蛋白质定量分析

实验概要Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 (CBG) 可与蛋白质结合而变色的特性来定量;若试样中的蛋白质量较多,则结合到蛋白质而变色的CBG 也多,因而呈色较深。本实验是以一组标准蛋白质为对象,制作一条蛋白质量与吸光度的标准校正线。主要试剂Buffer A-0BSA标准品 (Bio-Rad, bovine serum albumin, 100 μg/mL)未知浓度样本 (unknown BSA, 0.8 mL)Dye Reagent (Bio-Rad 500-0006) 先以水稀释四倍备用。以染料Coomassie brilliant blue G-250 配制的溶液,勿与胶体电泳染色用的CBR-250 混淆,各有其使用上的特色,不要互用。标准品及样本:标准品系列:使用小试管准备一组BSA (b) 标准......阅读全文

凯氏定氮法如何测定蛋白质的含量

(一)消化  1、准备6个凯氏烧瓶,标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL,样品要加到烧瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g,浓硫酸2.0mL,30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,对样品测

凯氏定氮仪分析稻米蛋白质的应用

  蛋白质是细胞做功的工具,与生命的起源和进化都密切相关。所以食品中蛋白质的多少,不仅表示食品的质量,也关系着人体健康。稻米是人类重要的粮食作物,稻米蛋白质因其较为合理的蛋白及氨基酸组成而表现出优良的营养品质,蛋白质含量不仅影响其营养品质,而且也对蒸煮品质有重要影响。    目前测定蛋白质含量的方法

蛋白质含量测定法凯氏定氮法

  本法系依据蛋白质为含氮的有机化合物,当与硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化时使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定,根据酸的消耗量算出含氮量,再将含氮量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。  本法灵敏度较低,适用于0.2~2.0mg氮的测定。氮

凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量

食品种类很多,食品中pro 的性质和含量各不相同,而且其他成分,如碳水化合物,脂肪和维生素的干扰成分很多,因此pro 的测定通常利用经典的凯氏定氮法将样品消化成铵盐蒸馏,用标准酸液吸收,用标准酸或碱液滴定,由样品中含氮量计算出pro 的含量。由于食品中pro含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微

定氮仪测定大米中蛋白质含量的步骤

大米是人们日常食用的主食之一,其蛋白质含量在7%~9%左右,大米中蛋白质含量高低直接影响大米硬度,蛋白质含量越高大米硬度越强同时蛋白质对人体健康也有着密切的联系。食品中的蛋白质含量检测可以使用定氮仪进行测定分析,大米亦可,本文就详细的说明一下使用定氮仪对于蛋白质含量的测定步骤以及结果计算。 称取大米

微量凯氏定氮法测定食品中蛋白质

1)原理同常量凯氏定氮法。2)主要仪器①凯氏烧瓶(100mL)。②微量凯氏定氮蒸馏装置3)试剂①0.0100mol/L盐酸标准溶液。②20g/L硼酸吸收液:称取20g硼酸溶解于1000mL热水中,摇匀备用。③其他试剂同常量凯氏定氮法。4)操作方法(1)样品消化    精密称取均匀固体样品0.2~2.

全自动凯氏定氮仪测定种子蛋白质

  种子中的蛋白质含量的测定有一定的必要性,种子在发芽以及生产的过程,养分大部分来源是通过种子中吸收而来的,对于某些种子中的蛋白质含量在国家标准中均是由进行相关的要求的,最为明显的是豆类得蛋白质含量的监测,在相关的标准中也对其进行了要求,比如《GB 2905一82 谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定

测量蛋白质的方法杜马斯定氮法

其测定原理为:样品在900-1200摄氏度高温下燃烧,燃烧过程中产生混合气体,其中的干扰成分被一系列适当的吸收剂所吸收,混合气体中的氮氧化合物被全部还原成分子氮,随后氮的含量被热导检测器检测,然后计算。

蛋白质的测定方法之凯氏定氮法

一  凯氏定氮法这种方法是1883年Kjeldahl发明,当时凯氏只使用H2SO4来分解试样,来定量谷物中的pro,他只知用H2SO4分解试样,而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程,所以只使用H2SO4分解试样,需要较长时间,后来由Gunning加入改进,他改进的办法是在消化时加入K

测定蛋白质含量只有凯氏定氮法吗

当然不是一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下:nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so

移液器使用、维护和保养。

一个完整的移液循环,包括吸头安装——容量设定——预洗吸头——吸液——放液——卸去吸头等六个步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。1.吸头安装:正确的安装方法叫旋转安装法,具体的做法是,把白套筒顶端插入吸头(无论是散装吸头还是盒装吸头都一样),在轻轻用力下压的同时,把手中的移液器按逆时针方向旋转 1

凯氏定氮仪对红枣蛋白质含量的检测

  红枣一直被人们称为补血养颜的圣品,其营养价值是不可否认的。对于红枣的营养价值也是多有了解的,大枣中含有糖类、脂类、蛋白质、有机酸、Vc,VB,,VB2,从、VA、芦丁和36种微量元素等50多种化学成分。大枣中除含有大量的糖、蛋白质等营养成分外.还含有人体所需要的18种氨基酸,其中包括成人体内不能

定氮仪测定蛋白质是间接法还是直接法?

测定大米等粮食样品的蛋白质含量,是判断粮食品质的一个重要方法,现代为了操作方便,并有效提高测定的效率和精度,在很多行业中都是采用定氮仪这种仪器来进行测定。而一般来说,蛋白质测定方法主要可以分为两类,分别是间接法和直接法,那么使用定氮仪测定蛋白质采用的是间接法还是直接法呢?首先来让我们看看什么是间接法

自动定氮仪让蛋白质检测“快、准、稳”

      在食品、肥料、土壤、谷物、化工等诸多行业,氮元素的检测工作日益增多,而我们知道氮元素的检测或者说是蛋白质的检测是化学实验室最繁琐的检测项之一,虽然有专业的定氮仪等仪器来帮助,但是其中的许多操作依然需要人工完成。为了提高效率,让蛋白质检测“快准稳”,自动化程度更高的自动定氮仪应运而生。  

凯氏常量定氮法测定蛋白质的注意事项

  a.样品应时均匀的,若是固体样品应事先研细,液体样要混合均匀。  b.样品放入K氏烧瓶时,不要黏附瓶颈上,万一黏附可用少量水缓慢冲下,以免被检样消化不完全,使结果偏低。  c.消化时,如不容易呈透明溶液,可将K氏烧瓶放冷后,加入30%过氧化氢催化剂2~3ml,促使氧化。  d.在整个消化过程中,

全自动凯氏定氮仪检测大米蛋白质含量

  食品中蛋白质含量高低是评价食物营养成份的主要指标之一。稻米是人类重要的粮食作物,稻米蛋白质因其较为合理的蛋白及氨基酸组成而表现出优良的营养品质,蛋白质含量不仅影响其营养品质,而且也对蒸煮品质有重要影响。蛋白质是生物体中含量最高,功能最重要的生物大分子,细胞和生物体在完成由基因编码的生命活动过程中

KDN系列定氮仪测定酱油中的蛋白质含量

酱油作为我们日常生活中的常见调味品,其品质关系到用户的健康。而酱油中蛋白质含量是酱油指标中重要指标,一般来说高等级的酱油含有较高的蛋白质含量。因此使用KDN系列定氮仪测定酱油中的蛋白质含量具有重要的实际意义。由于市面上的酱油存在用色素调制的问题,因此为了保障食品安全,防止其损害消费者的健康。我们使用

凯氏定氮法测蛋白质含量的误差来源

1.蛋白质附在壁上,被检样消化不完全,使氮有损失。2. 硫酸缺少,这样会形成硫酸氢钾,而不与氨作用3.氨是否完全蒸馏出来4.有时铜离子与氨作用,生成深兰色的结合物[Cu(NH3)4]2+

凯氏定氮仪测定牛奶中蛋白质的含量

凯氏定氮仪测定牛奶中蛋白质的含量  凯氏定氮仪通过程序化设计和新获得蒸汽发生器实现改变蒸馏时间和蒸汽流量。根据分析样品的不同,可选择快或慢的蒸馏速度。凯氏定氮仪具有良好的自我保护装置,不关闭防护门,仪器不启动,安全可靠,不会对人员造成任何伤害。凯氏定氮仪含四个RS232接口,可同时接电脑、打印机、键

全自动凯氏定氮仪测定鱼蛋白质含量

蛋白质中含有一定比例的氮元素,氮元素含量与蛋白质的含量存在一定的转换关系,即氮换算蛋白质的系数。凯氏定氮法首先测定样品中氮的质量,再乘以F值即为样品中的蛋白质质量。全自动凯氏定氮仪是对氮进行测定的重要仪器,也是目前最为推荐的产品。研究人员普遍引用肉及肉制品的F值(6.25)来计算其蛋白质含量。但作者

凯氏定氮仪测定若羌红枣中蛋白质含量

    红枣具有极高的营养价值和医疗保健作用,而新疆若羌红枣享誉盛名。使用凯氏定氮仪测定若羌红枣中蛋白质含量,可以为红枣进一步深加工提供有利的依据。    若羌红枣中蛋白质含量的测定使用凯氏定氮仪进行,根据中华人民共和国国家标准GB/T 5009.5-2003方法测定。凯氏定氮仪测得若羌红枣中粗蛋白

凯氏定氮法进行蛋白质分析的主要步骤

操作方法  1、 样品处理:精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品(约相当氮30-40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,6g硫酸钾及20毫升硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上,小火加热,待

凯氏定氮仪对刺槐蛋白质含量的测定

刺槐属植物,以花入药,药材名为刺槐花。刺槐花中含有丰富的蛋白质、糖、氨基酸、酶及多种微量元素。刺槐不仅广泛分布,而且是广泛使用,不仅药用,叶子花 也可以吃,现在已经成为城市的一个绿色蔬菜。通过KDN-04C凯氏定氮仪对10个不同来源刺槐进行蛋白质的含量测定,为质量评价和资源的开发和利用提供依据。蛋白

胞外转录反应

实验概要RNA聚合酶由一条多胜肽  (polypeptides)所构成,其在进行转录反应时所须辨认的启动子长度仅20bp左右,而且转录起始位置非常明确,转录效能良好,成了目前进行胞外转录反应时的最佳选择。要进行胞外转录反应时,仅需将目标基因次选殖   (subclone)至带有SP6,T3或T7启动

全自动定氮仪检测分析食用菌蛋白质含量

  人体的健康需要摄取许多的营养素,其中蛋白质是人体健康十分重要的元素之一。既然如此,食物中的蛋白质含量的多少也标志着食物的营养价值的高低。菌类是人们喜爱的食物之一,因为它的营养元素十分丰富并兼有食疗价值,富含人体必需的各种矿物质、蛋白质、氨基酸和多糖等,蛋白质含量是衡量其营养价值的重要指标之一。对

定氮仪在小麦颗粒蛋白质含量检测中的应用

      蛋白质是较为复杂的含氮有机物的合成,以往我们用人工方式检测的时候是比较费时的,而且容易受到人为的影响,在使用的试剂方面也是比较多的,但是容易对环境造成污染。而现在我们都在使用定氮仪进行操作,该法具有自动、省时、准确,减少环境污染等优点。小麦的品质高低受小麦的蛋白质含量的影响很大,这样会严

全自动定氮系统检测玉米粉中蛋白质含量

1.设备蒸馏仪 Büchi K-360滴定仪Metrohm 719天平,精度万分之一消解仪 Büchi K4242 药品HCl,0.1000mol/l 上海计量所硼酸2%, 调整pH为4.65 国产分析纯NaOH 32%/ 33% (质量分数) 国产分析纯硫酸铵,99.99% Fluka蒸馏水二次蒸

全自动定氮仪检测酒糟蛋白质含量的操作步骤

  酿酒后的酒糟含有大量蛋白质、纤维素等,可作为开发蛋白质的原料。目前常用于检测蛋白质的方法主要有4种:全自动定氮仪法、双缩脲法、Folin-酚试剂法和紫外吸收法。下面就先简单的说说全自动定氮仪方法的操作步骤:    首先是样品的提取:     精确称取1g左右酒糟粉末样品2份于高腰烧杯中,力2gK

全自动定氮仪(蛋白质测定仪)操作说明手册

操作方法.1样品消化 称取经粉碎通过40-60目/寸试样0.5-1g(视含量而定)无损的置入已洗涤烘干的试管中加催化剂5g左右和10ml左右硫酸。 将消化管分别放入消化架各个孔内,然后置于消化炉上,开启抽气三通上连接的自来水龙头,使抽气三通处于吸气状态。接通电源,在加热初始阶段需注意观测,防止试样因

凯氏定氮法测定面粉中蛋白质含量的原理

测定蛋白质的方法可分为两大类:一类是利用蛋白质的物理化学性质来推算,如密度、折射率、紫外吸收、荧光性等;另一类是利用化学方法来计算,如定氮、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂反应等主要测定方法有:双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、紫外分光光度法、水扬酸比色法、折光法、旋光法、近红外光谱法.目前蛋白质测定