细胞生物基本方法：常规组织培养法
常规组织培养法1）初代消化培养法1. 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2. 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3. 处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4. 剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。5. 消化：或用恒温水......阅读全文
细胞生物基本方法：常规组织培养法
常规组织培养法1）初代消化培养法1. 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2. 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3. 处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染
常规组织培养法
一、初代消化培养法1、 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3、 处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分
细胞生物基本方法：特殊培养法
特殊培养法1）二倍体细胞培养法二倍体细胞培养法与一般培养相同，关键在于传代，其传代程序为：1. 吸除旧培养液注入另瓶中。2. 用温BSS冲洗1次。3. 用0.25%温胰蛋白酶消化，加入消化液量以仅覆盖细胞层即可；作用1~5分钟。4. 待细胞附着松动、细胞质边缘
常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与...
常规组织培养法:初代消化培养法、初代组织块培养法与传代培养法 1）初代消化培养法： 1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液
传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法
一、初代消化培养法 1、 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污;如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的
组织培养细胞生物学
组织培养细胞生物学 细胞在体外培养后，如一切条件适宜，便可生存和进行生命活动，如移动等，但zui主要的是生长和增殖。生长和增殖并非同一概念，细胞生长指的是：细胞体积增大，而细胞增殖是细胞数量增多。体外培养细胞来源于体内，其基本细胞生物学规律和体内相同。但随生活环境的改变，很多方面如形态结构和增殖规律
细胞生物基本方法：复苏
复苏方法1．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。3．剪开纱布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，
传代细胞－组织培养细胞生物学
传代细胞 组织培养细胞生物学 细胞在体外培养后，如一切条件适宜，便可生存和进行生命活动，如移动等，但zui主要的是生长和增殖。生长和增殖并非同一概念，细胞生长指的是：细胞体积增大，而细胞增殖是细胞数量增多。体外培养细胞来源于体内，其基本细胞生物学规律和体内相同。但随生活环境的改变，很多方面如形态结构
病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养
实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法，其优点是①经济适用，结果正确且敏感；②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法，是指动物（包括脊椎动物和无脊椎动物）的组织自机体取出后，经胰酶或其他细胞分散剂消化处理，得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中，加入细胞生长所必需的营养液，置合
细胞生物基本方法：常用转化细胞
几种常用转化细胞和转化技术1）致癌化学物转化细胞：转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验1．取材：妊娠后第13天取材，取数个同窝胚胎，去头和内脏，在无菌条件下剪碎至米粒大小，再用0.25％胰蛋白酶（含0.01％EDTA）37℃消化30分钟，滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入1875p
细胞生物基本方法：冻存
冻存方法1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×106/ml，离心去上清，吸入离心管中。3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬
细胞生物基本方法：肿瘤细胞培养
肿瘤细胞培养特殊之处在于成纤维细胞的排除（成纤维细胞常与肿瘤细胞同时混杂生长，致难以纯化肿瘤组织）。有以下一些方法：1．机械刮除法2．反复帖壁法3．消化排除法4．胶原酶消化法 1） 机械刮除法1．标记：镜下观察，用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。2．刮除：弃掉培养液，把无菌胶刮伸入
细胞培养常规方法
. 冻存细胞的复苏应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。2. 传代:对于贴壁细胞
常规细胞培养方法
原理 1 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱
细胞生物基本方法：上皮细胞培养
上皮细胞培养1）表皮细胞培养1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。2．EDTA处理：先置入0.02％EDTA中室温置5分钟。3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。5．
组织培养细胞染色体制备方法
组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株，多为恶性肿瘤细胞株，且呈贴壁生长，仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态，只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相，所以积水仙素处理的时机及量是染
常规培养细胞计数、保存、运输等法
细胞悬液制备后，要计算所含的细胞数量。一般以细胞数/毫升表示。用品：细胞悬液 培养液 计数板程序用酒精冲洗计数板后 擦净，将盖片覆在计算板上，微微移向一侧，以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶，轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液，使其充满计数板和盖片间的空隙中注意：勿使液体漫过盖片或出现
常规培养细胞计数、保存、运输等法
程序用酒精冲洗计数板后 擦净，将盖片覆在计算板上，微微移向一侧，以便滴加细胞悬液.取一吸管伸入培养瓶，轻轻吸打细胞悬液混匀。从盖片边缘滴加细胞悬液，使其充满计数板和盖片间的空隙中注意：勿使液体漫过盖片或出现气泡。镜下观察计数 计算计数板的四角大格内的细胞数，压线者只计算左侧和上方的,右和下的不计算在
组织培养HOS肿瘤细胞生物学特性
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置，首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是多的。另外肿瘤对人类是威胁大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正常细
细胞生物基本方法：微生物污染的排除
微生物污染的排除细胞受各种霉菌、细菌和支原体污染后，一般都较难排除或杀灭，其中以支原体更难排除，因此从预防着眼为上。 1） 抗生素除菌法：用BM－1（截耳素衍生物）和BM－2（四环素衍生物）抑制支原体1．抗生素制备：均可用PBS配成250×浓缩液－20℃备用，使用浓度参考《组织培养和分子细胞学技术
细胞生物基本方法：肌组织细胞培养
肌组织细胞培养1）骨骼肌细胞培养1．杀死动物，无菌取大腿肌组织，切成0.3～0.5厘米小块。2．用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，无菌纱网或纱布滤过，合成培养基加10％小牛血清培养，为促进分化可加1％的胎汁。3．细胞接种量为2×106/皿，接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化
细胞生物基本方法：神经组织细胞培养
神经组织细胞培养1．获取脑组织后，先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍的Hanks液中，脑组织比较柔软，反复吹打即可制成细胞悬液。2．为排除脂肪成分和其它碎块，把悬液注入离心管中，在室温直立5～10分钟后，细胞或细胞团块自然下沉，脂肪等杂物易漂浮于悬液表
常规无损检测法之涡流探伤方法
涡流探伤是由交流电流产生的交变磁场作用于待探伤的导电材料，感应出电涡流。如果材料中有缺陷，它将干扰所产生的电涡流，即形成干扰信号。用涡流探伤仪检测出其干扰信号，就可知道缺陷的状况。影响涡流的因素很多，即是说涡流中载有丰富的信号，这些信号与材料的很多因素有关，如何将其中有用的信号从诸多的信号中一一分离
常规无损检测法之渗透探伤方法
渗透探伤方法(PT)渗透探伤是利用毛细现象来进行探伤的方法。对于表面光滑而清洁的零部件，用一种带色（常为红色）或带有荧光的、渗透性很强的液体，涂覆于待探零部件的表面。若表面有肉眼不能直接察知的微裂纹，由于该液体的渗透性很强，它将沿着裂纹渗透到其根部。然后将表面的渗透液洗去，再涂上对比度较大的显示液（
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切：用眼科剪把
常规细胞培养初代消化培养法
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切：用眼科剪把
细胞生物基本方法：结缔组织类细胞培养
结缔组织类细胞培养1）成纤维细胞培养用人或动物胚体为好；动物可用小鼠或鸡胚，去头和内脏，剪成小碎块后，用胰蛋白酶消化法培养；如为人胚，可取皮肤培养。幼儿包皮是培养成纤维细胞的很好对象。 2） 巨噬细胞培养1．实验前三天，向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤1ml（勿注入肠内）。2．引颈杀死动物，手
植物细胞组织培养
实验概要植物细胞和组织培养的技术性强，要求无菌操作，通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术，加深对无菌操作的了解。实验原理植物的全能性：植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，称为植物的全能性。植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物组织培养按其原始意义
植物细胞组织培养
一．实验目的植物细胞和组织培养的技术性强，要求无菌操作，通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术，加深对无菌操作的了解。二．实验原理植物的全能性：植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，称为植物的全能性。植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌植物培养的一门技术。植物组织培养按其
植物细胞组织培养
实验目的 植物细胞和组织培养的技术性强，要求无菌操作，通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术，加深对无菌操作的了解。 二．实验原理 植物的全能性：植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力，称为植物的全能性。 植物组织培养就是利用植物的全能性进行离