场   抗体药主要有两个大矿场,一个是依赖于体外展示技术的全合成/半合成/天然抗体

肝脏震颤试验的相关症状

  肝包虫病,肝被膜紧张,肝区痛,肝细胞内脂肪堆积过多,肌肉纤维震颤,肝功能受损等。

儿科肝脏疾病的基本介绍

  由于未成熟胆汁酸的代谢,新生儿血清胆汁酸水平明显高于成人。发生新生儿肝炎及各种儿科胆汁郁积症时,患者空腹胆汁酸水平均急剧升高。但是,测定血清总胆汁酸似科并不足以鉴别诊断各种新生儿肝胆疾病。各个胆汁酸组分的测定,则不仅可为新生儿肝炎及其它各种不同类型的儿科胆汁郁积症提供病因学指征,而且政治家 助于

肝脏及胆囊叩诊检查作用

  肝脏及胆囊叩诊是用于检查腹部是否正常的一项辅助检查方法。目的是叩诊肝上下界和肝区、胆囊有无叩击痛。肝区叩击痛对诊断肝炎、肝脓肿有一定的意义;胆囊位置较深,用叩诊方法不能叩出其大小,但出现胆囊叩击痛,有助于胆囊炎的诊断。通过此项检查可以判断病变部位及相对应的病征。