特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定
实验概要本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL,然后再进行细胞毒试验。其原理为:外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆,在体外经某一特定(或同种异体细胞)抗原刺激后,能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖,而其他T细胞克隆则逐渐死亡;经3~4次刺激后,存活的均为识别特异性MHC/抗原肽复合物的细胞,即抗原特异性CTL 。主要试剂丝裂霉素C(Sigma):用培养液或PBS配制300μg/ml含20%的新生牛血清的RPMI 1640 实验材料EB病毒转化的B淋巴母细胞株实验步骤1. 特异性CTL的诱导和制备1) 取作者外周血分离PBMC,无血清1640洗两遍,用含20%的新生牛血清的RPMI 1640调成1.5×106 /ml,置于24孔板中,于5% CO2 培养箱中4小时使单核细胞贴壁以去除之,然后收集细胞,计数;2) &......阅读全文
前列腺特异性抗原筛查弊大于利?
加拿大预防医疗护理专责小组近日在《加拿大医学协会期刊》发表研究报告称,用于筛查前列腺癌的特异性抗原检验(PSA)弊大于利,常会产生不准确的阳性反应,从而导致患者接受不必要治疗及产生不良反应,应予放弃。 筛查是早期发现前列腺癌最有效的途径之一,也是提高疗效的关键。目前最常用和最基础的前列腺癌筛查
如何理解抗原抗体结合的特异性和交叉反应性
如何理解抗原抗体结合的特异性和交叉反应性。 抗原与抗体结合的特异性,是指某一抗原表位与相应抗体结合的特异性。这种结合的分子机制是抗原表位的空间结构与抗体分子超变区互补的结果。而交叉反应是指两种抗原分子表面存在有相同或相似的抗原表位时,同一种抗体结合的现象。因此,交叉反应实质上也是抗原与抗体的特
抗原特异性T细胞克隆制备实验——间歇循环刺激法
实验方法原理T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。实验材料MNC抗原试剂、试剂盒RPMI 1640培养液仪器、耗材24孔培养板37℃恒温箱96孔培养板实
抗原特异性T细胞克隆的制备——间歇循环刺激法
实验概要本实验利用间歇循环刺激法制备了抗原特异性T细胞克隆。实验原理间歇循环刺激法是制备抗原特异性T细胞克隆的传统方法,原理是经抗原间隔刺激多个循环。主要试剂1. 含10%人AB型血清的完全RPMI 1640培养液。主要设备1. 24孔培养板;2. CO2 温箱;3. 高速离心机;4. 96孔板;5
关于前列腺特异性抗原检查的注意事项介绍
检查前: (1) 抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 (2) 体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。 (3) 抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。 检查后: (1) 抽血后,需在针孔处进
前列腺特异性抗原的临床意义及参考值
临床意义 若血清tPSA和fPSA升高,而fPSA/tPSA降低,则考虑诊断前列腺癌,以此来提高诊断的特异性和正确性。前列腺炎、前列腺肥大、肾炎、前列腺息肉和泌尿生殖系统的疾病也可见血清tPSA和fPSA轻度升高。单独使用tPSA或fPSA诊断前列腺癌时,并不能排除前列腺良性疾病的影响。 正
Science子刊:抑制CDK8/19促进抗原特异性的效应
表达Foxp3转录因子的调节性T细胞(Treg)在抑制包括自身免疫性疾病在内的过度免疫反应中起关键作用。一种有前景的抑制有害免疫反应(比如自身免疫性疾病和过敏)的方法是将介导疾病的T细胞转化为免疫抑制性的Treg细胞。 在一项新的研究中,日本研究人员基于抑制细胞周期蛋白依赖性激酶CDK8和CD
《自然》子刊:可扩增筛选肿瘤新抗原特异性T细胞的技术
随着肿瘤的生长,机体的淋巴细胞会识别出这些异常的细胞,并浸润到肿瘤中,这就是我们常说的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。 TIL中有一部分是以肿瘤特异性新抗原为靶点的T细胞,这部分细胞具有很强的肿瘤杀伤能力。然而实际上,TIL的数量很少,且常常在肿瘤微环境中被抑制。 那么,我们是否可以通过某些手段
MHC-四聚体技术:检测抗原特异性T细胞的金标准
细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分 T 淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体(TCR),与 MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽,启动获得性/特异性免疫应答机制,比如 T 细胞介导的细胞免
人肿瘤特异性抗原(TSA)分析检测ELISA试剂盒使用说明
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本肿瘤特异性抗原(TSA)含量。试验原理:TSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TSA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤
科学家发现与HIV控制相关的患者特异性抗原表位序列
1月15日,德国马普所科研人员在PNAS上发表了题为“HIV peptidome-wide association study reveals patient-specific epitope repertoires associated with HIV control”的文章,通过HIV多肽
加拿大研究表明前列腺特异性抗原筛查弊大于利
加拿大预防医疗护理专责小组近日在《加拿大医学协会期刊》发表研究报告称,用于筛查前列腺癌的特异性抗原检验(PSA)弊大于利,常会产生不准确的阳性反应,从而导致患者接受不必要治疗及产生不良反应,应予放弃。 前列腺抗原是前列腺产生的一种蛋白,血液中的前列腺特异性抗原增多,可能是罹患癌病的征兆,但也有
肾综合征出血热的特异性抗原、抗体和病原学检查
早期用免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验(ELISA、胶体金法在血清、尿沉渣细胞可查特异性抗原。检测血清特异性抗体IgM1:20以上和IgG抗体1:40为阳性,恢复期血清特异性IgG抗体比急性期有4倍以上增高者也可诊断。RT-PCR法检测血清中病毒RNA,可用于早期诊断。
抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法
抗原特异性对T细胞功能至关重要,但由于技术局限,其在T细胞高通量多组学分析中常常被忽略。美国德克萨斯大学奥斯汀分校的研究团队揭示了一种用于抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法。该研究成果于近日发表在《Nature Immunology》上,题为:High-throughput
科学家提出抗原特异性CD8+T细胞的单细胞分析方法
抗原特异性对T细胞功能至关重要,但由于技术局限,其在T细胞高通量多组学分析中常常被忽略。美国德克萨斯大学奥斯汀分校的研究团队揭示了一种用于抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法。该研究成果于近日发表在《Nature Immunology》上,题为:High-throughput
电化学发光法测定血清前列腺特异性抗原的临床探讨
作者:黄清容,孙艺萍 作者单位:513000 广东英德,英德市人民医院检验科 【摘要】 目的 调查前列腺癌(PCa)、前列腺增生(BPH)或前列腺炎患者和正常人血清中前列腺特异性抗原(PSA) 和游离前列腺特异性抗原(fPSA)含量,探讨PSA和fPSA测定水平对前列腺疾病的诊断价值。方法
清神经元特异性烯醇化酶和糖类抗原724肿瘤标志物
本研究的目的是在20个健康个体中评估两种肿瘤标志物,糖类抗原724(CA724)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)。然后,确定平均个体内和个体间生物变异(CV I和CV G)。通过详细的问卷和体格检查,从20名健康受试者中每周一次采集血样并持续5周。将这些样品储存在-80℃下并重复进行分析。我们计算了
丁型肝炎抗原检测的灵敏度和特异性如何影响诊断准确性?
灵敏度是指测试对疾病存在时的识别能力,换句话说,就是在所有真实为阳性的样本中,测试能够正确识别出的比例。一个高灵敏度的测试意味着几乎没有假阴性结果,即几乎所有真正感染了丁型肝炎的个体都会被正确诊断出来。 特异性则是指测试对疾病不存在时的识别能力,即在所有真实为阴性的样本中,测试能够正确识别出的
完全抗原,半抗原和超抗原的概念区别
完全抗原:同时具有免疫原性和抗原性的抗原,又称免疫原。半抗原:仅具备抗原性而无免疫原性的抗原,如某些寡糖、类脂和药物等。超抗原:能非特异激活多克隆T细胞并能刺激其分泌大量细胞因子的抗原。
抗原
· Designing Antigens (Perkin-Elmer)What is an Epitope?Choosing the EpitopeMethods for Epitope PredictionDesigning the Synthetic PeptidePromisc
抗原
决定抗原特异性的物质基础是抗原分子中的抗原表位。抗原以抗原决定簇与相应淋巴细胞的抗原受体结合而激活淋巴细胞引起免疫应答。换言之,淋巴细胞表面的抗原识别受体通过识别抗原决定簇而区分“自身”与“异己”。抗原也是以抗原决定簇与相应抗体特异性结合而发生反应的。因此,抗原决定簇是免疫应答和免疫反应具有特异性的
抗原的抗原性(二)
三、天然蛋白质的抗原性 绝大多数免疫原性物质是大分子蛋白质或细胞组分,但只是其有限的部位能与其相应抗体结合,此部位称为抗原决定簇或表位(前述载体-半抗原效应已证明一个抗原分子须有T细胞决定簇和B细胞决定簇)。由于天然大分子蛋白质结构复杂,并具有空间构型,因此对其单一抗原决定簇的化学组成、定位及
抗原加工与抗原递呈
抗原加工是指蛋白质抗原在细胞内被降解成能与MHC分子结合的肽的过程。抗原递呈是指MHC分子与抗原肽结合,将其展示于细胞表面供T细胞识别的过程。抗原又分为内源性抗原和外源性抗原,内源性抗原:细胞内产生的蛋白质抗原,包括自身抗原和非己抗原----MHCⅠ分子递呈。外源性抗原:由细胞外摄入细胞内的蛋白质抗
抗原的抗原性(一)
自发现抗体后,用血清学方法在体外实验,证明了天然抗原与其相应抗体发生特异性结合,这是一个重要的免疫学现象,称这种特性为抗原的抗原性。在早期由于尚未建立对蛋白质抗原进行分析的方法,为研究抗原性的化学本质造成了困难。奥地利免疫化学家Landsteiner在本世纪20年代创建了人工结合抗原,并应
抗原-抗原决定簇
[大纲]抗原与抗原性的概念影响抗原免疫原性的因素抗原决定簇[解析]1、抗原抗原(Ag) 是指凡能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞,并能与之结合发生特异性免疫反应的物质。抗原有两种基本特性:免疫原性和反应原性,统称为抗原性免疫原性:指抗原刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞的能力或特性。反应原性:指抗原与抗
抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞新的分析方法
抗原特异性对T细胞功能至关重要,但由于技术局限,其在T细胞高通量多组学分析中常常被忽略。美国德克萨斯大学奥斯汀分校的研究团队揭示了一种用于抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法。该研究成果于近日发表在《Nature Immunology》上,题为:High-throughput
抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析新方法
抗原特异性对T细胞功能至关重要,但由于技术局限,其在T细胞高通量多组学分析中常常被忽略。美国德克萨斯大学奥斯汀分校的研究团队揭示了一种用于抗原特异性CD8+T细胞的高通量、高维度单细胞分析方法。该研究成果于近日发表在《Nature Immunology》上,题为:High-throughput
血清前列腺特异性抗原与蛋白酶抑制剂复合体的检测
前列腺癌患者血清中前列腺特异性抗原的主要是由前列腺抗原与a1抗凝乳蛋白酶组成,此复合物的检测能显著提高临床癌症检测的敏感性。PSA检测在临床中已经开展了很多年,但是在临床工作中我们遇到一个问题:2个标本稀释后不能得到与临床诊断相符合的结果。为了解释清楚这个现象,我们把标本做了电泳检测,发现主要的PS
免疫分子与受体工程学—MHCIg二聚体检测抗原特异性T细胞
实验步骤 基 本 方 案 构 建 MHC I-Ig 二聚体材 料编码目的 M H C I 类分子的 c D N A 及合适的引物M Z w I 和 X k I 限制性内切核酸酶及缓冲液(N e w England Biolabs)T A 克 隆 试 剂 盒(Invitrogen),可选p X I g
根据抗原的来源可将抗原分类
根据抗原的来源可将抗原分为:(1)异种抗原(xenoantigens):病原微生物、类毒素等不同种族之间的抗原;(2)同种异型抗原(9alloantigens):存在于同一种族不同个体之间的抗原,如HLA,ABO血型抗原,Rh抗原, MHC等;(3)自身抗原(autoantigens):自身成分,分