TOPO©快速克隆技术介绍
Topo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit) Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T4连接酶把PCR片断连接到T载体上,而Topo TA Cloning用的是DNA Topoisomerase。 Topoisomerase的用途一般使用在复制DNA前把超螺旋DNA切割使之解旋后,再连接成线性DNA。 Topo TA克隆即使用Topoisomerase高效连接的特性把含3`A端的PCR扩增片断快速连接到3`T端载体上,整个反应只需五分钟!一般T4连接酶需过夜才能高效连接。Topo TA克隆系统提供Topoisomerase I载体,感受态细胞,SOC培养基等。Topo平端克隆方法和长PCR片断克隆法(Zero Blunt Topo PCR C......阅读全文
TOPO©-快速克隆技术介绍
Topo TA克隆方法(Topo TA Cloning Kit) Topo TA克隆原理与TA克隆一样,唯一不同的是TA克隆用的是T4连接酶把PCR片断连接到T载体上,而Topo TA Cloning用的是DNA Topoisomerase。 Topoisomerase的用途一般使用
PCR产物克隆
PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法,杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单,快速和高效的原因,成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明,并拥有全球TA Cloning商标的ZL权。TA克隆方法(Original TA Cl
上海药物所新型拓扑异构酶抑制剂研究取得新进展
桔霉素三聚体Tricitrinol B结构 拓扑异构酶II(Topo II)抑制剂是一类重要的抗肿瘤药物。目前临床上使用的Topo II抑制剂存在着毒副作用大、易产生耐药性的缺点,而新型Topo II抑制剂的研发因化合物结构类型的局限进展缓慢。极端环境中的微生物因其独特的结构和生理
南开大学973首席JBC发表新成果
四月二十日,国际知名期刊《Journal of Biological Chemistry》在线发表了南开大学、天津中医药大学、泰山医学院和美国纽约州立大学的一项最新研究成果,题为“Regulation of hepatic cholesteryl ester transfer protein e
缩氨基硫脲类抗肿瘤化合物研究取得进展
缩氨基硫脲类化合物因其具有广泛的生物活性,如抗病毒、抗细菌、抗真菌、抗肿瘤活性而引起医药工作者的重视。 中科院上海药物研究所柳红研究员课题组与蒙凌华研究员合作,设计并合成了一系列结构新颖的稠环类氨基硫脲衍生物,并对该系列化合物的抗肿瘤活性和作用机制进行了深入研究。多个化合物
关于抗着丝粒抗体的注意事项和检查过程介绍
一、注意事项 不合宜人群:孕妇,先天性染色体异常的患者。 检查前禁忌:不能服用患有系统性硬化症;局部性硬皮病;系统性硬皮病;胶原沉着病;硬皮症等相关疾病的药物,空腹抽血检查。 检查时要求:注意血清标本不被污染,及时送去检测,和听从医生的要求。 二、检查过程 以HEp-2细胞作底物,用间
关于喜树碱的药理作用介绍
本品是从我国特有的珙桐科植物喜树中提取的一种生物碱。它选择性抑制拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ),与TopoⅠ-DNA形成的复合物结合,稳定此复合物,从而使断裂的DNA链不能重新接合,阻止DNA复制及RNA合成,为细胞周期S期特异性药物,对G0期细胞无作用,对G1、G2与M期细胞有轻微杀伤力。另外,它
免疫组化的意义
意义:标记物--作用--阳性部位--临床意义。免疫组化,是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunoh
融合地形和侧向水分再分配的全球湿度指数研究取得进展
陆地水资源可利用性不仅决定着水文过程的演进,也深刻塑造着生态格局与人类社会的可持续发展。传统全球湿度指数(GHI)基于降水与潜在蒸散的气候平衡,忽略了河流、洪泛与地下水等侧向输水所带来的关键补给。中国科学院成都山地灾害与环境研究所研究团队研究了全球湿度指数(GHI)的改进思路。此前研究提出的
融合地形和侧向水分再分配的全球湿度指数研究取得进展
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陆地水资源可利用性不仅决定着水文过程的演进,也深刻塑造着生态格局与人类社会的可持续发展。传统全球湿度指数(GHI)基于降水与潜在蒸散的气候平衡,忽略了河流、洪泛与地下水等侧向输水所带来的关键补给。 中国科学院成都山地灾害与环境研究所研究团队研究了全球湿度指数(GHI)的改进思路。此前研究提出的
Gateway技术:克隆、表达新方法
Gateway技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外,细菌,酵母,昆虫,或哺乳动物――分析表达一、一种更好的克隆方法Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图1)。这项强大的体外技术大大地简化了基
一种高性能时间分辨荧光微球的制备方法和应用与...2
与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明的时间分辨荧光纳米微球具有荧光强度高、空间位阻效应低、稳定性好等特点,基于该微球开发的时间分辨荧光免疫层析技术,具有检测灵敏度高、线性范围宽、精密度高、样本适用范围光等优点,可实现待测物质的超敏、快速、定量检测和分析。具体实施方式以下结合具体实施例,进一步阐
关于依托泊苷胶囊的药理药动学介绍
1、药理毒理 阻碍DNA topoisomeraseⅡ的作用,与其结合形成稳定的DNA-TopoⅡ-Ep复合物,阻止了其联接DNA链的功能。从而使DNA双链结构断裂,呈断片化,显示明显的杀细胞作用。阻断细胞在G2期。 2、药代动力学 上述DNA-TopoⅡ-Ep复合物是可逆的,杀细胞作用
概述肿瘤细胞多药耐药的产生机制
1、 MDR基因及P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp) MDR基因在人类有二种:MDR1和MDR2,其中MDR1与肿瘤的多药耐药有关,MDR2的功能不清楚,但MDR1和MDR2基因序列具有较高的同源性。人类MDR1基因位于第7号染色体长臂上,含有28个外显子,内含子与外显子交
肿瘤细胞多药耐药的产生机制
1、 MDR基因及P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)MDR基因在人类有二种:MDR1和MDR2,其中MDR1与肿瘤的多药耐药有关,MDR2的功能不清楚,但MDR1和MDR2基因序列具有较高的同源性。人类MDR1基因位于第7号染色体长臂上,含有28个外显子,内含子与外显子交界符合经
伊立替康的药理作用是什么?
伊立替康的药理作用主要是通过抑制DNA拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)来阻止DNA复制和抑制RNA合成,从而对肿瘤细胞产生抑制作用。 伊立替康是一种半合成的水溶性喜树碱类衍生物。它的活性代谢物SN38与TopoⅠ及DNA形成的复合物能引起DNA单链断裂,这一作用是细胞周期S期特异性的,也就是说,它在
SUMOylation-as-a-mechanism-to-modulate-CtBPdependent-gene-responses
Covalent attachment of one eukaryotic protein to another is a prominent posttranslational modification and Ubiquitin is the most familiar of the prote
铬天青s分光光度法测定食品中的微量铀
一、方法要点食品试样灰化后用氢氧化钠和过氧化钠熔融,用正三辛基氧化膦(TOPO)对铀进行萃取分离,可以有效地分离Fe3+、Al3+、Th4+、PO43- 、F-等干扰离子。在pH值为4.8的介质中,溴化十六烷基吡啶(CPB)存在下,铀与铬天青S形成蓝色胶束状络合物,在625nm处测吸光度,铀检出限为
关于注射用盐酸吡柔比星冻干的药理毒理介绍
注射用盐酸吡柔比星冻干为半合成的蒽环类抗癌药,进入细胞核内迅速嵌入DNA核酸碱基对间,干扰转录过程,阻止mRNA合成,抑制DNA聚合酶及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoisomeraseⅡ,TopoⅡ)活性,干扰DNA合成。因本品同时干扰DNA、mRNA合成,在细胞分裂的G2期阻断细胞周期、抑制肿瘤
简述注射用盐酸吡柔比星的药理毒理
注射用盐酸吡柔比星为半合成的蒽环类抗癌药,进入细胞核内迅速嵌入DNA核酸碱基对间,干扰转录过程,阻止mRNA合成,抑制DNA聚合酶及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoisomeraseⅡ,TopoⅡ)活性,干扰DNA合成。因本品同时干扰DNA、mRNA合成,在细胞分裂的G2期阻断细胞周期而抑制肿瘤生长
南开大学长江学者连发3重要成果
南开大学生命科学学院教授、博士生导师韩际宏博士,主要研究方向包括动脉粥样硬化发生发展的机制研究、脂代谢对肺癌发生与转移的影响、中药防治重大 疾病(糖尿病及其并发症、血管重构性疾病)的机理研究,在脂代谢和血管重构方面的研究处于国际领先地位。最近,他带领的研究小组接连在国际学术期刊 《Journal
电子探针和扫描电镜能拍什么样的照片
电子探针和扫描电镜到底能拍啥子样的照片,这些照片能看出样品的物相组成吗?回答是电子探针可拍摄SEM(二次电子照片)、BSE-COMPO(背散射成份像)、BSE-TOPO(背散射凹凸像)、X-ray(特征X射线像)。另外,就是不能够通过这些照片看出物相组成,虽然这些照片(特别是BSE-COMPO)对鉴
首次解析由非洲猪瘟病毒编码的全长II型DNA拓扑异构酶的多构象结构
II型DNA拓扑异构酶是一种普遍存在的酶,在调控双链DNA的拓扑结构中起着关键作用,参与了一系列最基本的DNA代谢过程,包括DNA复制、转录及重组等,并在原核和真核生物中得到了广泛的研究——它们被分类为IIA型(包括gyrase,topo IV和topo II)和IIB型(topo VI),虽然
免疫学实验抗着丝粒抗体介绍
抗着丝粒抗体介绍:ACA 抗着丝点抗体抗着丝点抗体是一种紧附于染色体着丝点的DNA蛋白结合体,在间期细胞上荧光染色型为散在斑点型。在细胞外染色体上着丝点部位呈现一对亮绿荧光。阴性 正常人无此抗体、系统件硬皮病患者血清中,ACA阳性时有较高的特异性,在ACA阳性的患者中CREST综合征(临床表现为软组
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抗着丝粒抗体介绍: ACA 抗着丝点抗体抗着丝点抗体是一种紧附于染色体着丝点的DNA蛋白结合体,在间期细胞上荧光染色型为散在斑点型。在细胞外染色体上着丝点部位呈现一对亮绿荧光。阴性 正常人无此抗体、系统件硬皮病患者血清中,ACA阳性时有较高的特异性,在ACA阳性的患者中CREST综合征(临
临床化学检查方法介绍抗着丝粒抗体介绍
抗着丝粒抗体介绍: ACA 抗着丝点抗体抗着丝点抗体是一种紧附于染色体着丝点的DNA蛋白结合体,在间期细胞上荧光染色型为散在斑点型。在细胞外染色体上着丝点部位呈现一对亮绿荧光。阴性 正常人无此抗体、系统件硬皮病患者血清中,ACA阳性时有较高的特异性,在ACA阳性的患者中CREST综合征(临床表现为
胞内晶体蛋白基因的酿酒酵母真核表达
实验概要本实验将酿酒酵母作为胞内晶体蛋白的携带和表达宿主,同时,作为可能的营养体喂养海洋线虫P. redivivus将所表达的目的蛋白导入线虫机体,观察线虫的生长、发育、繁殖或是死亡情况,探讨胞内晶体蛋白对昆虫病原线虫以外的线虫是否具有营养作用。为此,首先构建一种重组大肠杆菌,其所携带的重组质粒能够
扫描隧道显微镜发明前微观表面形貌检测技术有哪几种
扫描隧道显微镜发明前微观表面形貌检测技术有光成像和对试件表面进行扫描。1、扫描隧道显微镜是用来检测微观形貌的,在其发明以前,就有几种微观形貌检测技术了,只是分辨率较低。表面微观形貌的测量,从原理上可以分为两类。2、第一类是光成像,包括光折射放大成像和光干涉成像,光折射放大成像检测方法的代表是光学显微
关于喜树碱的化合物简介
喜树碱(Camptothecin,CPT),是一种细胞毒性喹啉类生物碱,能抑制DNA拓扑异构酶(TOPO I)。1966年由M.E. Wall和M.C. Wani 通过有系统的筛选天然物质,进而发现的抗癌药物。 喜树碱是从产于中国的喜树(喜树,幸福树)树皮和枝干分离出来,早期为传统中医疗法治疗