Hoechst染色方法

实验概要Hoechst可穿过细胞膜,可结合于活细胞或固定过的细胞。因此可用于活细胞标记。Hoechst染料溶于水和有机溶剂,如二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。浓度可高达10mg/mL。水溶液可在4℃避光保存至少6个月。长期储存于≤-20 ℃。Hoechst与DNA双链中的小沟(minor groove)结合,更倾向与于富含A/T(腺嘌呤/胸腺嘧啶)的DNA链。虽然说它能与所有的核酸结合,但是富含AT的双链DNA使荧光强度显著增强。实验步骤1.贴壁细胞1) 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。2) 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。3)&n......阅读全文

酯酶染色

酯酶是分解各种酯类的水解酶,根据机制的不同,分为非特异性酯酶和特异性酯酶,非特异性酯酶易水解像acetate和butyrate之类具有短链的酯类,特异性酯酶易水解像naphthol AS‐D cholroaceteta之类的具有长链的酯类。单核‐巨噬细胞类为非特异性酯酶反应染色,中性粒细胞类

瑞氏染色中pH对细胞染色的影响

细胞的各大种成分均由蛋白质构成,由于蛋白质是两性电解质,所带正电荷的数量随溶液pH而定。对某一蛋白质而言,如环境pH

细菌形态学染色之革兰氏染色法

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱

关于染色体中期染色质的介绍

  在有丝分裂或减数分裂(细胞分裂)的早期,染色质双螺旋变得越来越浓缩。此时的染色体不再是可以进入的遗传物质(转录停止),而是一种紧凑的可运输的结构,形成经典的四臂结构,一对姐妹染色单体在着丝粒处相互连接。较短的手臂被称为 p 臂,较长的手臂称为 q 手臂 [7] 。这个时期是用光学显微镜观察单个染

铁染色正常血细胞的染色反应有哪些?

  1)细胞外铁:  观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。  2)细胞内铁:  观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细

肌肉组织染色实验——横纹肌组织染色

肌肉组织由肌细胞和肌纤维组成,可分为骨骼肌、心肌和平滑肌。骨骼肌含有横纹,肌纤维被结缔组织连接与包围,纤维成束排列,而每条肌纤维周围含有网状纤维和少贵的结缔组织。心肌纤维也含有横纹,纤维之间相互连接成网状结构。平滑肌纤维的外表面含有网状纤维和胶原纤维成分。根据需要通过不同的特殊染色和组织化学方法,能

细菌染色标本检查常用的染色方法是什么

  细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。  1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、大小及简单的结构,但不能显示各种细菌染色性的差异。  2.复染色法:用两种或两种以上的染料染色的方法,称为复染色法或鉴别染

微生物染色液配制及染色法

2.1 美蓝染色法2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝           0.3g95%乙醇          30mL0.01%氢氧化钾溶液    100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。2.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.

细菌的简单染色(Simple-stain)和革兰氏染色1

虽然各种类型的显微镜能够观察到微生物的各种形态结构,但一般实验室常用的是普通光学显微镜。由于细菌体积小且透明,在活体细胞内又含有大量的水分,因此,对光线的吸收和反射与水溶液相差不大。当把细菌悬浮在水滴内,放在显微镜下观察时,由于与周围背景没有显著的明暗差,难于看清它们的形状,更谈不上识别其细微结构。

给细胞染色的碱性染色剂有哪些

碱性染料电离后染料离子带正电,可与酸性物质结合成盐.1、微生物实验室一般常用的碱性染料有美兰、甲基紫、结晶紫、碱性复红、中性红、孔雀绿和蕃红等,在一般的情况下,细菌易被碱性染料染色。2、细胞内的染色体染色剂有龙胆紫,醋酸洋红;DNA的染色剂有甲基绿、二苯胺等。

肌肉组织染色实验——早期心肌组织病变染色

实验方法原理早期心肌组织病变染色,是 Lie 和 Nagar-Olsen 利用缺氧心肌对酸性复红的亲和力,称为嗜酸性复红染色法;利用其对碱性复红的亲和力,称为亲碱性复红染色法。能够较好地显示心肌缺氧的变化情况。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒苏木精硫酸铝铵黄色氧化汞甘油冰醋酸蒸馏水碱性复红苦味酸纯丙

免疫酶染色试验_细胞免疫酶染色法

细胞免疫酶染色法(以检测血清中 EB 病毒 IgA 抗体为例说明)实验方法原理免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相

革兰氏染色与细菌抗酸染色技术的操作技巧

兰氏染色和抗酸染色都属于细菌形态学检查法,提到革兰氏染色大家肯定都非常熟悉,但是说到抗酸染色你不一定了解。今天我们进入细菌的花花世界,聊一聊细菌界的这两大染色法:  革兰氏染色(Gram stain) 用途:由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立,直到现今,革兰氏染色法仍是细菌学

苏木素染色剂的染色特点和原理

苏木素和伊红在组织学上被经常使用,与碘液不同,这是一种永久染色剂。其他常用的含有苏木素的染色剂有磷钨酸苏木素染色剂,也就是磷钨酸与苏木素的混合物。苏木素染色剂经常为组织的研究使用。 明矾和三价铁盐常常被用作媒染剂,展示核和细胞质结构。这些媒染剂的原理都是形成媒染剂-染料-组织复合体,从而显示颜色。使

微生物常用染色法及染色程序

微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附,且吸附作用稳固;同样,碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化

蛋白质染色实验——考马斯亮蓝染色

蛋白质染色可用于(1)蛋白质的观测(2)蛋白质含量的测定。实验方法原理1. 凝胶中蛋白质的定位可用考马斯亮蓝染料染色或银染色。前者简便且快捷,而银染法具有相当高的灵敏度,能用于检出更少量的蛋白质。2. 蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化,从而改变这些染料的光吸收。在些基础上发展了蛋白

免疫酶染色试验——斑点免疫酶染色法

斑点免疫酶染色法 (dot-ELISA)实验 (以检测轮状病毒抗原为例说明)实验方法原理该技术是进行 ELISA 测定时,借用了免疫印迹技术的某些原理和方法,利用硝酸纤维素膜为固相载体,使抗原抗体反应在膜上进行,结合在硝酸纤维素膜上的酶抗体结合物通过将底物分解成不溶性的产物而沉积,在硝酸纤维素膜上形

抗酸染色法的步骤和染色配制简介

  一、抗酸染色一般步骤  1、初染  用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。  2、脱色  3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。  3、复染  用碱性美兰溶液

微生物染色液配制及染色法

1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色液

免疫酶染色试验_细胞免疫酶染色法

细胞免疫酶染色法(以检测血清中 EB 病毒 IgA 抗体为例说明)实验方法原理免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相

甲苯胺蓝染色剂的染色步骤

(一)1.组织切片常规脱蜡至水。2.入甲苯胺蓝液30min。3.稍水洗。4.入冰醋酸液分化,直到胞核和颗粒清晰。5.稍水洗,用冷风吹干。6.二甲苯透明,中性树胶封固。(二)①切片脱腊至水。②蒸馏水浸洗3次。③0.1%甲苯胺蓝液浸染10min。④水洗,洗去多余染液。⑤各级酒精脱水。⑥二甲苯透明,中性树

细菌的简单染色(Simple-stain)和革兰氏染色2

(3)固定:手执玻片一端,让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜),使细胞质凝固,以固定细菌的形态,并使其不易脱落。但不能在火焰上烤,否则细菌形态将毁坏(4)染色:将固定过的涂片放在废液缸上的搁架上,加复红染色1-2min(5)水洗:用水洗去涂片上的染色液,直至冲下之水无色时为止。(6)干燥

微生物染色液配制及染色法

 1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色

瑞氏染色法:染色方法和注意事项

 瑞氏染色法:染色方法和注意事项是临床检验技师考试的部分内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。   (1)血涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。   (2)冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然

染色体病:结构性染色体畸变

  结构性染色体畸变 这种畸变是在细胞分裂过程中曾有染色体断裂所致。常见的结构异常有缺失、环状染色体、易位、重复、倒位和等臂染色体。  (1)缺失:指染色体丢失一段。即染色体一处断裂,其无着丝粒的一端常丢失,成为末端缺失;染色体两处断裂,可造成中间段的丢失,为中间缺失。由于遗传基因随染色体断片而丢失

细菌染色的基本程序中革兰染色的用途

先干燥就是为了染色时标本不易脱落。固定不仅能杀死细菌,改变细菌对染料的通透性,还能使细菌吸附在玻片上,保持原有的形态结构。媒染其作用是增强染料与细菌的亲和力,更好地加强染料与细胞的结合。常用的媒染剂是碘液。脱色帮助染料从被染色的细胞中脱色。利用细菌对染料脱色的难易程度不同,而将细菌加以区分。革兰阳性

细菌染色的基本程序中革兰染色的用途

先干燥就是为了染色时标本不易脱落。固定不仅能杀死细菌,改变细菌对染料的通透性,还能使细菌吸附在玻片上,保持原有的形态结构。媒染其作用是增强染料与细菌的亲和力,更好地加强染料与细胞的结合。常用的媒染剂是碘液。脱色帮助染料从被染色的细胞中脱色。利用细菌对染料脱色的难易程度不同,而将细菌加以区分。革兰阳性

细菌的芽孢革孔雀绿染色和鞭毛染色

Ⅰ 细菌  芽孢染色 某些细菌在其发育的一定阶段可以形成一个内生孢子,即为芽孢。芽孢形成后并不脱离原细菌菌体,它的形状、大小和在菌体的位置都是一定的。老熟的芽孢可自菌体中脱落出来。芽孢结构上的特点是壁厚和细胞质浓厚,所以不易着色,通常多采用着色力强的染色剂和用加热等手段促使芽孢着色,并利用复

培养细胞的染色实验——苏木精伊红染色法

培养细胞可用各种方法染色,有一般和特殊之分;一般染色为观察细胞一般形态之用,特殊染色为用于观察细胞的特殊成分和结构的染色方法。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。实验材料苏木精试剂、试剂盒甘油冰醋酸伊红铵矾仪器、耗材载玻片盖玻片实验步骤1.  37 ℃温BSS漂洗3 次,每次20 秒~1 分钟;中性

如何区分x染色体与y染色体

  X,Y是相对概念,在核型分析时,配对结束后会有两个形态大小有差异的染色体,较大的是x。也可利用细胞学手段,用基因定位,定位x或y的特有基因。