最全面的MTT相关技巧大汇总
(一)实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。2.药物浓度的设定。一定要多看文献,参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则,可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。3. 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值,输入excel表,最后得到不同时间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显)。4.培养时间。200ul的......阅读全文
MTT比色法实验原理、步骤及注意事项
实验概要MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT比色法,是一种检
MTT比色法实验原理、步骤及注意事项
实验概要 MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT
MTT比色法实验原理、步骤及注意事项
实验概要MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。本实验介绍了MTT比色法,是一种检
pbs咪唑配方
pbs咪唑配方:卵磷脂与胆固醇比例为8比1,其中卵磷脂0.08g、胆固醇0.01g,姜黄素含量为0.1mgpbs用量30ml。甲巯咪唑片的配方药物成分是甲巯咪唑,是用于甲状腺功能亢进的药物治疗,尤其适用于不伴有或伴有轻度甲状腺增大。
筛选pⅧ噬菌粒库
实验概要大量的方法已经被设计用于筛选大规模的噬菌体肽库。其中最简单的形式就是使用直接吸附的方式将靶分子固定于一个固体支持物上,然后使其接触到噬菌体库。那些不能与之结合的噬菌体在一系列洗涤的过程中将会被除去,而可以结合的噬菌体克隆将在酸性洗脱后被重新获得。主要试剂1. 磷酸盐缓冲液2. PBS/0.1
mtt的实验方法
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MT
mtt的实验方法
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MT
血浆中C5a的ELISA测定
实验概要C5活化是过敏毒素释放和膜攻击杀伤细胞机制的开始。C5活化后产生C5a和C5b两个片段,C5a被血清羧肽酶N裂解成无活性的C5a-desarg。C5a对中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞及巨噬细胞有趋化作用,并参与初次免疫应答,控制抗体合成和感染的发生及发展。因此检测C5裂解产物对临床监视病
血浆中C5a的ELISA测定
实验概要C5活化是过敏毒素释放和膜攻击杀伤细胞机制的开始。C5活化后产生C5a和C5b两个片段,C5a被血清羧肽酶N裂解成无活性的C5a-desarg。C5a对中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞及巨噬细胞有趋化作用,并参与初次免疫应答,控制抗体合成和感染的发生及发展。因此检测C5裂解产物对临床监视病
ELISPOT技术原理及实验方法介绍
ELISPOT技术原理 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官
ELISPOT技术原理及实验方法介绍
ELISPOT技术原理 随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合
ELISPOT技术原理及实验方法
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗体及
ELISPOT技术原理及实验方法介绍
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用,使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,而不能确切的反映体内的抗
贴壁细胞mtt试验原理及方法步骤
MTT原理MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的
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MTT原理MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的
MTT(噻唑蓝)的染色原理及使用方法
MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检
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免疫沉淀
免疫沉淀是利用特异性抗体识别并分离抗原的方法。材料:上样buffer的配方(用前现配):2ul 1.25M Tris-HCL , pH 6.835ul distilled water2.5ul 2-mercaptoethanol12.5ul 10%SD
免疫沉淀(Immunoprecipitation)实验材料和方法
免疫沉淀是利用特异性抗体识别并分离抗原的方法。材料:上样buffer的配方(用前现配):2ul 1.25M Tris-HCL , pH 6.835ul distilled water2.5ul 2-mercaptoethanol12.5ul 10%SDS10ul 80% glycerol2ul br
96孔板每孔体积
6孔板底面积9.6cm2,加培养液的量2.5ml, 12孔板底面积4.5cm2,加培养液的量2ml, 24孔板底面积2cm2,加培养液的量1ml, 96孔板底面积0.32cm2,加培养液的量0.1ml,
MTT原理和注意事项
MTT原理 MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di -phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。 MTT比色法,是一种检测细胞
6孔板每孔可以养80万细胞吗
可以。正常情况下,六孔板的每个孔长满可以有100万个细胞,所以每个孔可以养80万细胞。六孔板是一种用于细胞培育的六孔板,包括板体和培养盖,所述板体上设置有六个培养孔,所述培养盖套装在所述板体的顶部,相邻的两个所述培养孔的侧壁上均设置有隔离机构。
6孔板每孔可以养80万细胞吗
可以。正常情况下,六孔板的每个孔长满可以有100万个细胞,所以每个孔可以养80万细胞。六孔板是一种用于细胞培育的六孔板,包括板体和培养盖,所述板体上设置有六个培养孔,所述培养盖套装在所述板体的顶部,相邻的两个所述培养孔的侧壁上均设置有隔离机构。
最全面的MTT相关技巧大汇总
(一)实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细
杂交瘤技术基本程序与方法8
(3)间接血凝试验 间接血凝试验又称被动血凝试验(PHA),是目前应用较广的检测方法之一。本试验是以包被可溶性抗原的红细胞作为指示系统,当被检抗体与包被在红细胞上的抗原产生特异性反应时,导致红细胞呈凝集现象。可见,该法具有灵敏、快速、容易操作和无需昂贵仪器等优点,而且经改用醛化红细胞以后,克服原来重
噬菌体抗体ELISA
实验概要噬菌体ELISA是一种快速而便捷的方法,尤其是因为pⅧ有多拷贝会导致信号的扩增。主要试剂1. 2%MPBS2. PBS/Tween3. 辣根过氧化物酶(HRP)标记的小鼠抗噬菌体单克隆抗体(mAb)(Amer Sham BiOSCiences)4. 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)
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可溶性SCFv在微量滴定板中的ElISA实验
实验概要本实验首先在微量滴定板中表达可溶性SCFv,然后取上清液进行ElISA实验。主要试剂1. 含100ug/ml氨苄青霉素和0.1%葡萄糖的2XTY培养基(2 ×TY/amp/0.1%glu)2. 含100ug/ml氨苄青霉素和3mmol/L IPTG的2XTY培养基(2×TY/amp/glu/
可溶性SCFv在微量滴定板中的ElIS...
实验概要本实验首先在微量滴定板中表达可溶性SCFv,然后取上清液进行ElISA实验。主要试剂1. 含100ug/ml氨苄青霉素和0.1%葡萄糖的2XTY培养基(2 ×TY/amp/0.1%glu)2. 含100ug/ml氨苄青霉素和3mmol/L IPTG的2XTY培养基(2×TY/amp/glu/