蛋白质回收实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材 电泳仪透析膜实验步骤 1. 凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min,然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2. 切下染色后的凝胶条带,于4℃水中浸泡2~3 h,期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri培养皿中,加入10 ml 水覆盖之,并将它们捣碎成约1 mm3的碎片,再用巴斯德吸管将水吸千。 3. 用一园片状的Spectrapor 6透析膜将电洗脱仪的洗脱池的底端盖好,并拧紧帽子图一、洗脱池4. 将捣碎的凝胶移入洗脱室的粗大的一端,并以浸泡缓冲液覆盖,在浸泡液之上,加入一层冼脱液,使之刚没过水平隧道,排除气泡。 5. 将洗脱室置于洗脱池之内,加入洗脱液至仅高于各电极槽的排液出口, 将其余的液体加入小混合池中。 6. 连接双通道蠕动泵......阅读全文

蛋白质回收实验

基本方案             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

蛋白质回收实验

实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材电泳仪透析膜实验步骤1.  凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min,然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2.  切下染色后的凝胶条带,于4℃水中浸泡2~3 h,期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri培养皿中

蛋白质回收实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材 电泳仪透析膜实验步骤 1.  凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min,然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2.  切下染色后的凝胶条带,于4℃水中浸泡2~3 h,期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri

DNA片段的回收实验——树脂回收法

目的DNA片段的回收技术是重组DNA中的关键技术,回收是指从电泳介质中纯化出目的片断。实验方法原理本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离

DNA片段的回收实验

实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来,成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收

DNA片段的回收实验

树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法             实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法

什么叫回收加标实验

加标回收即在测定样品时,于同一样品加入一定量的标准物质进行测定,将测定结果扣除样品的测定值,计算回收率。加标回收分析在一定程度上能反映测试结果的准确度。在实际应用实应注意加标物质的形态,加标量和样品基体等。每批相同基体类型的测试样品应该随机抽取10%~20%的样品进行加标回收分析。回收率计算公式:U

DNA胶回收实验技术总结

胶回收一. 提高胶回收量的办法:1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有

机体长寿奥秘:细胞回收蛋白质或是关键!

  近日,一项刊登在国际杂志Nature Communications上的研究报告中,来自Sanford Burnham Prebys医学发现研究所的科学家们通过研究发现,蠕虫(线虫)如果能够产生过量的蛋白p62,其寿命就会更长,蛋白p62能够识别毒性蛋白并将其标记为摧毁对象,相关研究结果或能帮助开

DNA片段的回收实验——常规方法

实验材料NA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1.  PAGE电泳,如EB染色的则在紫外灯下切下目的片断,如龈染或其他非放染色的则在关下切下目的片断。2.  用少量脱缓冲液I将目的片断胶条洗至一Eppendorf管中,用玻棒将凝胶捣碎,用1

加标回收实验的浓度设置

农残分析可以参照国家标准 或者根据文献的方法现在一般都用HPLC或者GC了吧添加回收浓度测定和样品测定方法是一样的一般流程为样品粉碎-提取-除杂-浓缩-分析定量方法可以用原药做标准曲线

回收率实验怎么做

主要研究方法(实验设计)及主要技术路线:研究方法盐酸苯海拉明片残渣的定性:显色反应鉴别。盐酸苯海拉明片溶出度检验:溶出度仪器检测。盐酸苯海拉明片的含量测定:紫外分光光度法。统计分析:正态性检验和显著性分析。主要研究方法(实验设计)及主要技术路线:研究方法盐酸苯海拉明片残渣的定性:显色反应鉴别。盐酸苯

回收DNA进行后续酶切实验问题

洗脱产物含有残留的乙醇会影响酶切,请确保彻底去除漂洗缓冲液。具体方法参见回收效率低的解决方案。

加标回收实验的浓度怎样确定

上面的公式是错的,加标回收率=(加了标准的样品-未加标准的样品)/加标量*100%一般情况下都是采用含量进行计算,如果加标量体积很小的话可以用浓度计算做农残加标一般都是以微升计,体积都可以忽略不计,而且有机项目的加标回收率范围很大采用浓度计算没问题的

Elisa实验回收高是什么原因

回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度.比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯 20 mg/L,取 100mL 被测水样品

DNA片段的回收实验——微量柱法

实验材料DNA片段试剂、试剂盒纯化试剂盒异丙醇仪器、耗材离心机电泳仪电泳槽取液器微量真空装置抽滤装置实验步骤1.  紫外灯下从胶上切下目的片段,放入一Epphendof管中。2.  离心管在-20℃冷却5~10分钟。3.  将微量柱下套上一Epphendof管,将冷却的胶条装进微量柱中,4℃12 0

icpms实验回收率问题

看标准样品的基体跟实际样品是否接近咯。接近的话问题不大。有些标准里面还写明具体的质控样。例如加拿大和美国的玩具安全标准。如果是做这些方法。那用这个标准物质来考察回收率(准确度)应该没问题。

加标回收实验加标量如何确定

加标回收实验加标量确定样液中待测组分的质量。样品分析过程中有蒸发或消解等可使溶液体积缩小的操作技术时,尽管因加标而增大了试样体积,但样品经处理后重新定容并不会对分析结果产生影响。比如采用酚二磺酸分光光度法分析水中的硝酸盐氮(GB7480287),样品及加标样品经水浴蒸干后,需要重新定容到50mL再行

蛋白质定量实验

考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法 碱性铜还原分析法 胺衍生法             实验方法原理 蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基,其化学结构中

蛋白质抽取实验

蛋白质在细菌中表现后,以反复的冷冻-解冻方法打破细胞,再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来,此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。仪器用具:恒温震荡培养箱37℃;高速冷冻离心机及离心管 (使用20,000 rpm离心陀)使用高速离心机要注意: 离心机及离心陀的温度要预冷完全,相对位置的两只离心管要平衡好

蛋白质染色实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 聚丙烯酰胺凝胶固定液染色液脱色液仪器、耗材 滤纸培养箱实验步骤 1.  将聚丙烯酰胺凝胶放在塑料容器并以3~5倍体积的固定液覆盖,在旋转摇床中缓慢揺动2 h。 2.  倾去固定液,以考马斯亮蓝染色液覆盖凝胶,并缓慢摇动4 h。3.  倾去染色液,用约50 ml 固定液冲

蛋白质合成实验

实验步骤 材料无菌细胞培养,如 1X104~ 1X106 个细胞,24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特异活性并不重要,因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定)非无菌SLS 或 SDS,1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH

蛋白质染色实验

考马斯亮蓝染色 银染法 非氨盐银染法 快速银染法             实验方法原理 1. 凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便

蛋白质分离实验

分离未知 pI 蛋白质 分离已知pI 的蛋白质             实验方法原理 实验材料 含10

蛋白质定量实验

试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G250乙醇磷酸实验步骤 (1) 准备 100~1500 ug/ml 的标准品, 溶于 Bradford 法相兼容缓冲液中。对于较稀的样品,可能通过增加样品在试剂体积中的比率而扩大灵敏度(microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果样品与染料的比

蛋白质合成实验

实验步骤材料无菌细胞培养,如 1X104~ 1X106 个细胞,24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特异活性并不重要,因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定)非无菌SLS 或 SDS,1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH三

蛋白质合成实验

实验步骤                                                         材料 无菌 细胞培养,如 1X104~ 1X106 个细胞,24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特异活性并不重要

蛋白质分离实验

实验方法原理 实验材料 含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒 硼酸钠仪器、耗材 50 μm 内径的包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤 1. 用 50 mmol/L 硼酸钠缓冲液 1/10(V/V) 稀释蛋白质样品,使终浓度 1.0 mg/ml,也可在 50 mmol/L 硼酸钠缓

蛋白质合成实验

实验步骤 材料 无菌 细胞培养,如 1X104~ 1X106 个细胞,24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (~50uCi/ml) (特异活性并不重要,因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定) 非无菌 SLS 或

实验中样品的回收率怎么计算

加入已知浓度A的待测物质,用该方法测定其浓度值B,回收率=(A/B)×100%.注:已知浓度A应在该检测方法的可以检测浓度范围内。加标回收率,一般是测定样品中待测物质的浓度为C;再取另一份样品,加入定量待测物质(定量加入待测物质的理论浓度为E)(加入待测物质的量最好与样品中待测物质的量一样)测定其浓