内切酶列表:EnzymesGeneratingBluntEnds
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A; Y = C or T; W = A or T; M = A or C; K = G or T; S = C or G;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, G or T;D = A, G or T;N = G, A, T or C. RecognitionsequenceEnzymeAAT^ATTSspIAGC^GCTEco47IIIAG^CTAluIAGG^CCTEco147IAGT^ACTScaIATTT^AAAT SmiICACGTC(-3/-3)^*BtrICAC^GTGEco72ICACNN^NNGTGOliICAG^CTGPvuIICAYNN^NNRTGMslICCC^GGGS......阅读全文
PfuDNA聚合酶PCR实验方法介绍
General AdvicePCR allows the production of more than 10 million copies of a target DNA sequence from only a few molecules. The sensitivity of this tec
基因工程常用的工具酶1
一、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)1.定义:凡能识别和切割双链DNA分子内特定核苷酸序列的酶,也称为限制酶(restriction enzyme,RE)。2.类型:来自原核生物,有三种类型。Ⅰ型:兼具甲基化修饰和ATP参与的核酸内切酶活性,随机切割。Ⅱ型:大多能
原代神经元培养
Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neurons Solutions and media required:Poly D-lysine/laminin solution - pdfDM/KY - pdfOptim
限制性核酸内切酶及其应用
(一)限制性核酸内切酶的发现当λ(k)噬菌体侵染E.coliB时,由于其DNA中有EcoB核酸酶特异识别的碱基序列,被降解掉。而E.coliB的DNA中虽然也存在这种特异序列,但可在EcoB甲基化酶的作用下,催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)将甲基转移给限制酶识别序列的特定碱基,使之甲基化。 EcoB核
核酸以及核苷酸的基本换算
核酸以及核苷酸的基本换算1.核酸的换算:(1.1) 摩尔数与质量:1 mg 1,000bp DNA = 1.52 pmol1 mg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol1 mg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol1 mg SV40 DNA
Complete-PCR-Guide
In the polymerase chain reaction (PCR), a thermostable DNA polymerase amplifies DNA that is flanked by known sequences. The known sequences correspond
5端RACE升级版
实验概要完成这个RACE需要全套反转录系统,当然选一个好的反转录酶(无RNase H),dUTP,taq酶,Uracil DNA glycosylase ,还有这几条引物: Adapter A AUCUCGAGUUCGCGCCGGAUCC(T) 25 VN cDNA synthesis and ad
PCR产物克隆
PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法,杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单,快速和高效的原因,成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明,并拥有全球TA Cloning商标的ZL权。TA克隆方法(Original TA Cl
DNA微序列技术
· Protocols for Making Drosophila Arrays (Stanford U.)Detailed protocol for making arrays including PCR Amplification of cDNAs for Printing,
TOPO©-快速克隆技术介绍
Topo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit) Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T4连接酶把PCR片断连接到T载体上,而Topo TA Cloning用的是DNA Topoisomerase。 Topoisomerase的用途一般使用
DNA双链末端的概念
中文名称平端英文名称blunt end定 义DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
细胞化学词汇平端
中文名称:平端英文名称:blunt end定 义:DNA双链末端平齐而无突出单链。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
DNA克隆
DNA克隆(主要内容如下)· General Procedure· PCR Cloning· Subcloning· ET Cloning· Vector Preparation· Ligation Re
酶切反应心得
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶的用
酶切反应建议
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶
Fluorescence-Procedures-fortheActin-andTubulin-Cytoskeleton-in-Fixed-Cells2
Formaldehyde FixationFix in 4% formaldehyde (16% stock EM grade) in CBS for 20 minutesRinse in TBSPermeabilize as for methanol fixationProcede as for
细胞周期信号通路相关MRE11A
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
MRE11A基因编码功能及结构描述
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
实体肿瘤检测MRE11基因介绍
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
MRE11A基因突变与药物因子介绍
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
与细胞周期信号通路相关因子介绍MRE11A
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物;该复合物是DNA末端非同源连接所必需的,具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合,在体外利用靠近DN
Dissociation-of-spleen-and-hemopoietic-tissue
You need to buy glass slides with frosted, sandblasted ends (Fisher Scientific, Catalog N. 12-552). Frosting by painting (e.g.Superfrost) should not
MRE11基因编码功能及结构描述
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
DNA损伤修复信号通路相关因子MRE11
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
MRE11基因突变与药物因子介绍
该基因编码一种核蛋白,参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物;该复合物用于dna末端的非同源连接,并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合,这
T载体的制作和应用
Also see DNA Cloning§ Making TA Vector (Crawford Lab)T-vectors are linear-blunt-ended plasmids with a few dT's added on by Taq polymerase.
酶切片断的脱磷实验
实验材料 DNA片段试剂、试剂盒 碱性磷酸酶酚氯仿EDTASDSTE缓冲液电泳缓冲液NH4AC仪器、耗材 离心机恒温设备真空干燥机取液器实验步骤 1. 在实验四所得DNA限制性内切酶片段中加入(1)10×碱性磷酸酶缓冲液 10 μl(2)碱性磷酸酶(0.01 u/pmol ends) 1-2
酶切片断的脱磷实验
基本方案 实验材料 DNA片段 试剂、试剂盒
Harvesting-Hematopoietic-Cells-from-Mice
Materials4 mice from each genotype4 Ly5 miceBuckets with wet ice 3xBucket with dry ice 1xDewar flask with liquid nitrogen100 mL beakers with 95% ethan
酶切片断的脱磷实验基本方案
在对DNA片段的修饰中,脱磷酸化反应是一个重要内容,该反应有碱性磷酸化酶催化,该酶可使线状DNA上去除5'磷酸基团。实验材料DNA片段试剂、试剂盒碱性磷酸酶酚氯仿EDTASDSTE缓冲液电泳缓冲液NH4AC仪器、耗材离心机恒温设备真空干燥机取液器实验步骤1. 在实验四所得DNA限制性内切酶