一种适于大鼠牙周膜I型胶原mRNA原位杂交的方法
实验概要本实验方法是选用大鼠为对象建立动物模型，采用地高辛标记的寡核苷酸探针的原位杂交。实验步骤1. 标本制备 选用80只体重为250±20g的雄性Wistar成年大鼠，给大鼠注射过量麻药后，左心室用4％多聚甲醛灌注。解剖出下颌骨，仅保留磨牙区骨段，浸泡于4％多聚甲醛中再固定6小时。将标本移入脱钙液(含0.7g/L EDTA，8mg/L 酒石酸钠钾，0.14g/L 酒石酸钠，99.2ml/L HCL)中4℃保存两周。洗净脱钙液，梯度乙醇脱水，石蜡包埋。每个下颌骨标本切3张组织切片，厚度一律控制为5μm，裱于经硅化处理的玻片上。2. 探针的制备与标记 采用长度为39个碱基的反意义寡核苷酸探针，序列为：5’-GCC GTC TTC AGA GCT GTA AAC GTG GAG GCA AGG AGT CCC-3’。用地高辛寡核苷酸加尾试剂盒将地高辛精11-dUTP标记到寡核苷酸的3’末端。 3. 原位杂交 &n......阅读全文
真核细胞总RNA的制备（Total－RNA－Isolation）1
从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚（dT）纤维素选择分离 mRNA，cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上决定于RNA的质量。RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。快速一步法提取总RNA组织及有核细胞在匀浆过程中
2.3.1－从果蝇胚胎中提取总－RNA－或－poIy(A)－+RNA
试剂、试剂盒0.lmol LNaOH乙醇3mol L 乙酸钠苯酚无 SDS 的结合缓冲液含 SDS 的结合缓冲液TE 缓冲液SEVAG漂白剂（Bleach)含 MgCl2 的 PBS(pH7.2)果蝇勻浆缓冲液实验步骤一 材料与设备1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/V) 乙醇3)3mol/
利用－Marligen－总－RNA－快速纯化系统纯化总－RNA－实验
由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可从各种样品中提取 RNA，且产量和质量非常稳定。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇β-巯基乙醇仪器、耗材转子-定子均化器或类似设备Marligen Rap
用T4－RNA－连接酶连接－RNA－分子
实验材料 T4RNA连接酶 供体RNA 受体RNA 试剂、试剂盒 10XT4RNA连接酶缓冲液
提质粒后有RNA污染，可以加点RNA酶处理吗
实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒，转染细胞没问题。我觉得只要是注意以下2点就可以了：1，注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染，收集菌体沉淀时防止菌液散落，经常用75%的乙醇擦拭手套。2，最后洗脱时最好使用无内毒素的水，我们是用注射用水的。无论是小提还是大提我们都是用的日常型
纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA
实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿，吸出培养液，加 2 ml RNA 提取缓冲液，用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液：变性液，20 mlβ-巯基乙醇，0.144 ml2 mo
利用－Marligen－总－RNA－快速纯化系统纯化总－RNA－实验
试剂、试剂盒 乙醇 β-巯基乙醇 仪器、耗材 转子-定子均化器或类似设备 Marligen Ra
用T4－RNA－连接酶连接－RNA－分子
实验材料 T4RNA连接酶供体RNA受体RNA试剂、试剂盒 10XT4RNA连接酶缓冲液无核酸酶的水FEGRNA酶抑制剂实验步骤 一材料与设备1)10XT4RNA 连接酶缓冲液：50 mmol/LTris (pH7,8)，l0 mmol/L MgCl2，5 mmol/LDTT,1 mmol/L AT
提取质粒还没加Rna酶为何电泳中不见Rna
一般来说，提取质粒所用的试剂盒已经加入了RNase，所以电泳跑胶不会出现RNA条带。即使是采用的人工方法提取，也不可避免的空气中，汗液，唾液等中丰富的RNase的降解。此外，按照你的问题来看，你应该是再提取质粒，提取质粒然后电泳渴望观察到RNA的条带，殊不知质粒分子一般较大，其所用的琼脂糖胶浓度一般
利用－Marligen－总－RNA－快速纯化系统纯化总－RNA－实验
试剂、试剂盒 乙醇β-巯基乙醇仪器、耗材 转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System实验步骤 一、材料1.缓冲液、溶液和试剂乙醇,70%和100%β-巯基乙醇2.特殊设备转子-定子均化器或类似设备3.其他Marligen Rapid Total RNA
重组RNA的定义
中文名称重组RNA英文名称recombinant RNA定 义用人工手段进行了改造和重新组合的RNA。重组RNA可以经重组DNA转录获得，也可以使用专门作用于RNA的酶类(如T4 RNA连接酶、Qβ-RNA复制酶、RNA酶Ⅲ)等工具和技术获得。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（
RNA沉默的作用
植物可利用 PTGS 和 TGS 来抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后会产生大量病毒来源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介导对病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的转录; 而在与植物长期共进化过程中, 病毒编码一个或多个RNA沉
RNA沉默的分类
植物中的RNA沉默根据作用靶标可以分为两类:以RNA为靶标, 使其降解或抑制蛋白翻译, 称为转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing, PTGS);以染色质为靶标, 使其基因启动子或组蛋白甲基化从而抑制 RNA 转录的起始, 称为转录基因沉默(trans
微RNA的作用
人类基因组计划结束后，人们发现编码蛋白质的基因只占总基因组的约2%。而占人类基因组95%的非编码序列竟是产生大量非编码RNA的源泉，这些非编码RNA主要充当调控者的角色，在细胞分化凋亡、生物发育、疾病发生等方面均起重要作用。其实，RNA比DNA更为古老，它组成了地球上最早的生命。生命起源初期，没有由
RNA干扰的简介
RNAi研究取得了突破性进展，被《Science》杂志评为2001年的十大科学进展之一，并名列2002年十大科学进展之首。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。
RNA解旋酶的概念
RNA解旋酶（RNA helicases）是一个包含了与RNA代谢（从翻译起始、核糖体形成、前mRNA拼接和mRNA降解）的许多方面有关的蛋白质家族。
互补RNA的功能
中文名称互补RNA英文名称complementary RNA定 义能与另一条核酸(DNA或RNA)链互补的RNA分子。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞RNA含量检测
实验步骤展开
信使RNA的构成
大肠杆菌的全酶有5个亚基（α2ββ’ωσ），含2个锌。β催化形成磷酸二酯键，β’结合模板，σ亚基称为起始因子，可使RNA聚合酶稳定地结合到启动子上。ββ’ωσ称为核心酶。σ亚基在不同菌种间变动较大，而核心酶比较恒定。酶与不同启动子的结合能力不同，不同启动因子可识别不同的启动子。σ70识别启动子共
RNA干扰功能特点
1.高效性：Elbashir等在研究中发现分别为25 nmol/L与100 nmol/L的起始双链RNA产生的结果是一样的，只是高浓度起始的更有效些。将双链RNA浓度降低到1.5 nmol/L时产生的基因沉默效果变化不大，只有当浓度降低到0.05 nmol/L时，沉默的效果才消失。Holen等也证实
动物RNA提取实验
SV总RNA试剂盒提取法 Trizol试剂提取法 实验方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA
微RNA的概念
微RNA（microRNAs；miRNA，又译小分子RNA）是真核生物中广泛存在的一种长约21到23个核苷酸的RNA分子，可调节其他基因的表达。miRNA来自一些从DNA转录而来，但无法进一步转译成蛋白质的RNA（属于非编码RNA）。miRNA通过与靶信使核糖核酸(mRNA)特异结合，从而抑制转录后
植物RNA提取实验
实验方法原理 独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除，
RNA干扰回复实验
RNA干扰回复实验，主要是为了说明Off-target效应。Off-target效应Off-target effects（脱靶效应）最早由Dharmacon科学家Jackson和他的同事们提出（Fedorov,Y.,et al. "Off-targeting By siRNA Can Induce
转运RNA的功能
主要是携带氨基酸进入核糖体，在mRNA指导下合成蛋白质。即以mRNA为模板，将其中具有密码意义的核苷酸顺序翻译成蛋白质中的氨基酸顺序（见蛋白质的生物合成、核糖体）。tRNA与mRNA是通过反密码子与密码子相互作用而发生关系的。在肽链生成过程中，第一个进入核糖体与mRNA起始密码子结合的tRNA叫起始
互补RNA的定义
中文名称互补RNA英文名称complementary RNA定 义能与另一条核酸(DNA或RNA)链互补的RNA分子。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
RNA组的定义
中文名称RNA组英文名称RNome定 义生物体在特定条件下所拥有的全套非信使RNA(nmRNA)，即非编码RNA(ncRNA)或基因组编码的除信使RNA及其前体(hnRNA)外的全部RNA。主要是非信使小RNA(snmRNA)，包括核仁小RNA、核小RNA、微RNA和干扰小RNA等，广义地说，也包
细胞RNA含量检测
实验步骤 展开
RNA编辑主要类型
①简单编辑，单碱基转变的转录后调节；②插入编辑，插入单个核苷酸或少量核苷酸的丢失，其机制是转录链的跳格；③泛编辑，插入或缺失多个尿嘧啶核苷酸或转录后插入多个胞嘧啶，其机制是编辑序列由外源反义引导RNA（ gRNA）提供，gRNA在编辑体（editosome）核蛋白颗粒中与前编辑mRNA配对，鉴别作为
提取悬浮细胞RNA
提取RNA器械：离心管2支，吸管4个，酒精灯，打火机，记号笔，200ul,1000UL枪，DEPC泡过的枪头EP管，紫外照过的手套。滤纸，DEPC纯水（750ml无水乙醇＋150mlDEPC水,剧烈振荡，使劲的摇晃，直至混匀），氯仿，75％酒精，异丙醇，Trizol，预冷的离心机（两种），EP管架（