蛋白质的电转

实验概要很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物,如重氮化纤维素膜(DPT,DBM)、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等,但用的最多的还是硝酸纤维素膜(NC膜),该膜与蛋白质以非共价的疏水作用形式结合,结合能力约为80μg/cm2。与其它膜相比,NC膜具有不要预先活化,对转移物质生物活性影响不大,能应用多种染料染色,非特异性显色浅的特点,但对于转移的小分子蛋白质在洗涤过程中,易于丢失。主要试剂转移缓冲液含20%甲醇的电极缓冲液主要设备电转移槽及电泳仪实验步骤1. 剪6块3MM滤纸和一块NC膜2. 将剪好的3MM滤纸和NC膜在转移缓冲液中浸泡3-5分钟3. 按下列过程安装转移装置,将塑料支架平放在含转移缓冲液的托盘中,在塑料支架上放一块海绵.4. 将3块3MM滤纸对齐放在海绵上,然后依次将NC膜、凝胶、及另3块虑纸和海绵放上。5. 用塑料支架夹紧上述各层,放入电转移槽内,NC膜一侧向正极,凝胶一面向负极。6. 接通电源电压120mA,转移6......阅读全文

蛋白质分离实验_分离已知pI-的蛋白质

实验材料含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒缓冲液(pH>pI)仪器、耗材50 μm 内径的未包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤1. 用 pH 高于蛋白质的pI的 5 mmol/L 缓冲液 1/10 (V/F) 稀释蛋白质样品,使蛋白质(终浓度 = 1.0 mg/ml) 产生电荷

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验

ATP储存液的配制依赖环核苷酸的蛋白质激酶蛋白质激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝胶蛋白质激酶分析试剂、试剂盒ATP储存液                                                          实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多

蛋白质印迹法的测定蛋白质含量

1、制作标准曲线(1 )从-20℃取出1mg/ml BSA,室温融化后,备用。(2) 取18个1.5ml离心管,3个一组,分别标记为0μg,2.5μg,5.0μg,10.0μg,20.0μg,40.0μg。(3 )按下表在各管中加入各种试剂。0μg2.5μg5.0μg10.0μg20.0μg40.0

球状蛋白质和纤维状蛋白质区别

  以长轴和短轴之比为标准,球状蛋白质小于10,纤维状蛋白质大于10 [2] 。纤维状蛋白多为结构蛋白,是组织结构不可缺少的蛋白质,由长的氨基酸肽链连接成为纤维状或蜷曲成盘状结构,成为各种组织的支柱,如皮肤、肌腱、软骨及骨组织中的胶原蛋白;球状蛋白的形状近似于球形或椭圆形。许多具有生理活性的蛋白质,

球状蛋白质和纤维状蛋白质区别

以长轴和短轴之比为标准,球状蛋白质小于10,纤维状蛋白质大于10。纤维状蛋白多为结构蛋白,是组织结构不可缺少的蛋白质,由长的氨基酸肽链连接成为纤维状或蜷曲成盘状结构,成为各种组织的支柱,如皮肤、肌腱、软骨及骨组织中的胶原蛋白;球状蛋白的形状近似于球形或椭圆形。许多具有生理活性的蛋白质,如酶、转运蛋白

蛋白质的结构及蛋白质的功能(二)

   (二)蛋白质空间橡象与功能活性的关系  蛋白质多种多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关,蛋白质的空间构象是其功能活性的基础,构象发生变化,其功能活性也随之改变。蛋白质变性时,由于其空间构象被破坏,故引起功能活性丧失,变性蛋白质在复性后,构象复原,活性即能恢复。  在生物体内,当某种物质

蛋白质的结构及蛋白质的功能(一)

   蛋白质为生物高分子物质之一,具有三维空间结构,因而执行复杂的生物学功能。蛋白质结构与功能之间的关系非常密切。在研究中,一般将蛋白质分子的结构分为一级结构与空间结构两类。  一、蛋白质的一级结构  蛋白质的一级结构(primary structure)就是蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序(

蛋白质根据蛋白质分子的外形进行分类

1.球状蛋白质分子形状接近球形,水溶性较好,种类很多,可行使多种多样的生物学功能。2.纤维状蛋白质分子外形呈棒状或纤维状,大多数不溶于水,是生物体重要的结构成分,或对生物体起保护作用。3.膜蛋白质一般折叠成近球形,插入生物膜,也有一些通过非共价键或共价键结合在生物膜的表面。生物膜的多数功能是通过膜蛋

完全蛋白质和半完全蛋白质等简介

  完全蛋白质  所含必需氨基酸种类齐全,数量充足,相互之问比例也适当,不但能够维持成人的健康,也能够促进人体的生长发育,如乳中的酪蛋白、蛋类中的卵白蛋白、大豆球蛋白、小麦中的麦符蛋白等。   半完全蛋白质  所含各种必需氨基酸种类齐全,但各种氨基酸含量多少不匀,互相之间比例不合适。在膳食中作为唯一

蛋白质定量/蛋白质含量的测定(LOWRY法)

实验概要运用LOWRY法测定蛋白质的含量。实验原理Lowry法是双缩脲法和福林酚法的结合与发展,其原理是:蛋白质溶液用碱性铜溶液处理,形成铜-蛋白质的络合盐,再加入酚试剂后,除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外,还使双缩脲法中肽键、碱性铜的显色效果更强烈。因此,Lowry法的显色效果比单独使用

食品蛋白质测定的利器—蛋白质测定仪

  目前食品中蛋白质含量的测定主要采用凯氏定氮法,但是操作烦琐,试剂用量大,耗时较长。而新型仪器蛋白质测定仪具有简单、方便、快速,试剂用量少等优点。本文使用蛋白质测定仪和电位滴定仪检测食品中的蛋白质含量,对消化条件和测定条件进行了摸索,并与凯氏定氮法进行了比对,结果报告如下:    材料与方法  1

蛋白质测定仪测定粗蛋白质的应用

凯氏定氮法是目前国家测定粮食、油料、饲料等粗蛋白质含量的标准方法。是先测定出样品中的含氮量,再乘以蛋白子换算系数。在测定过程中需用已知含氮量的标准物质做对照试验经常用无水硫酸按,其含氮量为21.19%,但由于系统误差的存在, 测定值与实际含氮量之间总是要存在一些误差。通过多年的试验对比,计算氮的回收

蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类

蛋白质分离方法根据蛋白质溶解度不同

1、蛋白质的盐析中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子(如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力,可夺取蛋白质分子的水化层,使之

蛋白质及蛋白质含量测定的几种方法

   蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。蛋白质主要用于维持、生长、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白质含量的检测成为一项日常性且必需性的工作。    蛋白质含量测定的几种方法   1紫外分光光度法   蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具

蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线

基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类

蛋白质及蛋白质含量测定的几种方法

蛋白质是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。蛋白质主要用于维持、生长、妊娠和泌乳等需要。因此蛋白质含量的检测成为一项日常性且必需性的工作。 蛋白质含量测定的几种方法  1紫外分光光度法 蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值,在一定的范围内,蛋白质溶

蛋白质的概述

蛋白质的分离纯化是研究蛋白质结构和功能的重要手段,也是制备工业用酶、抗体、疫苗、基因重组等的唯yi途径。蛋白纯化的方法多种多样。常用的有以下几种方案:基于蛋白质的溶解度不同设计的盐析或等电点沉淀方法;基于蛋白质分子量差异的透析与超滤或凝胶过滤方法;基于蛋白质所带电荷不同设计的等电聚焦电泳或离子交换层

蛋白质能否储存

我是学生物出生。我们补充的是氨基酸而非蛋白质,氨基酸被吸收进体内后在肝脏合成新蛋白质,转运到各处,老的,被解雇的蛋白质有些通过脱氨基作用被分解,脱氨基作用是一种蛋白的代谢途径。

蛋白质分离实验

分离未知 pI 蛋白质 分离已知pI 的蛋白质             实验方法原理 实验材料 含10

蛋白质类药物

  15日,亿帆医药宣布,其高度差异化长效重组人生长激素F-899在中国获批临床,有望成为一种更安全便捷有效的生长激素缺乏症(GHD)替代疗法。

结合蛋白质(2)

重要的结合蛋白质血红蛋白血红蛋白(hemoglobin)是主要存在于脊椎动物红细胞中的一种色蛋白,它的主要功能是在人体内运载氧气和二氧化碳。正常人体的100ml全血中,含血红蛋白质12~16g。人类血红蛋白含铁约为0.33%~0.34%,其相对分子质量约为67 000。血红蛋白由珠蛋白和辅基血红

蛋白质的复性

是恢复原有性质的意思。变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象。 变性的一种逆转。

蛋白质组成成分

单纯蛋白质的元素组成为碳50~55%、氢6%~7%、氧19%~24%、氮13%~19%,除此之外还有硫0~4%.有的蛋白质含有磷、碘。少数含铁、铜、锌、锰、钴、钼等金属元素。 各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16%.由于体内组织的主要含氮物是蛋白质,因此,只要测定生物样品中的氮含量,就可以按下式推

蛋白质染色实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 聚丙烯酰胺凝胶固定液染色液脱色液仪器、耗材 滤纸培养箱实验步骤 1.  将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以3~5倍体积的固定液覆盖,在旋转摇床中缓慢揺动2 h。 2.  倾去固定液,以考马斯亮蓝染色液覆盖凝胶,并缓慢摇动4 h。3.  倾去染色液,用约50 ml 固定液冲

蛋白质回收实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材 电泳仪透析膜实验步骤 1.  凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min,然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2.  切下染色后的凝胶条带,于4℃水中浸泡2~3 h,期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri

蛋白质分离实验

实验方法原理 实验材料 含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒 硼酸钠仪器、耗材 50 μm 内径的包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤 1. 用 50 mmol/L 硼酸钠缓冲液 1/10(V/V) 稀释蛋白质样品,使终浓度 1.0 mg/ml,也可在 50 mmol/L 硼酸钠缓

蛋白质检测

·         Protein detection (Aberdeen's Lab)The method used to locate the proteins following 2D-PAGE depends on the nature of the original sample.

蛋白质回收实验

基本方案             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

蛋白质回收实验

实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材电泳仪透析膜实验步骤1.  凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min,然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2.  切下染色后的凝胶条带,于4℃水中浸泡2~3 h,期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri培养皿中