原位末端转移酶标记技术检测凋亡
（一）原理凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后，将DNA切割成许多双链DNA片段以及高分子量DNA单链断裂点（缺口），暴露出大量3-羟基末端，如用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）将标记的dUTP进行缺口末端标记，则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。（二）荧光标记法1．材料与试剂 采用德国Boehringer-Mannheim公司In Situ Cell Death Detection 试剂盒，或美国Oncor公司ApopTagTM试剂盒，包括：⑴生物素标记的-Dutp(Biotin-dUTP)或地高辛标记的-dUTP(Digoxingeningll-dUTP)１nmol/µl⑵ TdT酶（25U/μl）⑶ 反应缓冲液⑷ 洗涤缓冲液⑸ 异硫氰酸荧光素（FITC）标记的亲合素或链霉亲合素（2.5µg/ml）或抗地高辛抗体（1︰30）⑹ PI染液（含PI 5µg/ml......阅读全文
细胞凋亡检测
实验概要细胞凋亡是细胞生物学研究的重要领域。检测药物或某种处理对于细胞细胞的影响时，细胞凋亡检测是一个重要检测指标。以Annexin V联合PI法为例简述细胞凋亡检测。实验原理在细胞凋亡早期，位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）迁移至细胞膜外侧。磷脂结合蛋白V（
细胞凋亡实验
细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death，PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自主结束生命的死亡方式。凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通过研究大鼠肝左叶细胞死亡时，
流式细胞仪检测实验_TUNEL组织切面中的凋亡细胞原位杂交
实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% （m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐（TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛（digo×igenin下同）-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级
流式细胞仪检测实验TUNEL组织切面的凋亡细胞的原位杂交
实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% （m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐（TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛（digo×igenin下同）-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级
细胞凋亡检测实验——细胞凋亡的形态学检测
实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实验步骤一、光学显微镜和倒置显微镜1. 未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形，细胞膜完整但出现发泡现象，细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞
检测细胞凋亡的实验方法比较
◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法 细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端
检测细胞凋亡的实验方法比较
◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较 TUNEL法 细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'
常用细胞凋亡检测方法集锦
细胞凋亡的形态学检测1 光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形
常用细胞凋亡检测方法集锦
细胞凋亡的形态学检测1 光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形
简述细胞凋亡检测
细胞凋亡在胚胎发育、造血、免疫系统的成熟以及维护正常组织和器官的细胞恒定与生长平衡，乃至机体衰老方面都起着重要作用。因此，有关凋亡的研究在临床和基础等各个领域已经广泛开展,凋亡细胞的检测方法显得非常重要。流式细胞仪( Flow cytometry ,FCM) 将流体喷射技术、激光光学技术、电子技
细胞凋亡的检测
早早期细胞凋亡检测（半胱氨酸蛋白酶3法） 早期细胞凋亡检测（磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法） 早期细胞凋亡检测（细胞线粒体膜蛋白法） 早期细胞凋亡检测（Hoechst-PI染色法） 晚期细胞凋亡检测（TUNEL法） 晚晚期
细胞凋亡的检测
早期细胞凋亡检测（Hoechst-PI染色法）实验步骤展开晚期细胞凋亡检测（TUNEL法）实验步骤晚晚期细胞凋亡检测（DNA含量分析法）实验步骤展开
细胞凋亡的检测
早早期细胞凋亡检测（半胱氨酸蛋白酶3法） 早期细胞凋亡检测（磷脂结合蛋白Annexin-V/PI法） 早期细胞凋亡检测（细胞线粒体膜蛋白法） 早期细胞凋亡检测（Hoechst-PI染色法） 晚期细胞凋亡检测（TUNEL法） 晚晚期
细胞凋亡检测方法
细胞发生凋亡时，不同区域内（如细胞膜、细胞浆、线粒体、细胞核等）会发生不同的生理生化改变。因此，针对不同区域的细胞凋亡检测要采用不同的方法。1）Annexin V 凋亡检测原理：Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca依赖性磷脂结合蛋白，正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphatidyl
细胞凋亡检测方法
细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式，根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别，可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多，下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征，人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1 光学显微镜和倒
细胞凋亡mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，它们
细胞凋亡检测实验
实验方法原理 细胞凋亡或称程序性细胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是细胞的生命现象之一，它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关，自身免疫性疾病和
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
细胞凋亡检测实验
荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性检测法
什么是原位检测？
在检测中，经常听到原位检测，常见于岩土工程其实就是：在实地尽量对土体少的扰动，现场进行的一项检测，以尽可能的取得较为准确的测量数据。
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答－(1)
问：R&amD Systems有分装试剂吗？答：没有分装试剂。R&amD Systems公司不会分装，也没有授权任何公司进行分装。目前市场上所谓的“RD分装试剂”是没有品质保证的3无产品，R&amD Systems公司不承担任何“RD分装试剂”的售后服务。在此，建议广大客户和经销商从R&am
细胞凋亡的分子生物学检测方法(1)
[实验原理]细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程，染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ²+和Mg²+依赖的核酸内切酶作用下，在核小体单位之间被随机切断，形成180～200bp核小体DNA多聚体。DNA
简化细胞凋亡研究的工具
有许多凋亡触发器，其中包括某些细胞因子，蛋白质 - 蛋白质相互作用和化学品。一旦开始凋亡，线粒体膜电位变化，可以测量通过流式细胞仪使用BD：MitoScreen（JC-1）流式细胞仪检测试剂盒。 线粒体膜电位导致线粒体膜通透性增加，并释放出可溶性蛋白，如细胞色素C和亲半胱天冬酶的增加。 半胱天冬
TUNEL检测的基本原理介绍
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfe
TUNEL检测的实验原理
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfera
简述TUNEL检测的原理
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfe
TUNEL检测的原理
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfera
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，它们
几种检测凋亡的方法
一、形态学观察方法（一）HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。（二）丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。（三）台盼蓝染色：如果细胞膜
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因，检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道，Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells）等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X （长） 作为抗凋亡（bcl-2 和bcl-X）的调节物，它们