骨髓染色体培养同步化操作方案
实验概要本实验介绍了骨髓染色体培养同步化操作方法。实验步骤1. 培养制备 1) 在室温或37±2℃的温度下解冻骨髓细胞染色体同步化套装培养管或培养瓶。 2) 在无菌条件下添加1ml骨髓(加入的量由样本细胞密度决定)至一个试管中或分配5ml瓶装的介质到一个细胞培养瓶中并加入样本。 3) 盖上培养管的盖子。 4) 混合培养管(或培养瓶)中的物质,水平放置(在它的平坦的表面上),并在37±2℃的温度下温育。没有必要添加CO2, 因为该介质的构成就是为关闭系统中最佳的淋巴细胞扩散而设计的。2. 培养同步化 1) 经过48-72小时的培养后,添加0.1ml的溶液A并温育一整夜。 2) 温育后,添加0.1ml的溶液B并温育5小时(没有必要清洗细胞)。 3) 添加20ul秋水仙素(10ug/ml),并在37±2℃的温度下温育60分钟(大约)。如果要获得更多数量的前中期分裂相,可将温育时间减少至15分钟。3. 染色体固定和玻片制备 1) 温育后......阅读全文
细胞培养染色体显示
实验概要掌握细胞培养染色体显示实验方法。实验步骤1. 传代培养细胞染色体显示法 1) 培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。 2) 加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃
细胞培养染色体显示
1) 传代培养细胞染色体显示法1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱继续培养6~10小时处理(
培养细胞染色体显色法
培养细胞染色体显示法1) 传代培养细胞染色体显示法1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱继续培
培养细胞染色体显示法实验——传代培养细胞染色体显示法
实验方法原理培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点,是制备染色体极好的对象。实验材料细胞试剂、试剂盒HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %~90 %汇合单层培养细胞;2. 加
细胞培养染色体显示法
1) 传代培养细胞染色体显示法 1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。 2.加秋水仙素:使用终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱继续培养6
培养细胞染色体显示法实验
实验方法原理 培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点,是制备染色体极好的对象。实验材料 细胞试剂、试剂盒 HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材 酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤 1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %~90 %汇合单层培养细胞;
组织培养细胞染色体制备方法
组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株,多为恶性肿瘤细胞株,且呈贴壁生长,仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态,只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相,所以积水仙素处理的时机及量是染
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备
实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种
传代培养细胞染色体显示法
1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。2.加秋水仙素:使用zui终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱继续培养6~10小时处理(加秋水仙素)。3.采集分裂细
骨髓染色体培养同步化操作方案
建议尝试对样本中包含的有核细胞的数量做一个评估(有核细胞的最佳浓度是1×106个细胞/ml.培养液)一、培養製備1: 在室温或37±2℃的温度下解冻骨髓细胞染色体同步化套装培养管或培养瓶。2: 在无菌条件下添加1ml骨髓(加入的量由样本细胞密度决定)至一个试管中或分配5ml瓶装的介质到一个细胞培养瓶
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料细胞实验步骤1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,离心
骨髓染色体培养同步化操作方案
实验概要本实验介绍了骨髓染色体培养同步化操作方法。实验步骤1. 培养制备 1) 在室温或37±2℃的温度下解冻骨髓细胞染色体同步化套装培养管或培养瓶。 2) 在无菌条件下添加1ml骨髓(加入的量由样本细胞密度决定)至一个试管中或分配5ml瓶装的介质到一个细胞培养瓶中并加入样本。 3) 盖上培养管的盖
传代培养细胞染色体显示法
实验概要 传代培养细胞染色体显示法实验步骤1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料 细胞实验步骤 1. 体外培养的细胞,在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞(传代后24h,圆形发亮的细胞)时,加入秋水仙素溶液,终浓度为0.3μg/ml培养液; 2. 继续培养3h; 3. 胰酶消化收集细胞至离心管; 4. 离心1000转/min,离心10min,去上清; 5. Hanks液洗,
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1
一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2
⑦ 再固定:加固定液8ml,混匀,固定10min。⑧ 离心:同上,吸去上清液。⑨ 制细胞悬液:根据细胞量多少,加入适量固定液,充分混匀,制成细胞悬液。⑩ 滴片:取出预先经冰水浸泡的载玻片,用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片,每片约滴2~3滴细胞悬液,使细胞较好分散。一般每一培养瓶
经培养外周血细胞的染色体制备实验
实验材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐剂的肝素纳.(25U ml) 的注射 器 获取肝素化的全血 试
传代培养细胞染色体显示法步骤
1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。 2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12 小时后,再于37℃温箱继续培养6~10小时处理(加秋水仙素)。 3.
经培养外周血细胞的染色体制备实验
实验材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐剂的肝素纳.(25U ml) 的注射 器获取肝素化的全血试剂、试剂盒 完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清)培养基100 X 植物血凝素氨甲蝶呤 脱氧胸嘧啶核苷秋水仙素氯化钾固定剂仪器、耗材 无菌锥形聚丙烯
经培养外周血细胞的染色体制备实验
尽管从其他细胞也可以制备染色体,但人类外周血白细胞是最容易同步化的,从而可以对其染色体进行高分辨分析。实验材料用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐剂的肝素纳.(25U ml) 的注射 器获取肝素化的全血试剂、试剂盒完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清)
骨髓培养基简化了染色体制备流程
骨髓培养基根据间充质干细胞的生长需要,包含必需和非必需氨基酸、维生素、无机化合物、生长因子、胎牛血清以及其他补给成分。本品非常适用于培养骨髓间充质干细胞,能使人骨髓间充质干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化,能大大缩短细胞培养时间。产品严格无菌,无病毒和支原体,性能稳定。 骨髓培
全血细胞培养染色体技术常用试剂配制
一、国内实验室应用试剂配制(一)培养液(1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。(2)小牛血清商品:成都生物制品厂。(3)植物凝集素(PHA):自制或成品(重庆药检所)。(4)p
羊水细胞培养染色体检查的临床意义
染色体数量异常:如唐氏综合征(21三体综合征)、18三体综合征、13三体综合征、8三体综合征、22三体综合征、先天性睾丸发育不全综合征、XXY综合征、特纳综合征、X三体综合征和多X体综合征等。 染色体结构异常:如4p部分单体综合征、5p部分单体综合征、9p部分三体综合征、9q部分单体综合征、2
羊水细胞培养染色体检查的正常值
染色体总数:46条; 常染色体:22对(序号为1-22); 性染色体::男性为XY,女性为XX; 男性核型:46,XY; 女性核型:46,XX。
全血细胞培养染色体技术常用试剂配制
(一)培养液 (1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。 (2)小牛血清商品 (3)植物凝集素(PHA) (4)pH调整液:5% NaHCO3溶液高压灭
人末梢血微量全血培养染色体显示法
实验概要 人末梢血微量全血培养染色体显示法实验步骤1.培养液准备:取15ml培养瓶数个,每瓶内分别充入5ml培养液(pH 7.2),内含:1640培养液(含10%~15%小牛血清),PHA 0.1ml,青霉素100单位和链霉素100微克/毫升 培养液2.抽血针管准备:取2~5ml针管一
人体外周血淋巴细胞培养及染色体制片
实验概要学习和掌握人体微量血液体外培养制备染色体标本的方法。实验原理人体的1ml 外周血中一般含有约1-3×106个小淋巴细胞,通常它们都处于间期的GO和G1期。在培养条件下给予药物刺激时,经过53-72小时可在培养物中获得大量的有丝分裂细胞,供染色体标本制备和分析之用。这种外周血培养方法是在1
人外周血淋巴细胞的培养及染色体制片实验
实验方法原理外周血是制备动物染色体标本的重要材料之一,但通常情况下哺乳动物的外周血中是没有分裂相的,其他动物如两栖类外周血中也只是偶尔能见到分裂相。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期,在人工离体培养的培养基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴细胞受刺激
人外周血淋巴细胞的培养及染色体制片实验
实验方法原理 外周血是制备动物染色体标本的重要材料之一,但通常情况下哺乳动物的外周血中是没有分裂相的,其他动物如两栖类外周血中也只是偶尔能见到分裂相。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期,在人工离体培养的培养基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴细胞受刺
临床化学检查方法介绍羊水细胞培养染色体检查介绍
羊水细胞培养染色体检查介绍: 由于有害化学物质、X线照射、环境因素影响,高龄妊娠,近亲配婚等,导致妊娠时染色体的数目、形态、结构及结合上发生变异所引起的疾病。羊水细胞的染色体检查,对染色体疾病的产前诊断具有很大的特异性意义。羊水细胞培养染色体检查正常值: 染色体总数:46条; 常染色体:22对