细胞生物基本方法:常规组织培养法

常规组织培养法1)初代消化培养法1. 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2. 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3. 处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4. 剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。5. 消化:或用恒温水......阅读全文

常规无损检测法之射线探伤方法(RT)

射线探伤是利用射线的穿透性和直线性来探伤的方法。这些射线虽然不会像可见光那样凭肉眼就能直接察知,但它可使照相底片感光,也可用特殊的接收器来接收。常用于探伤的射线有x光和同位素发出的γ射线,分别称为x光探伤和γ射线探伤。当这些射线穿过(照射)物质时,该物质的密度越大,射线强度减弱得越多,即射线能穿透过

组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养3

5.其它方法:有人发现聚丙烯酰胺有抑制成纤维细胞生长的作用;也有人用聚蔗糖制备成比重1.025~1.085的密度梯度离心液,加入细胞悬液后,在 23℃中800g离心 10分种。在比重1.025~1.050层为成纤维细胞,在比重1.050~1.085层为上皮细胞,再经过分离进行培养。最近也有人

组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养1

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。 一、组织培养肿瘤细胞生物学特性 肿瘤

组织培养肿瘤细胞生物学特性和肿瘤细胞细胞系的培养2

2.培养基: 肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,一般常用的 RPMIl640、  DMEM、Mc-Coy5A等培养基等皆可用于肿瘤细胞培养。肿瘤细胞对血清的需求比正常细胞低,正常细胞培养不加血清不能生长,肿瘤细胞在低血清培养基中也能生长。肿瘤细胞对培养环境适应性较大,是因肿瘤细胞有自泌(Aut

常规无损检测法之磁粉探伤方法(MT)

磁粉探伤是建立在漏磁原理基础上的一种磁力探伤方法。当磁力线穿过铁磁材料及其制品时,在其(磁性)不连续处将产生漏磁场,形成磁极。此时撒上干磁粉或浇上磁悬液,磁极就会吸附磁粉,产生用肉眼能直接观察的明显磁痕。因此,可借助于该磁痕来显示铁磁材而是埋藏在表面下几毫米的近表面缺陷。用这种方法虽然也能探查气孔、

生物接触氧化法的基本特点

  1、由于填料比表面积大,池内充氧条件良好,池内单位容积的生物固体量较高,因此,生物接触氧化池具有较高的容积负荷;  2、由于生物接触氧化池内生物固体量多,水流完全混合,故对水质水量的骤变有较强的适应能力;  3、剩余污泥量少,不存在污泥膨胀问题,运行管理简便。  生物接触氧化法具有生物膜法的基本

常规无损检测法之超声波探伤方法(UT)

人们的耳朵能直接接收到的声波的频率范围通常是20Hz到20kHz,即音(声)频。频率低于20 Hz的称为次声波,高于20 kHz的称为超声波。工业上常用数兆赫兹超声波来探伤。超声波频率高,则传播的直线性强,又易于在固体中传播,并且遇到两种不同介质形成的界面时易于反射,这样就可以用它来探伤。通

面粉白度常规测定方法与仪器法的比较

面粉品质从可以从消费者以及生产者的角度来进行划分,其划分的依据以及原理均是不一样,在生产者那边划分的原理是以湿面筋含量为主要依据,其测定原理是通过使用面筋测定仪来进行操作的,而以消费者角度而言其判断依据是以面粉的粉色来进行判断的,因为消费者无法进行查看面筋含量,而注重的是感官品质,消费者的认知是面粉

植物组织培养的培养方法

1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。2、试管组织培养试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培瓶等器皿中在无菌

植物组织培养材料与方法

从低等的藻类到苔藓、蕨类、种子植物等高等植物的各类、各部分都可采用作为组织培养的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韧皮部细胞,被子植物采用胚、胚乳、子叶、幼苗、茎尖、根、茎、叶、花药、花粉、子房和胚珠等各个部分。由于植物在自然条件下,表面常被霉菌和细菌污染,故材料必须进行灭菌处理。一般用漂白粉溶液(

粪便常规检查(直接涂片法)

1. 实验原理:本实验是利用肉眼观察粪便的颜色和性状,以及利用粪便生理盐水涂片在显微镜下观察涂片中是否有虫卵、幼虫、各种细胞、包囊、结晶等。2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备:无须特殊准备。2.2 标本种类:粪便2.3 标本要求:标本应取自粪便的不同部位特别是病理性改变比较明显的部位。3. 标

病理学的研究方法之组织培养与细胞培养

  将某种组织或单细胞用适宜的培养基在体外加以培养,以观察细胞、组织病变的发生发展、如肿瘤的生长、细胞的癌变、病毒的复制、染色体的变异等等。此外,也可以对其施加诸如射线、药物等外来因子,以观察其对细胞、组织的影响等。这种方法的优点是,可以较方便地在体外观察研究各种疾病或病变过程,研究加以影响的方法,

微生物酯酶的常规分离纯化方法介绍

1超滤 超滤是利用压力或离心力,使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜而使大分子溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分子物质得到了部分的纯化,根据蛋白质分子大小的不同而选择不同分子量的膜上,以达到浓缩和脱盐的目的,从而使蛋白质得到分离。  2盐析法  盐析一般是指溶液中加入无机盐类,蛋白质在低盐

动物细胞与组织培养的定义

中文名称动物细胞与组织培养英文名称culture of animal cell and tissue定  义从动物体内取出细胞或组织,模拟体内的生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,使离体细胞或组织生存、生长并维持结构和功能的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

细胞因子生物学检测法

  生物学检测又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。由于各种细胞因子具有不同的活性,例如IL-2促进淋巴细胞增殖,TNF杀伤肿瘤细胞,CSF刺激造血细胞集落形成,IFN保护细胞免受病毒攻击,因此选择某一细胞因子独特的生物活性,即可对其进行检测。生物活性检测法又可分为以下几类:

简介植物组织培养的培养方法

  1、非试管微组织快繁  非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。  2、试管组织培养  试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培

植物组织培养培养方法的特点

1、培养条件可以人为控制组培采用的植物材料完全是在人为提供的培养基和小气候环境条件下进行生长,摆脱了大自然中四季、昼夜的变化以及灾害性气候的不利影响,且条件均一,对植物生长极为有利,便于稳定地进行周年培养生产。2、生长周期短,繁殖率高组培是由于人为控制培养条件,根据不同植物不同部位的不同要求而提供不

微生物常规鉴定技术

  微生物常规鉴定技术  一、形态结构和培养特性观察  1、微生物的形态结构观察主要是通过染色,在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察,直观地了解细菌在形态结构上特性,根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。  

微生物常规鉴定技术

一、形态结构和培养特性观察 1、微生物的形态结构观察主要是通过染色,在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察,直观地了解细菌在形态结构上特性,根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。2、细菌细胞在固体培养基表面形成

微生物常规鉴定技术

微生物常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察 1、微生物的形态结构观察主要是通过染色,在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察,直观地了解细菌在形态结构上特性,根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。2、细菌细胞在

细胞培养常规操作

常规操作(主要内容如下)·         Aseptic Technique·         Culture Vessels·         Cell Counting·         Primary Culture·         Maintenance of Cell Line ·  

细胞因子依赖纯化法基本介绍

  人和动物组织中某些细胞需要有特殊的细胞因子存在的微环境才能长期存活和生长繁殖,如IL-2是T细胞生长所必需的细胞因子,BCGF是B细胞的生长因子,体外培养中淋巴细胞若加入IL-2就可使T细胞生长繁殖,形成IL-2依赖的T细胞系,如CTLL-2细胞株,而其他细胞则自然被淘汰,采用此法还建

凝胶渗透色谱法相对于常规净化方法的优点

常规的净化方法消耗有机溶剂量大,操作过程较为烦琐,分析误差较大。如对于含油脂较高的样品(如玉米、芝麻),采用常规的液-液萃取或固相萃取等方法不能将油脂彻底除去。GPC 分离样品的过程是一个物理过程,能够很好地分离蛋白质、色素、脂肪等大分子物质和农药等小分子物质。并且 GPC 的有机溶剂消耗量正随着柱

测定药物稳定性的常规试验方法经典恒温法

为了明确影响药物原材料稳定的条件,为生产条件的设定、包装材料的选择以及贮藏的环境等提供参考依据,需要开展药物稳定性试验研究。经典恒温法是一种测定药物稳定性的常规试验方法,对于水溶性药物制剂的试验效果显著。然而经典恒温法测定有效期为预测的有效期,需与留样观察的结果对照,才能确定药品的真实有效期。药物稳

微生物细胞的显微直接计数法

(一)实验目的 了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法,用显微镜直接测定微生物总细胞数。  (二)实验原理   测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和稀释平板计数法。   直接计数法适用于各种单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质,则难于直接测定。菌体较大

植物组织培养中常用灭菌方法(二)

4、不耐热的物质采用过滤灭菌一些生长调节剂,如赤霉素、玉米素、脱落酸和某些微生物是不耐热的,不能用高压灭菌处理,通常采用过滤灭菌方法。一些化学成分在高温高压下会发生降解而失去效能或降低效能。经高温灭菌后赤霉素GA3的活性仅及不经高温灭菌的新鲜溶液的10%。蔗糖经高温后部分被降解成d-葡萄糖和d-果糖

植物组织培养中常用灭菌方法(一)

常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类,即:物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料

关于组织培养技术的培养方法介绍

  1、非试管微组织快繁  非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。  2、试管组织培养  试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培

关于生物免疫细胞治疗的基本介绍

  生物免疫细胞治疗通过体外培养、增殖、激活,回输体内即可诱导自体抗病毒免疫应答,人体抗病毒免疫一旦被激活就会源源不断产生抗病毒的物质杀灭病毒。有杀伤肿瘤细胞作用的T细胞经激活后在体内大多数变为记忆细胞储存在淋巴组织内,为彻底清除肿瘤细胞和防治转移复发提供了长期保护。   由于疗法涉及到机体免疫功

食品中常见有害微生物的常规检验方法分析

  【摘要】由于受到经济利益的驱使,食品安全事故频发,对人们的生活和生命健康构成了严重的威胁,食品安全已经成为社会广泛关注的话题。在食品中含有着多种有害微生物,这就需要采用一定的方法进行检验,但是传统的检验方法需要耗费大量的人力和物力,且检验周期长、效果低,因此需要将高新的技术应用于食品的微生物检验