显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程

实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞),然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,通过分析转基因和实验小鼠表型的关系,研究揭示外源基因的功能,而且可进行工程动物的大量生产。主要试剂1. M16溶液:称取 0.5534 g NaCl,0.0356 g KCl,0.0162 g KH2PO4,0.0294 g MgSO4.7H2O, 0.0252 g CaCl2.2H2O,0.32 ml乳酸钠(60% 糖浆),0.0036 g丙酮酸钠, 0.1000 g D-葡萄糖,0.0010 g酚红,0.2106 g NaHCO3。溶于100ml超纯水,0.22?m滤膜过滤除菌,分装后4℃储存不超过3周,加入4 mg/mL BSA可立即......阅读全文

双晶衍射法的相关介绍

  双晶衍射仪用一束X 射线(通常用Ka1作为射线源)照射一个参考晶体的表面,使符合 布拉格条件的某一 波长的X 射线在很小角度范围内被反射,这样便得到接近单色并受到偏振化的窄 反射线,再用适当的光阑作为限制,就得到近乎准值的X射线束。把此X 射线作为第二晶体的入射线,第二晶体和 计数管在衍射位置附

中子衍射法的应用介绍

中子衍射主要应用于:1、晶体单色器从反应堆引出的热中子是连续谱。如果再引出孔道外面安置一单晶片,中子束以掠射角射向单晶片。根据布喇格条件在与入射方向成角的方向上可接受到波长为的单能中子,是反射晶面的间距。改变不同的,就可以得到不同波长的单能中子。2、极化中子中子束选取适当的铁磁晶体,通过相干衍射可以

x射线衍射法的原理

原理:将具有一定波长的X射线照射到结晶性物质上时,X射线因在结晶内遇到规则排列的原子或离子而发生散射,散射的X射线在某些方向上相位得到加强,从而显示与结晶结构相对应的特有的衍射现象。波长λ可用已知的X射线衍射角测定,进而求得面间隔,即结晶内原子或离子的规则排列状态。将求出的衍射X射线强度和面间隔与已

X射线粉末衍射法

  一、基本原理:当一束单色X射线投射到晶体上,晶格中原子散射的电磁波互相干涉和相互叠加,在某一方向得到加强或抵消的现象,称为衍射。相应的方向称为衍射方向。晶体衍射X射线的方向与构成晶体的晶胞大小、形状及入射的X射线波长有关。  衍射光的强度与晶体内原子的类型和晶胞内原子的位置有关,所以,从衍射光束

盐水输注试验介绍

  盐水输注试验是通过下述原理进行的,正常情况下,盐水输注后,血钠及血容量的增加,大量钠盐进入肾单位远曲小管,可抑制肾小球旁细胞肾素的分泌,从而抑制血管紧张素-醛固酮的分泌,使血中肾素、血管紧张素、醛固酮水平降低.

血小板输注概述

血小板输注的指征:   骨髓功能衰竭(由于疾病、有细胞毒性的治疗和照射)   在没有其他的危险因子的情况下,病人需要血小板输注的临界值为10x109/l ,这一临界值与更高的临界值一样安全。危险因子包括败血症、同时使用抗生素或其他不规则出血(A 等,Ⅰb 级)。    对没有任何危险因素的病人,如果

稠油注蒸汽开采方法

由于蒸汽吞吐方法是单井作业,即每口井既是注汽井又是生产井,将一定量蒸汽注入油层后,关井数天后即开井回采,靠加热油层降低原油粘度来提高产量。这种方法的经济风险性较小,而且,虽然可以每口井进行5~8周期的吞吐作业,采油速度高达3%~8%,一般经济效益比蒸汽驱高数倍,但是原油采收率仅10%~20%,损失大

粒细胞的输注

临床上输注白细胞主要指粒细胞,浓缩白细胞现在多用血细胞单采机分离而得。这种方法一次可处理几升血液,可获得高至(1.5-3.0)×1010粒细胞,供患者一次输注,同时还可对同一供血者多次有计划的采集,而减少患者发生HLA致敏的机会。 应用浓缩白细胞应十分慎重,因为它也可引起输血的副作用。临床上输注白

粒度仪激光衍射散射法简介

  颗粒是在一定尺寸范围内具有特定形状的几何体。颗粒不仅指固体颗粒,还有雾滴、油珠等液体颗粒。颗粒的概念似乎很简单,但由于各种颗粒的形状复杂,使得粒度分布的测试工作比想象的要复杂得多。因此要真正了解各种粒度测试技术所得出的测试结果,明确颗粒的定义是很重要的。  激光粒度仪是根据光的散射现象测量颗粒大

“注胶”食品何以流向餐桌?

  日前温州市民郑女士在市场买了3只大虾,发现大虾体内竟被注射了不明胶状物。    之所以各种“注”法层出不穷,且大有后浪推前浪之势,不外乎指向一个“利”字。不可否认,经“注胶美容”的食品,提升了卖相,消费者被表象所迷惑。这并非食品“美容伎俩”的第一次大显身手,类似工业双氧水美白法、硫磺熏蒸法、

使用氙灯注的意事项

  1、氙灯的点燃位置垂直或水平均可,水平点燃时倾角不超过40°,垂直点燃时阳极在上,阴极在下。水平点燃应在灯泡壳水平方向有吸弧磁场稳定电弧位置,以防电弧在上飘动。  2、不要沾污石英泡壳应保持清洁,使用前应用酒精棉花擦净后再点灯。  3、灯泡接线时必须特别注意正负不能接反,粗电极“+”端为阳极,细

盐水输注试验的介绍

  盐水输注试验是通过下述原理进行的,正常情况下,盐水输注后,血钠及血容量的增加,大量钠盐进入肾单位远曲小管,可抑制肾小球旁细胞肾素的分泌,从而抑制血管紧张素-醛固酮的分泌,使血中肾素、血管紧张素、醛固酮水平降低。

血小板输注无效(三)

     4 治疗与预防     血小板无效输注的治疗,可针对不同病因采用不同的方法,非免疫因素以治疗原发病为主,如抗感染,脾切除术,以及增加血小板的输入量来提高输注效果。免疫因素则以预防为主,可用去除白细胞制品,治疗方面可静脉输注免疫球蛋白,选择配合性血小板输注。     4.1 去除白细胞

血小板输注无效(二)

    2.4 药物抗体 当患者输注血小板而出现不明原因的PTR时,在排除其它影响因素外,应考虑药物致敏产生抗体的可能,一般患者在血小板减少症前有用相关药物史,停药后,即可得到改善,再次使用该药可出现血小板减少症状。可以引起药物过敏性血小板减少症的常见药物见表1。药物致敏引起的免疫性血小板减

血小板输注指南(一)

尽管此指南中的建议和相关信息在印刷出版时被认为是真实准确的,但是不论作者或发行机构都对任何可能的错误或遗漏没有任何法律责任或义务。1. 方法经使用合适的关键词在数据库中进行文献检索,并对现有的专家组出版的指南(BCSH1992;Schfffer 等,2001)包括由英国血液学标准委员会在 M

血小板输注指南(五)

7.4 肝移植手术肝衰患者由于合并凝血因子减少,纤维蛋白溶解增强及血小板减少症导致止血功能降低。这种情况在肝移植中由于大量输血及供者肝在重灌注时的纤溶亢进而放大。当前的实践是使用 TEG 指导血小板及其他成分输血(MalleStt&Cox,1992;Hunt,1998),这将使成分输血更为经济与有效

血小板输注适应征

骨髓功能衰竭(由于疾病、有细胞毒性的治疗和照射) 在没有其他的危险因子的情况下,病人需要血小板输注的临界值为 10x109/l ,这一临界值与更高的临界值一样安全。危险因子包括败血症、同时使用抗生素或其他不规则出血(A 等,Ⅰb 级)。 对没有任何危险因素的病人,如果担心同种免疫产生血小板抗体,其临

血小板输注指南(二)

4.2 质量监控一些红细胞血清学试验和微生物学筛查试验(包括 NAT 测试 HCV)必须进行,试验结果直接决定最终分离的成分是否可以发放。每一袋成分在制备的每一个步骤和发放前必须进行目视检查。如果血袋有渗漏、破损或缺陷,袋内空气过多,疑有细菌污染或其他的不良征象,例如血小板凝块、浑浊或颜色有不正常的

血小板输注无效(一)

    血小板输注适用于预防和治疗血小板减少或血小板功能缺陷患者的出血,并已成为各种血液病及肿瘤患者放﹑化疗的有效支持疗法,但患者在多次输血(全血﹑红细胞﹑白细胞﹑血小板), 妊娠及器官移植后,易产生血小板相关抗体,导致血小板输注无效(PTR)。我们结合近几年国内外研究进展,对血小板

血小板输注指南(七)

10.3 血小板选择下述建议是在上一期关于 ABO 和 RhD 不相容血小板输注指南(BCSH,1992;国家血液署输血医学临床政策组,2000)及最近的临床实践(Menitove,2002)基础上进一步发展的。10.3.1 ABO 配合选择与患者 ABO 血型相同供者浓缩血小板,且只要可能即使用

血小板输注指南(三)

4.5 新生儿用血小板除前面的要求外还应外加:成分应当不含具有临床意义的不规则血型抗体,包括高滴度的抗 A 和抗 B。成分必须为 CMV 阴性。成分由一袋单采血小板用密闭系统分装而成(通常分成 4 份)。成分血小板含量 >40x109/l。在标签上额外注明“新生儿使用血小板”。4.6 宫内输注(IU

洗涤红细胞输注建议

洗涤红细胞(washed red blood cells)是采用特定的方法将保存期内的全血、悬浮红细胞用大量等渗溶液洗涤,去除几乎所有血浆成分和大部分非红细胞成分,并将红细胞悬浮在氯化钠注射液或红细胞添加液中所制成的红细胞成分血。制备洗涤红细胞时的血浆清除率≥98%,白细胞清除率应≥80%,红细胞回

血小板输注指南(九)

13. 血小板输注无效血小板输注无效的特征是多次输血小板均未取得满意效果。有些病人可能有一次输血小板效果不好,而以后几次效果不错。只有在 2 次及 2 次以上输血小板效果都不好,才能诊断为血小板输注无效。14. 血小板输注无效的原因有多种原因可以导致血小板输注效果不佳,可以分为免疫和非免疫两类。主要

血小板输注指南(六)

8. 血小板输注禁忌症8.1 血栓性血小板减少性紫癜(TTP)BCSH 正在准备血栓性微血管病溶血性贫血的诊断与治疗指南。血小板输注短暂地与 TTP 加重有关,因此除非有威胁生命的出血,否则是禁忌使用的(Gordon 等,1987;Harkness 等,1981)。8.2 肝素诱导血小板减少症(HI

临床指南:血小板输注

血小板输注的指征:骨髓功能衰竭(由于疾病、有细胞毒性的治疗和照射)在没有其他的危险因子的情况下,病人需要血小板输注的临界值为 10x109/l ,这一临界值与更高的临界值一样安全。危险因子包括败血症、同时使用抗生素或其他不规则出血(A 等,Ⅰb 级)。对没有任何危险因素的病人,如果担心同种免疫产生血

浅谈血小板无效输注

作为血液科医生,工作中几乎每日都会有病人输血,而输血后患者是否就一定能达到理想输注效果,缓解燃眉之急呢?近段时间我们就遇上不少此类输血后,尤其是输血小板后,血小板计数仍然不升,出血仍不能有效停止的情况。“血小板无效输注”这个结论也成了近来我们反复与病人及家属交代的内容。那么就让我们一起来学习了解下关

血小板输注适应证

1、由疾病、化疗或放疗引起的骨髓抑制或衰竭病人,凡血小板数低于20X109/L伴自发性出血者应输血小板。血小板数低于50X109/L,某些病人也可发生小量出血,一般止血措施无效也可输注血小板。2、血小板功能异常:如血小板无力症、尿毒症、严重肝病某些药物等引起血小板功能异常伴有出血者。3、大量输血所致

血小板输注指南(四)

5.2 推荐根据以上的研究,本指南有以下建议;这些建议与目前血小板输注标准委员会(1998)和美国临床肿瘤学会指南(Schiffer 等 2001)的规定一致:在没有其他的危险因子的情况下,病人需要血小板输注的临界值为 10x10109/l 这一临界值与更高的临界值一样安全。危险因子包括败血症、同时

血小板输注指南(八)

11. 输注给成人预防性输注血小板时,推荐使用 1 个单位的成人治疗剂量。如果不出现血小板输注无效,这将使体内血小板水平增加 20x109/l。当血小板用于治疗活动性出血,可能需要更大剂量;血小板输注的剂量和频率取决于个体情况,无法提供通用建议。以下推荐均为 C 等,Ⅳ级:11.1 对血小板的检查医

电缆故障定位仪弧反射法

  (二次脉冲法)在电缆故障定位中的应用的工作原理:首先使用一定电压等级、一定能量的高压脉冲在电缆的测试端施加给故障电缆,让电缆的高阻故障点发生击穿燃弧。同时,在测试端加入测量用的低压脉冲,测量脉冲到达电缆的高阻故障点时,遇到电弧,在电弧的表面发生反射。由于燃弧时,高阻故障变成了瞬间的短路故障,低压