可溶性SCFv在微量滴定板中的ElIS...
实验概要本实验首先在微量滴定板中表达可溶性SCFv，然后取上清液进行ElISA实验。主要试剂1. 含100ug/ml氨苄青霉素和0.1％葡萄糖的2XTY培养基(2 ×TY/amp/0.1％glu)2. 含100ug/ml氨苄青霉素和3mmol/L IPTG的2XTY培养基(2×TY/amp/glu/IPTG)3. 9E10单抗(SantaCruzBiotech)4. PBS5. PBS／0.1％Tween 20(PBS／Tween)6. 4％MPBS7. 抗小鼠HRP标记抗体主要设备用于细菌培养的96孔圆底微量滴定板实验材料噬菌体样品，含有抗体片段的上清实验步骤1．用96孔无菌转移设备或移液器从主板中，每孔取2ul；而后转移至1个每孔含有100ul 2×TY/amp/0.1％glu的无菌96孔微量滴定板中。2．将孔板在37℃振荡孵育，直到A600值约为0.9(通常需2～3小时)。3．每孔加50ul 2XTY/amp/glu/IP......阅读全文
在微量滴定板中进行可溶性SCFv－ElISA
在微量滴定板中进行可溶性SCFv ElISA [器材和试剂] ● 9E10单抗(SantaCruzBiotech) ● ● ／0．1％Tween 20(／Tween) ● 4％M ● 抗小鼠HRP标记抗体(例如Sigma目录号A2554)
可溶性SCFv在微量滴定板中的ElIS...
实验概要本实验首先在微量滴定板中表达可溶性SCFv，然后取上清液进行ElISA实验。主要试剂1. 含100ug/ml氨苄青霉素和0.1％葡萄糖的2XTY培养基(2 ×TY/amp/0.1％glu)2. 含100ug/ml氨苄青霉素和3mmol/L IPTG的2XTY培养基(2×TY/amp/glu/
可溶性SCFv在微量滴定板中的ElISA实验
实验概要本实验首先在微量滴定板中表达可溶性SCFv，然后取上清液进行ElISA实验。主要试剂1. 含100ug/ml氨苄青霉素和0.1％葡萄糖的2XTY培养基(2 ×TY/amp/0.1％glu)2. 含100ug/ml氨苄青霉素和3mmol/L IPTG的2XTY培养基(2×TY/amp/glu/
筛选解离速率优化的scFv
选择3~5轮后，随机挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并诱导表达可溶性scFv.然后，在包被有相关抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的细菌上清。此过程可以识别出那些结合了抗原的scFv.但即便采用上述严谨性选择后，ELISA阳性克隆中仅有部分克隆的亲和力比野生型高。ELISA
筛选解离速率优化的scFv
选择3~5轮后，随机挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并诱导表达可溶性scFv.然后，在包被有相关抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的细菌上清。此过程可以识别出那些结合了抗原的scFv.但即便采用上述严谨性选择后，ELISA阳性克隆中仅有部分克隆的亲和力比野生型高。ELI
靶向FGFR3胞外区域的人scFv抗体的筛选和活性研究（二）
噬菌体ELISA使用0.3ug的FGFR3，FGFR1或者人IgG蛋白包被微孔板，洗涤，封闭，加入不同浓度前面筛选纯化后的噬菌体悬浮液。孵育后，加入HRP-抗M13抗体，加入底物显色，450nm读取结果。 单克隆噬菌体ELISA经过两轮或三轮的筛选后收获的噬菌体经过培养生长出克隆，然后使用QPix高
筛选解离速率优化的单链抗体（scFv）
选择3~5轮后，随机挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并诱导表达可溶性scFv.然后，在包被有相关抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的细菌上清。此过程可以识别出那些结合了抗原的scFv.但即便采用上述严谨性选择后，ELISA阳性克隆中仅有部分克隆的亲和力比野生型高。ELI
靶向FGFR3胞外区域的人scFv抗体的筛选和活性研究（三）
scFv抗体对RT112细胞表达的FGFR3的活性：使用FACS检测了scFvs和膀胱癌RT112细胞表达的天然FGFR3蛋白的结合活性。如图3A所以，首先检测了6个scFvs噬菌体克隆，6个克隆都可以和膀胱癌RT112细胞发生显著的反应。然后，检测纯化后的4个scFvs蛋白(3B，3C，2D，7D
用突变的VlCDR3构建SCFv基因文库
实验概要本实验用突变的VlCDR3构建了SCFv基因文库。主要试剂1. 去离子水(Millipore)2. VentDNA聚合酶和缓冲液(NEB)3. 20XdNTP(每种浓度5mmol/L)(NEB)4. 琼脂糖胶盒5. Geneclean试剂盒(QbiOgene)6. 含有起始scFv基因的质粒
惊！CART竟可以逆转TGFβ免疫抑制作用
以往的CART都是识别结合表达于肿瘤细胞表面的抗原，此次整理分享的文章，作者设计了识别可溶性抗原的CART细胞，并对CART激活过程中CAR在结构层面的变化进行了研究，具体内容如下： 可溶性的CD19能激活CD19 CART细胞（CD69表达上调、细胞因子生成增多） 电泳发现CD19以单体和
CART逆转TGFβ免疫抑制作用
以往的CART都是识别结合表达于肿瘤细胞表面的抗原，此次整理分享的文章，作者设计了识别可溶性抗原的CART细胞，并对CART激活过程中CAR在结构层面的变化进行了研究，具体内容如下： 可溶性的CD19能激活CD19 CART细胞（CD69表达上调、细胞因子生成增多） 电泳发现CD19以单体和
土壤可溶性盐类含量
可溶性盐类主要由阳离子Na+、Ca2+、Mg2+和阴离子Cl-、、组成。区内土壤因成土时间、地貌及海潮侵袭等因素，表层含盐量有不同差异。从样品分析数据来看，区内表层土壤中含盐量在0.041%～8.18%之间，平均为1.769%。为展示表层土壤中盐化程度的自然赋存状态，根据全国第二次土壤普查土壤盐化分
PCR剪接VHCDR3基因文库和VL基因构建scFv基因文库
[器材和试剂]Winard PCR纯化试剂盒 （Promega）PCR试剂和设备用于连接scFv和pHENl DNA以及将scFv文库电转化到大肠杆菌TGl株的试剂和设备 FDSEQ引物扩增的VHCDR3基因文库和VL基因，[方法]1. 配制4个25ulPCR反应液，包含：去离子水，10.25ul1
靶向FGFR3胞外区域的人scFv抗体的筛选和活性研究（一）
成纤维细胞生长因子(FGF)是最大的一类中胚层和上皮细胞生长分化多肽因子家族。FGFs在许多生物学过程中发挥重要作用，比如胚胎发育，伤口愈合，血细胞生成及血管发生等。此外，已有研究表明FGFs可以增加多种肿瘤细胞的浸润性，如前列腺、膀胱、肾脏、乳房、胰腺等部位肿瘤。目前，共发现20多种FGFs，对不
PCR剪接VHCDR3基因文库和VL基因构建scFv基因文库
[器材和试剂]Winard PCR纯化试剂盒 （Promega）PCR试剂和设备用于连接scFv和pHENl DNA以及将scFv文库电转化到大肠杆菌TGl株的试剂和设备 FDSEQ引物扩增的VHCDR3基因文库和VL基因，[方法]1. 配制4个25ulPCR反应液，包含：去离子水，10.25ul1
苯酚法测定可溶性糖
【原理】植物体内的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10～100μg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的
可溶性膳食纤维的来源
来源于果胶、藻胶、魔芋等。魔芋盛产于我国四川等地，主要成分为葡甘聚糖，是一种可溶性膳食纤维，能量很低，吸水性强。很多研究表明，魔芋有降血脂和降血糖的作用及良好的通便作用；可溶性纤维在胃肠道内和淀粉等碳水化合物交织在一起，并延缓后者的吸收，故可以起到降低餐后血糖的作用；
苯酚法测定可溶性糖
【原理】植物体内的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10～100μg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化
可溶性膳食纤维的概念
来源于果胶、藻胶、魔芋等。魔芋盛产于我国四川等地，主要成分为葡甘聚糖，是一种可溶性膳食纤维，能量很低，吸水性强。很多研究表明，魔芋有降血脂和降血糖的作用及良好的通便作用；可溶性纤维在胃肠道内和淀粉等碳水化合物交织在一起，并延缓后者的吸收，故可以起到降低餐后血糖的作用；
苯酚法测定可溶性糖
【原理】植物体内的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10～100μg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的
关于可溶性淀粉的介绍
可溶性淀粉(solublestarch)，是淀粉经过氧化剂、酸、甘油、酶或其他方法处理而成的淀粉衍生物。用玉米、红薯、土豆的淀粉都可制成可溶性淀粉，但以红薯淀粉制得的可溶性淀粉质量最好。可溶性淀粉为白色或类白色粉末，无臭无味，不溶于冷水、乙醇和乙醚。在沸水中可溶解为透明溶液，冷却后不结冰，1%溶
可溶性膳食纤维如何检测
样品+稀酸1%，V/V（加热）→淀粉，果胶物质溶解除去→加稀碱10%W/V→蛋白质、脂肪溶解除去→加乙醇→溶解除去单宁、色素和剩余脂肪、蛋白质→沉淀物扣除灰分→纤维
植物体内可溶性蛋白和非可溶性蛋白含量的测定实验
实验方法原理植物材料经Tris－HCl缓冲液研磨、离心后，可溶性蛋白质溶于上清液中，非可溶性蛋白则存在于沉淀部分。将沉淀用碱水解，则会得到非可溶性蛋白的提取液。蛋白质提取液与考马斯亮蓝G－250反应呈蓝色。在一定范围内，蛋白质的含量与反应液在595nm波长的吸光度呈正比，由此可求出蛋白质的含量。实验
植物体内可溶性蛋白和非可溶性蛋白含量的测定实验
实验方法原理植物材料经Tris－HCl缓冲液研磨、离心后，可溶性蛋白质溶于上清液中，非可溶性蛋白则存在于沉淀部分。将沉淀用碱水解，则会得到非可溶性蛋白的提取液。蛋白质提取液与考马斯亮蓝G－250反应呈蓝色。在一定范围内，蛋白质的含量与反应液在595nm波长的吸光度呈正比，由此可求出蛋白质的含量。实验
植物体内可溶性蛋白和非可溶性蛋白含量的测定实验
实验方法原理 植物材料经Tris－HCl缓冲液研磨、离心后，可溶性蛋白质溶于上清液中，非可溶性蛋白则存在于沉淀部分。将沉淀用碱水解，则会得到非可溶性蛋白的提取液。蛋白质提取液与考马斯亮蓝G－250反应呈蓝色。在一定范围内，蛋白质的含量与反应液在595nm波长的吸光度呈正比，由此可求出蛋白质的含量。实
用苯酚法测可溶性糖
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不可溶性膳食纤维的来源
最佳来源是全谷类粮食，其中包括麦麸、麦片、全麦粉及糙米、燕麦全谷类食物、豆类、蔬菜和水果等。不可溶性纤维对人体的作用首先在于促进胃肠道蠕动，加快食物通过胃肠道，减少吸收，另外不可溶性纤维在大肠中吸收水分软化大便，可以起到防治便秘的作用。
植物可溶性糖含量的测定
可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的果树作物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。因此，可溶性糖的定量研究对果树的品质育种具有重要意义。
关于可溶性抗原的基本介绍
在病毒的抗原抗体反应中，并不是整个的病毒粒子，而是有更小的粒子的抗原参与反应，这种更小的粒子的抗原称为可溶性抗原。例如流行性感冒感染时，细胞中可出现10纳米大小的可溶性抗原。可溶性抗原虽然是在感染过程中于细胞内产生的，但是在病毒粒子的组分中有时也包含它。
植物可溶性糖含量的测定
可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的果树作物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。因此，可溶性糖的定量研究对果树的品质育种具有重要意义。一、试材及用具1．