酵母染色体沉淀分析方法
ABSTRACTThis protocol describes a method for the detection of proteins bound to specific regions of chromatin in yeast. There are many variations of this assay. MATERIALS Reagents Antibody of choice (see Step 21) DOC buffer Tris-Cl (10 mM, pH 8.0)LiCl (0.25 M)NP-40 (0.5%)Deoxycholate (DOC) (0.5%)EDTA (1 mM)Dry ice Ethanol (100% [ice cold], 70%) Glycine (2.5 M)Bring to pH 8.0 w......阅读全文
酵母染色体沉淀分析方法
ABSTRACTThis protocol describes a method for the detection of proteins bound to specific regions of chromatin in yeast. There are many variations of t
酵母人工染色体的标记方法
YAC 载体的选择标记主要采用营养缺陷型基因，如色氨酸、亮氨酸和组氨酸合成缺陷型基因 trp 1、 leu 2和 his 3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等，以及赭石突变抑制基因 sup4 。与 YAC 载体配套工作的宿主酵母菌（如AB1380）的胸腺嘧啶合成基因带有一个赭石突变ade 2-1。
酵母人工染色体
· Easy YAC Preparation Method (Andrew Davies,Shaw lab)· Screening YAC libraries (Donis Keller Lab)This is a method for screening YAC l
Nature：构造酵母染色体
合成生物学的目标之一就是构建那些复杂的人工合成有机体。目前，在酵母细胞中已经取得了阶段性的进展——采用分段式方法，研究者已经可以将整个酵母染色体转化成为合成序列了。 生物细胞其实很像是一台计算机——基因组可以比作软件，它负责对细胞的构成进行编码，细胞器则犹如计算机的硬件，负责读取并运行软件的
沉淀分离方法分析过程
沉淀分离方法是指利用沉淀反应实现组分分离的化学方法。在分析化学中常通过沉淀反应将欲测组分分离出来；或者把共存组分沉淀下来，以清除它们对欲测组分的干扰。根据沉淀剂的性质和沉淀的过程又分为：①无机沉淀剂分离法，例如用SO42-为沉淀剂分离Ba2+离子，用S2-为沉淀剂分离Zn2+离子。②有机沉淀剂分离法
酵母人工染色体的应用
直到 20 世纪 80 年代中期，尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前，如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究，该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理直到 20 世纪 80 年代
酵母人工染色体的简介
酵母人工染色体（Yeast artificial chromosomes,简称YAC）,是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体,含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列,是细胞内具有遗传性质的物体,易被碱性染料染成深色,所以叫染色体（染色质）。其本质是脱氧核苷酸,是细胞核内由核蛋白
酵母人工染色体的应用
实验方法原理 直到 20 世纪 80 年代中期，尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前，如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究，该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。实验材料 酿酒酵母试剂、试剂盒 甘油仪器、耗材 脉冲场凝胶电泳仪选择性培养
酵母人工染色体的应用
实验方法原理 直到 20 世纪 80 年代中期，尚无技术可用于基因组 DNA 黏性大片段的分离、扩增和分析。在此之前，如果要对某一 DNA 片段进行详细的物理和功能研究，该 DNA 的长度应能够装入 λ 噬菌体颗粒或黏粒载体。
酵母人工染色体的工作原理
YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库，特别用来构建高等真核生物的基因组文库，并不用作常规的基因克隆。当用BamHⅠ切割成线状后，就形成了一个微型酵母染色体，包含染色体复制的必要顺式元件，如自主复制序列、着丝粒和位于两端的端粒。这些元件在酵母菌中可以驱动染色体的复制和分配，从而决定这个微型染
酵母人工染色体的工作原理
YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库，特别用来构建高等真核生物的基因组文库，并不用作常规的基因克隆。图3-26是 pYAC4 的遗传结构图，当用BamHⅠ切割成线状后，就形成了一个微型酵母染色体，包含染色体复制的必要顺式元件，如自主复制序列、着丝粒和位于两端的端粒。这些元件在酵母菌中可以驱
染色体核型分析方法
镜下选择染色体分散适度(不过于分散和相互重叠)，染色体长短合适，染色清晰的分裂相，在油镜下观察。 1.计数 将一个细胞中的全部染色体按其自然位置划成几个小区，为了防止重数或漏数，可按其镜下形态画出简图然后计数，确定有无数目异常。人类正常体细胞2n=46，其中常染色体22对，性染色体1对，正常
酵母人工染色体的概念和本质
酵母人工染色体（Yeast artificial chromosomes，简称YAC），是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体，含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列，是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，所以叫染色体（染色质）。其本质是脱氧核苷酸，是细胞核内由核蛋白组成
简述酵母人工染色体的工作原理
YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库,特别用来构建高等真核生物的基因组文库,并不用作常规的基因克隆。图3-26是 pYAC4 的遗传结构图,当用BamHⅠ切割成线状后,就形成了一个微型酵母染色体,包含染色体复制的必要顺式元件,如自主复制序列、着丝粒和位于两端的端粒。这些元件在酵母菌中可
酵母人工染色体标记基因的介绍
在 YAC载体中最常用的是 pYAC4 。由于酵母的染色体是线状的,因此其在工作状态也是线状的。但是,为了方便制备YAC载体, YAC 载体以环状的方式存在,并增加了普通大肠杆菌质粒载体的复制元件和选择标记,以便保存和增殖。 1、复制元件 YAC 载体的复制元件是其核心组成成分,其在酵母中复
染色体核型分析的分析方法介绍
镜下选择染色体分散适度(不过于分散和相互重叠)，染色体长短合适，染色清晰的分裂相，在油镜下观察。 1、计数 将一个细胞中的全部染色体按其自然位置划成几个小区，为了防止重数或漏数，可按其镜下形态画出简图然后计数，确定有无数目异常。人类正常体细胞2n=46，其中常染色体22对，性染色体1对，正常
科学家首次成功合成酵母染色体
由美、英、法等多国研究人员组成的科研小组27日宣布，他们成功合成了第一条能正常工作的酵母染色体。这一成果被誉为攀上了合成生物学的新高峰，也是向合成人造微生物等生命体迈出的一大步。 研究人员在新一期《科学》杂志上报告说，他们利用计算机辅助设计技术，历时7年成功构造了源于酿酒酵母的被称作ｓｙｎ
酵母人工染色体的结构特征和本质
酵母人工染色体（Yeast artificial chromosomes，简称YAC），是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体，含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列，是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，所以叫染色体（染色质）。其本质是脱氧核苷酸，是细胞核内由核蛋白组成
TCA沉淀方法
培养基上清直接电泳跑出来的条带经常很难看，可以TCA沉淀浓缩后跑电泳，一般表达量大于1mg/ml可以看到明显条带，这是我用的TCA沉淀方法，效果很好：1.菌液10000g,离心5分钟，收集表达上清。2.取500-1000ul上清于EP管中，加入1/9体积的100％TCA，颠倒10次混匀。3.样品置于
酵母遗传学方法7：随机孢子分析
随机孢子分析1）孢子形成1．挑已形成孢子的二倍体单菌落接种在YPD平板上，尽可能把细胞涂薄一些，在30℃下培养12～16小时，超过16小时将明显降低孢子的形成率。2．上午，用一个无菌壳板钉取相当一火柴头量的细胞，转到含有2.5ml产孢培养基试管中，在25℃下旋转振荡培养。3．用光学显微镜检测孢子形成
骨髓染色体分析方法——快速法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度
Chem－Soc－Rev综述酿酒酵母染色体人工合成的技术和方法
DNA测序技术的迅猛发展，使得我们可以比以往任何时候都更加方便地“阅读”生物体的遗传编码序列，但是很多复杂生命信息很难单纯通过DNA测序获知，如果能够人工合成染色体，实现DNA认知从“阅读时代”到“书写时代”的转变，将有助于对复杂生命现象的理解。近日Chem Soc Rev杂志刊登了天津大学元英
简述酵母人工染色体的现实意义
酿酒酵母是第一个被全基因组测序的真核生物,大尺度的设计和重建酵母基因组是对目前酵母领域知识贮备的真实性、完整性和准确性的一个直接考验。化学合成酵母,一方面可以帮助人类更深刻地理解一些基础生物学的问题,另一方面可以通过基因组重排系统,使酵母实现快速进化,得到在医药、能源、环境、农业、工业等领域有重
酵母遗传学方法12：酵母菌落PCR方法
酵母菌落PCR方法1．在冰上配制反应混合液：2μl 10×菌落PCR缓冲液1.2μl 25mmol/L MgCl20.4μl 10mmol/L dNTPs10pmol 引物
染色体核型分析的方法有哪些
染色体核型分析技术，传统上是观察染色体形态，近年来，采用荧光原位杂交技术，将荧光素标记的探针进行染色体核型特定位点的检测和标记，可以精确地检测染色体上DNA链中，单个碱基的突变，从而大大提高了染色体核型分析的精度。
酵母遗传学方法8：酵母活体染色
酵母活体染色1）核DNA和线粒体DNA1．当细胞培养到约107细胞/ml时，离心（5秒）收集细胞，再悬浮在70％乙醇中。2．固定5分钟或5分钟以上，用水洗2次。3．将细胞悬浮在含有50ng/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚的封固剂中。1mg/ml的4，6-二脒基-2苯基吲哚母液可在－20℃下贮存。4
化学分析方法——沉淀滴定银量法
一、沉淀滴定法的定义与反应要求沉淀滴定法是以沉淀反应为基础的一种滴定分析方法。其对沉淀反应的要求有以下几点：1、沉淀反应必须迅速，并按一定的化学计量关系进行；2、生成的沉淀应具有恒定的组成，而且溶解度必须很小；3、有确定化学计量点的简单方法；4、沉淀的吸附现象不影响滴定终点的确定。二、银量法的定义、
化学分析方法——沉淀滴定银量法
一、沉淀滴定法的定义与反应要求沉淀滴定法是以沉淀反应为基础的一种滴定分析方法。其对沉淀反应的要求有以下几点：1、沉淀反应必须迅速，并按一定的化学计量关系进行；2、生成的沉淀应具有恒定的组成，而且溶解度必须很小；3、有确定化学计量点的简单方法；4、沉淀的吸附现象不影响滴定终点的确定。二、银量法的定义、
分步沉淀的方法
分步沉淀是指在一定条件下，使一种离子先沉淀，而其他离子在另一条件下沉淀的现象。浸铜后渣硫酸盐分离沉淀过程是按银、铜、镍的先后顺序进行析出的。因此要实现其分离，简单可行的方法是将这些金属离子转化成钠盐或碳酸盐的沉淀。
单染色体酵母作业毕业申请海外博士后
昨天凌晨刚在英国 《自然》杂志发表领先世界的合成生物学成果，中国科学院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所合成生物学重点实验室覃重军研究员就在媒体面前流露出内心焦虑：论文的第一作者、掌握了自己学术思想和实验关键技术的博士生邵洋洋正在申请海外博士后，其中就包括此次与他们同时发表类似论文的美