冷冻组织切片的制作
实验概要本实验介绍了冷冻组织切片制作的基本操作流程。主要试剂液氮，干冰，1％明胶，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀释抗体，辣根过氧化物酶标记的二抗，DAB／金属盐试剂，3％过氧化氢，0.3％(W／V)氯化镍贮存液，Harris苏木精，乙醇主要设备载玻片，Whatman 1＃滤纸，低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织实验步骤1. 将未受损伤的组织切剖成小样本，约lcmXIcmX0.4cm。2. 将标本放在卡片的一端。标记该卡片，将带有标本的一端浸入液氮中。60s后，取出标本并放在干冰上。修剪卡片，使其大小刚好比组织块稍大些，转入预冷的(-70℃)带有标记的小瓶中。3. 切片前，用1％明胶包被洁净的载玻片。加热至50℃使明胶溶于水中，冷却，加入0.02％叠氮钠。将玻片浸入明胶溶液中30s，取出，自然干燥。4. 按照仪器使用说明书，用低温恒温器制备冷冻切片。通常切片厚度在5-10gm之间。用包被过的......阅读全文
冷冻电镜样品冷冻
样品冷冻样品冷冻其实是科学家们很早就想到的思路，但是冷冻之后样品中水分子形成冰晶，不仅产生强烈电子衍射掩盖样品信号，还会改变样品结构。直到1974年，Kenneth A. Taylor和Robert M. Glaeser在-120℃观察含水生物样品时未发现冰晶形成，而且发现冷冻样品能够耐受更大剂量和
冷冻车冷冻干燥技术原理
干燥是保持物质不致腐败变质的方法之一。干燥的方法有许多，如晒干、煮干、烘干、喷雾干燥和真空干燥等。但这些干燥方法都是在0℃以上或更高的温度下进行。干燥所得的产品，一般是体积缩小、质地变硬，有些物质发生了氧化，一些易挥发的成分大部分会损失掉，有些热敏性的物质，如蛋白质、维生素会发生变性。微生物会失去生
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍（二）
通过冷冻断裂生成图像 冷冻断裂和冷冻蚀刻技术往往采用高真空精细镀膜技术，将超细腻重金属和碳薄膜沉积于断裂表面。冷冻断裂样本在一定角度下用金属覆盖，然后在碳背衬膜（徕卡EM ACE600冷冻断裂或徕卡EM ACE900与徕卡EM VCT500）上生成复型进行TEM成像或在SEM的试块面上进行成像。对于
冷冻断裂与冷冻蚀刻基础介绍（一）
揭示生物学样本和材料样本原本无法观察到的内部结构 冷冻断裂是一种将冰冻样本劈裂以露出其内部结构的技术。冷冻蚀刻是指让样本表面的冰在真空中升华，以便露出原本无法观察到的断裂面细节。金属/碳复合镀膜能够实现样本在SEM（块面）或TEM（复型）中的成像，主要用于研究如细胞器、细胞膜，细胞层和乳胶。这项技术
冷冻电镜低剂量电子冷冻成像
低剂量电子冷冻成像材料汪都知道一般做TEM、SEM的时候，样品导电性越好，电子剂量越高，成像质量越好。然而，高剂量电子对生物大分子却是毁灭性的，因此Richard Henderson教授提出在低温下用尽量低的电子剂量成像。他与其合作者先后在1975年和1990年重构出了粗糙的（7Å）和高分辨率（3.
快速冷冻和缓慢冷冻哪种方法好
快速冷冻和缓慢冷冻哪种方法好速冻的好，还可以减肥。迅速冷冻使食物形成极小的冰晶,不严重损伤细胞组织,从而保存了食物的原汁与香味,且能保存较长时间。如何通过冷冻食品快速减肥 ：美国的研究者称，对于减肥者的饮食来说，食物的体积也是影响减肥效果的因素之一。有营养的冷冻食品消费方便，可以作为控制食物体积的方
冷冻离心机的冷冻有什么作用
离心机就是利用离心力使得需要分离的不同物料得到加速分离的机器。冷冻离心机有分为低速、高速冷冻离心机，以及超速分析、制备两用冷冻离心机等多种型号。 转速一般不超过4000rpm，最大容量为2—4L，是实验室最常用于大量初级分离提取生物大分子、沉淀物等。其转头多用铝合金制的甩平式和角式两种，离心管
细胞冷冻保存
实验概要细胞的冷冻保存实验材料材料： 1 生长良好之培养细胞 2 新鲜培养基 3 DMSO (Sigma D-2650) 4 无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020) 5 0.4 ％ w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) 6 血球计数盘
冷冻细胞活化
实验概要1. 冷冻细胞之活化原则为快速解冻，以避免冰晶重新结晶而对细胞造成伤害，导致细胞之死亡。 2. 细胞活化后，约需数日，或继代一至二代，其细胞生长或特性表现才会恢复正常(例如产生单株抗体或是其它蛋白质)。实验材料材料： 37 ℃ 恒温水槽 新鲜培养基 无
冷冻切片操作
1.冷冻切片机要始终处于运行状态，即使在不做冷冻切片时也要开着致冷，不能时开时关，以免影响机器寿命。2.手术取下的新鲜组织不要固定，因固定过的组织不利于切片，而且还会影响染色。3. 用OCT做包埋剂，起到支撑的作用。先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上，OCT不要太多，以免流到固定头外，组织表
冷冻电镜
说起冷冻电镜，小编想不管是研究生还是教授大咖，可能和科研有那么一丁点联系的人对这个名字都不会陌生，因为它实在太出名了！基于冷冻电镜产出的科研成果很多都发表在Nature、Science、Cell等顶刊上（羡慕脸），堪称NSC神器。冷冻电镜技术的发展直接带动了生命科学领域，特别是结构生物学的飞速发展，
冷冻离心机冷冻效果差的原因分析
冷冻离心机因为离心腔内温度需要到零下才能达到理想的离心效果，有些外界因素会影响到离心效果，特总结如下：1.环境温度过高，离心室内温度过高；2.离心机放置得离墙太近3.制冷系统中冷媒泄露或混入空气，制冷管道受阻不畅或断裂；4.冷凝器内散热片被灰尘阻塞或冷风机不运转；5.修理后重新灌入的冷媒量过多或过少
怎么解决液氮冷冻机冷冻不循环的问题？
一般来说液氮冷冻机内部已含有冷冻循环泵，速冻机(大型)内部是不含有冷冻循环泵，这时在装配冷冻系统时，速冻机公司需外置安接冷冻循环泵，使冷冻在吸收了被冷却设备的热量后，回流到速冻机内制冷降温，也即使冷冻供回管道形成一个循环系统。 需要注意的是无论冷冻泵是内置或外置时，建议冷冻泵的位置要较冷冻蓄水
冷冻撕裂的概念
中文名称冷冻撕裂英文名称freeze-fracturing定 义电子显微镜标本制备中的一个方法，冷冻标本在真空下断裂，暴露出膜和细胞器平面，以金属浇铸法复制这些断裂面，最终图像与自然状态下的原料图像相似。该法不用固定剂也不用脱水。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
冷冻保存细胞方法
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃（30－60 分钟）→-20℃( 30 分钟) → -80℃（16－18 小时或隔夜）→ 液氮罐长期储存。冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80 ℃以下， 再放入液氮中长期储存。注意：-20℃不可超过1 小时，以防止冰晶过大，造
LSCM液氮冷冻法
液氮冷冻法:成年小鼠和大鼠的脑及稍大一些的组织块也可采用此方法冷冻。将组织块置于样品台的 OCT中，为防止组织块爆裂，先在液氮中迅速浸提几次，时间从1s开始逐渐增加，直至样品温度与液氮温度平衡，之后移至冷冻切片机中，使温度与切片机箱体温度一致，进行冷冻切片。
冷冻干燥原理
冷冻干燥是指通过升华从冻结的生物产品中去除水分或其他溶剂的过程。升华指的是溶剂，比如水，象干冰一样，不经过液态，从固态直接变为气态的过程。冷冻干燥得到的产物称作冻干物（lyophilizer），该过程称作冻干（lyophilization）。为什么要选择冷冻干燥传统的干燥会引起材料皱缩，破坏细胞。在
冷冻机简介
冷冻机是指一种用压缩机改变冷媒气体的压力变化来达到低温制冷的机械设备。所采用的压缩机，因其使用条件和压缩工作介质的不同，它又不同于一般的空气压缩机。按冷冻机结构和工作原理上的差别，它与空气压缩机类似，也可分为活塞式、螺杆式、离心式等几种不同形式。冷冻机是压缩制冷设备中最重要的组成部分之一。冷冻机
程序冷冻仪Planer
英国Planer公司是世界上最早的研制及生产程序冷冻仪(Control Rate Freezer)的专业公司。多年来Planer公司一直处于程序冷冻保存领域的领先地位。胚胎，精子，干细胞, 血袋, 骨髓等生物样品的长期保存，冷冻是唯一的保存方法。保存是否成功取决于样品解冻后的成活率。
快速冷冻的定义
中文名称快速冷冻英文名称quick freezing定 义将样品置于-196℃液氮中使之迅速冷却的过程。多用于生物样本的标本制作。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
神奇的冷冻研磨
【摘要】对于一些脂肪、水分含量高的样品，一般的研磨方式无法达到理想的效果，且看IKA®采用的冷冻研磨手段是如何解决这一难题的。在实验室前处理过程中，我们常常会遇到一些难以处理的样品，水分含量高的、油性的，譬如糖果、巧克力，蜜饯等。如果直接研磨，高速运转的马达会带来温度的上升，往往使得这些样品出现粘结
细胞的冷冻保存
1. 注意事项：1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态，约为80 – 90 ％致密度。1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质，例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。不宜将冻存细胞放置在0℃～-60℃这一温度范围内过久，低温损
什么是液氮冷冻
液氮冷冻治疗是一种冷冻生物学的综合效应。正常细胞在极度冷冻的状态下，会发生不可逆转的损害。它就是通过极度冷冻的状态下，将病区细胞迅速杀死，使得病区得到正常的恢复，一般用来治疗鸡眼、疣、神经性皮炎以及皮肤病等。严重的寒冷性荨麻疹、冷球蛋白血症、雷诺氏症，及少数年老、体弱、对冷冻治疗不能耐受者。糖尿病伴
冷冻电镜成像
冷冻电镜成像冷冻的样品冷冻输送器转移到电镜的样品室，在电镜成像之前，需确认样品中的水处于玻璃态。由于生物样品对高能电子的辐射敏感，成像时必须使用低剂量技术（
冷冻切片应用特点
（1）在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断，原定手术方案不相符合，或者怀疑时，需要病理确定。（2）了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。（3）对于已确定为恶性肿瘤的患者，则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的肿瘤组织。（
病毒冷冻保藏技术
实验概要Snap freezing, or flash freezing, is the process by which samples are lowered to temperatures below -70°C very rapidly using dry ice or liquid
什么是冷冻蚀刻？
冷冻蚀刻是指将标本置于-100˚C的干冰或-196˚C的液氮中进行冰冻，然后用冷刀将标本断开，升温后冰在真空条件下迅即升华，暴露出断面结构。蚀刻后，向断面以45度角喷涂一层蒸汽铂，再以90度角喷涂一层碳，加强反差和强度。然后用次氯酸钠溶液消化样品，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜（replica）。
冷冻电镜原理
冷冻电镜原理冷冻电子显微学解析生物大分子及细胞结构的核心是透射电子显微镜成像，其基本过程包括样品制备、电子显微镜成像、图像处理及结构解析等几个基本步骤。冷冻电镜解析结构步骤 图片来源：中科院计算所透射电子显微镜成像过程中，电子束穿透样品，将样品的三维电势密度分布函数沿着电子束的传播方向投影至与传播
冷冻电镜原理
冷冻电镜原理冷冻电子显微学解析生物大分子及细胞结构的核心是透射电子显微镜成像，其基本过程包括样品制备、透射电子显微镜成像、图像处理及结构解析等几个基本步骤（图3.1）。在透射电子显微镜成像中，电子枪产生的电子在高压电场中被加速至亚光速并在高真空的显微镜内部运动，根据高速运动的电子在磁场中发生偏转的原
冷冻电镜分类
冷冻电镜分类目前我们讨论的冷冻电镜基本上指的都是冷冻透射电子显微镜，但是如果我们以使用冷冻技术的角度定义冷冻电镜的话，冷冻电镜主要可以分为冷冻透射电子显微镜、冷冻扫描电子显微镜、冷冻蚀刻电子显微镜。 冷冻透射电子显微镜冷冻透射电镜（Cryo-TEM）通常是在普通透射电镜上加装样品冷冻设备，将样品冷却