HighResolutionAgaroseGelElectrophoresis
实验概要Agarose gel electrophoresis remains the most widely used technique for separating nucleic acid fragments due to its ease of use, non-toxicity, and broad separation range. By varying agarose concentration, gel pore size can be controlled to separate nucleic acid molecules in a wide range of sizes. The migration of nucleic acids in agarose gels is affected by the choice of buffer......阅读全文
Immunoprecipitation－Protocol
实验概要Immunoprecipitation is a procedure by which proteins or peptides that react specifically with an antibody are removed from solution and examined
琼脂糖凝胶电泳，做胶加EB目的
在搜搜上找的同一问题的答案：“染色啊。你agarose胶电泳跑DNA，根据大小不同电泳速度不同，可是最后你需要看啊，怎么看呢？可见光下看不见DNA的。所以加EB也好，SYBR green也好，我们实验室用的genefinder也好，都是将DNA染色，用特殊的化学分子与DNA结合，并且在特殊波长的激发
酵母染色体沉淀分析方法
ABSTRACTThis protocol describes a method for the detection of proteins bound to specific regions of chromatin in yeast. There are many variations of t
PCR－protocol
PCR reactionProtocol for 50µl reaction - adjust amounts if necessary, for a 20µl reaction use the same volumes of primer and dNTP-mix, but adjust the
琼脂糖凝胶配方
琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂 糖，琼脂糖的熔点在62〜65°C之间，融化后在37°C下可维持液态数小时，30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的
Electrophoresis－of－PCR－products－with－Sunrise－gel－apparatus
Electrophoresis of PCR products with Life Technologies Sunrise gel apparatusGel: In a 500 ml Pyrex® glass bottle, add:Agarose:3 gH2O270 mls10X TA30 ml
杆状病毒滴度检测
实验概要本实验介绍了检测病毒滴度的方法。实验原理根据噬菌斑数计算病毒滴度。主要试剂1. 4% agarose gel：2g agrose 50ml 水，高压灭菌2. 2×Grace（unsupplemented）：9.14g粉末（invitrogen） 0.07gNaHCO3 H2O，调PH6.
小鼠药物干预后两种蛋白的磷酸化酪氨酸水平检测
小鼠XX细胞药物干预后两种蛋白的磷酸化酪氨酸水平检测 实验分组：小鼠XX细胞，按下面分组进行药物干预培养，并收集细胞进行免疫沉淀实验。 1正常对照组2高糖组3高糖+E药物4高糖+A药物(25μM)5高糖+A药物(50μM)6高糖+A药物(100μM)7高糖+A药物(100μM)+B药物（1mM）8高
甲醛洋菜胶体电泳
实验概要本实验介绍了甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)的操作流程。实验原理甲醛是一种常用的RNA 变性剂，进行电泳时所使用的缓冲液为MOPS (3-[N-morpholino] propanesulfonic acid)。由于r
Competitive－RTPCR－Strategy－for－Quantitative－Evaluation－5
3. Characterization of the method precision and repeatability.a. Ensemble PCRs in the same conditions established before using quantities of target in
如何检测蛋白是否泛素化？
继上周整理的泛素化蛋白快速富集纯化的解决方案后，最近又有客户问“我想在体外检测组织中的一个蛋白是否在处理因素作用后发生泛素化，请问有这方面的实验方法吗，或者试剂盒吗？”作为泛素研究领域的专家，LifeSensors可为您提供全面的泛素研究解决方案，如何鉴定靶蛋白是否发生泛素化修饰？
RNAi实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程
RNAi 实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程，本实验方法来自于加州大学Jim教授实验，很权威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
分析磷酸化蛋白的新方法
蛋白磷酸化是重要的翻译后修饰，在调控基因表达和细胞功能方面起着关键作用。检测磷酸化时一般使用磷酸化抗体。近几年，市场上也出现了一些新的技术和产品，可实现磷酸化的灵敏检测。 Phos-tag™便是其中的一种。它最初由日本广岛大学医药分子功能科学研究室开发，后由Wako公司商业化。P
Zebrafish－whole－mou...
实验概要Whole mount staining of Zebrafish embryos, now commonly used, requires extra steps to fix and permeabilize to ensure the egg membrane is perme
Screen－ES－cells－by－Southern－Blot
Digest DNA in 96-well plateTo each well add:4ul 10Xbuffer4ul Enzyme0.4ul Spermidine(0.4M)31.6ul H2O37‡C 19h, then add 4ul loading dye to each well. Lo
Organelle－DNA－Library－Construction
Organelle DNA Library Construction(version MAY-1998)I. NEBULIZATION of DNA 1. 0.5 - 5 ug DNA in TE (10mM/1mM), 25% glycerol, final volume 500 ul
甲醛洋菜胶体电泳
甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一种常用的RNA 变性剂。在进行甲醛洋菜胶体电泳分析时，必须先配制含有甲醛的洋菜胶体，RNA 也必须先以甲醛及formamide 进行变性处理，以确保其二度结构充分被打开。由于甲醛可能是一种致
细胞支原体污染的PCR检测
支原体菌株来源：M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体M.FermentaneATCC19989 发酵支原体M.SalivariumATCC23064唾液支原体M.HominisATCC23114人型支原体M.OraleATCC23714口腔支原体M.HyorhinisATCC290
细胞支原体污染的PCR检测
支原体菌株来源： M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原体 M.FermentaneATCC19989发酵支原体 M.SalivariumATCC23064唾液支原体 M.HominisATCC23114人型支原体 M.Ora
关于免疫共沉淀的简介
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。免疫共沉淀具有经翻译后修饰的，处于天然状态的优点。 免疫共沉淀（Co -Immunoprecipitation
DNA－labeling－by－nick－translation
DNA labeling by nick translationreagents: DNA for labeling (concentration c > 150 ng/µl) modified nucleotides: Biotin-16-dUTP, Digoxigenin-11-dUTP, co
Factor－Xa－Cleavage－of－MBPFusion－protein
INTRODUCTIONIn many cases the cleavage can be performed using the free intact fusion, or in same cases with the fusion protein bound to a matrix. The
DNA克隆
DNA克隆（主要内容如下）· General Procedure· PCR Cloning· Subcloning· ET Cloning· Vector Preparation· Ligation Re
RLGS－protocol
A. Preparation of DNA SolutionIn the case of rice, for example This method may be appllicable for many grass species and some other plants.
PCR产物纯化方法
Purification of PCR Products in Preparation for CloningJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid
甲醛洋菜胶体电泳实验
实验方法原理 rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后，呈现于胶体上的两个主要RNA色带应该分别是large 与small rRNAs （真核生物为28S 与18S,原核生物为23S 与16S）；散布于small rRNA 附近，呈淡淡smear
甲醛洋菜胶体电泳实验
甲醛洋菜胶体电泳 （formaldehyde-agarose gel electrophoresis）甲醛是一种常用的RNA 变性剂。用于（1）RNA的分离测定（2）RNA提纯。实验方法原理rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后，呈现于胶体上的两个主要R
重组DNA的分离、克隆与测序实验手册4
H. Fragment purification on Sephacryl S-500 spin columnsDNA fragments larger than a few hundred base pairs can be separated from smaller fragments by
PCR的下游应用
· Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products (Robert H. Cruickshank)· Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products (Immunology Resourc
DNA测序方法鸟枪法的操作步骤
“鸟枪法”是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段，继而将这些片段与适当的载体结合，将重组DNA转入受体菌扩增，获得无性繁殖的基因文库，再结合筛选方法，从众多的转化子菌株中选出含有某