ELISA竞争抑制法存在的操作问题

两对半使用ELISA方法,其中HBsAg、HBsAb、HBeAg使用双抗原/抗体夹心法检测,而HBcAb、HBeAb使用竞争抑制法检测。而竞争抑制法的原理:酶标抗体与样本抗体在同样的体系中,与固相抗原竞争结合是等比关系。原论上讲,应该先将样本与酶标抗体先行混匀,然后加入反应也进行。但实际工作中并非如此,都是分开加入反应孔。这样会造成先加入的先结合,与后加入者并不是公平的关系,因而也不符合等比原则。特别是在放置时间长,且温度高的情况下,对结果有很大的影响。 第二军医大学长海医院对此造成的影响进行了研究。将阴性标本94份并用生理盐水进行1:30稀释,在加入标本后按下表时间放置后再加入酶标抗体,然后检测结果如下:放置时间(min)阴性标本数临界值-标本A450nm值假阳性率(%)<0.30.3~0.7>0.70751036026813767.4565......阅读全文

关于甲基橙的工业制法介绍

  1、由对氨基苯磺酸经重氮化后与N,N-二甲基苯胺反应而得。将对氨基磺酸溶解于2.5%的碳酸钠溶液中,加入亚硝酸钠,待完全溶解后,加入碎冰和盐酸进行重氮化反应,析出重氮盐结晶。向重氮盐溶液中加入N,N-二甲基苯胺和冰醋酸的混合液,搅拌10min后慢慢加入10%氢氧化钠溶液至碱性。冷却结晶,过滤,用

关于甲基橙的实验制法介绍

  【药品及用量】  对氨基苯磺酸 2.1g(0.01mol)、亚硝酸钠 0.8g(0.11mol)、N,N-二甲基苯胺 1.2g(1.3mL,0.01mol)  【实验操作】  1.重氮盐的制备(重氮化反应)  在烧杯中放入对氨基苯磺酸,10mL 5%氢氧化钠溶液,温热使溶。另取一小试管,将0.8

偏光显微镜岩石切片制法

 岩石为了要在偏光显微镜下观察,首先必须够「薄」,薄到光线可以穿透标本,一般的标准薄片厚度为30 μm,相当于0.003公分。由于光线透过矿物时的速度因种类的不同而异,因此,我们可以利用矿物本身的光学特性,作为矿物鉴定的一项重要依据。实验室制作薄片除了靠灵巧的双手外,还需要依赖精密的仪器作辅助,才能

支链淀粉酶的制法用途

制法 由产气克雷伯氏杆菌(Klebsiella aerogenes)在受控发酵条件下制备而成。用途 糖、蜂蜜、谷物、淀粉和饮料加工中除杂水解。

木瓜蛋白酶制法用途

制法 由木瓜(Carica papaya)的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。用途 酶制剂。主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的混浊)、肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化)、谷类预煮的准备、水解蛋白质的生产。在啤酒抗寒和肉类

菠萝蛋白酶的制法用途

制法 由菠萝(Ananas comosus和A.bracteatus)果实及茎(主要利用其外皮)经压榨提取、盐析(或丙酮、乙 醇沉淀)再分离、干燥而得。用途 酶制剂。主要用于啤酒抗寒(水解啤酒中的蛋白质,避免冷藏后引起的混浊);肉类软化(水解肌肉蛋白和胶原蛋白,使肉类嫩化);谷类预煮准备;水解蛋白质

葡萄糖异构酶的制法

制法 由凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、橄榄色链霉菌(Streptomyces olivaceus)、密苏里放线菌(Actinoplanes missouriensis)、橄榄色素链霉菌(Streptomyces olivochromogenes)、紫黑链霉菌(Streptom

甲基橙的实验室制法

实验室制法【药品及用量】对氨基苯磺酸 2.1g(0.01mol)、亚硝酸钠 0.8g(0.11mol)、N,N-二甲基苯胺 1.2g(1.3mL,0.01mol)【实验操作】1.重氮盐的制备(重氮化反应)甲基橙和其与待测溶液反应变色(1张)在烧杯中放入对氨基苯磺酸,10mL 5%氢氧化钠溶液,温热使

抑素的结构特点

抑素是成熟的和分化的细胞产生的蛋白质,抑制DNA合成、原始细胞分裂,具有组织特异性,但无种属特异性。从淋巴细胞、粒细胞、成纤维细胞得到的抑素是分子量30 000~50 000的糖蛋白,而从红细胞和肝细胞得到的抑素是分子量约2000的多肽。

O/129抑菌试验

  (1)原理:O/129(二氨基喋啶)对弧菌属细菌有抑制作用,而对气单胞菌属无抑制作用。  (2)碱性琼脂平板。  (3)方法:用棉拭子将待检菌菌悬液均匀涂布于碱性琼脂平板上,将O/129诊断纸片(含药40μg/片)贴于平板上,置35℃孵育18~24h,观察结果。  (4)结果:出现抑菌环为敏感,

抑素的主要种类

分卵泡抑素、生长抑素、鳕鱼抑素、雌抑素、胰抑素、肠抑素、铬抑素、胱抑素、角鲨抑素等几种。

血管抑素的定义

中文名称血管抑素英文名称angiostatin定  义纤维蛋白溶酶原的水解产物,有较强的血管生成抑制活性。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临床免疫(二级学科),肿瘤免疫(三级学科)

溶菌酶的抑菌机理

溶菌酶能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖,其水解位点是N-乙酰胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子间的β-1.4糖苷键。肽聚糖是细菌细胞壁的主要成份,它是由NAM、NAG和肽“尾”(由4个氨基酸残基)组成,NAM与NAG通过β-1.4糖苷键相连,肽“尾”则是通过D-乳酰羧

抑癌基因的分类

迄今科学家已从细胞中分离鉴定出大约100余种抑癌基因,最常见的如Rb、P53、APC、nm23等基因。Rb基因(视网膜母细胞瘤基因)是第一个分离获得的抑癌基因。正常人都有完整的Rb基因,Rb基因的部分缺失,可引起视网膜母细胞瘤(成视网膜细胞瘤)及结肠癌等多种癌症。1.根据是否有突变,分为突变型和野生

什么是抑癌基因?

所谓抑癌基因是指那些具有在发挥正常功能条件下就可以抑制肿瘤的发生的一类基因,它们的缺失或失活会导致细胞增殖的失控或癌变,主要包括p15、p16、p18基因等,主要在细胞周期运行的调控方面发挥作用。

溶菌酶的抑菌机理

溶菌酶能有效地水解细菌细胞壁的肽聚糖,其水解位点是N-乙酰胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙酰葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子间的β-1.4糖苷键。肽聚糖是细菌细胞壁的主要成份,它是由NAM、NAG和肽“尾”(由4个氨基酸残基)组成,NAM与NAG通过β-1.4糖苷键相连,肽“尾”则是通过D-乳酰羧

抑癌基因的特点

抑癌基因(tumor suppressor genes),也称肿瘤抑制基因,或俗称抗癌基因,是一类存在于正常细胞内可抑制细胞生长并具有潜在抑癌作用的基因。抑癌基因在控制细胞生长、增殖及分化过程中起着十分重要的负调节作用,它与原癌基因相互制约,维持正负调节信号的相对稳定。当这类基因在发生突变、缺失或失

环保抑尘剂种类

本产品为液体抑尘剂,极易稀释,因此非常便于使用。与粉状抑尘剂相比,由于使用时不需要搅拌设备,因此对使用者而言将节省一笔可观的设备投资;由于不需要粉状抑尘剂溶解时要花费长时间搅拌,因此节省了时间、减少了劳动强度,提高了工作效率。与煤堆上通常使用的防风网相比,本产品形成的抑尘壳防煤扬尘的效果更好,成本更

抑素的主要作用

主要作用在细胞周期的G1后阶段和丝裂前的G2期,还延长丝裂期和丝裂后成熟期。可见抑素不仅抑制细胞分裂,还延缓衰老过程,增加细胞的预期寿命。抑素在调控体内物质代谢、组织再生和创伤愈合中起重要作用,不仅作用于正常细胞也作用于恶变的癌细胞。临床上用于抗癌和抑制器官移植的排斥反应。一类具有类似激素、具有抑制

抑癌基因的定义

  早在1969年,哈里斯将癌细胞与同种正常成纤维细胞融合,所获杂种细胞的后代只要保留某些正常亲本 染色体时就可表现为正常表型,但是随着染色体的丢失又 可重新出现恶变细胞。这一现象表明,正常染色体内可能存在某些抑制肿瘤发生的基因,它们的丢失、突变或失去功能,使激活的癌基因发挥作用而致癌。

抑菌圈的概念

抑菌圈抑菌圈(Zone of inhibition)是福莱明发现青霉素的过程中,提出的一个词汇。他发现,接种了青霉的培养皿中,青霉的周围不生长细菌,而在远离青霉的地方有细菌生长。不生长细菌的地方,是一个以青霉菌落为圆心的一个规则的圆,这个圆圈被福莱明称为抑菌圈。后来,福莱明发现,这个抑菌圈的出现与青

O/129抑菌试验

  O/129抑菌试验是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。  (1)原理:0/129(二氨基喋啶)对弧菌属细菌有抑制作用,而对气单胞菌属细菌无抑制作用。  (2)培养基:碱性琼脂平板。  (3)方法:将待检菌均匀涂布于碱性琼脂平板上,镊取0/129纸片(含药40μg)贴于平板

竞争排斥的定义

中文名称竞争排斥英文名称competitive exclusion定  义生态位相似的两个物种,通过竞争而导致其中一个消失,或者两个物种处于不同的生态位的现象。应用学科地理学(一级学科),生物地理学(二级学科)

左手右手-竞争“上岗”

  当人们需要拿电话、按按钮或端咖啡时,会下意识选择伸出左手或右手。  美国加利福尼亚大学伯克利分校科学家实验发现,大脑内部存在一种竞争机制,从而决定人抓取一件物品时,伸出左手还是右手。  研究报告由最新一期美国《国家科学院院刊》(PNAS)发表。猜想  使用左手或右手一般受个人习惯和目标

竞争ELISA基本程序

① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标抗原的量由酶催化底物反应产生有色产物的量来确定,如果待检溶液中抗原越多,被结

竞争性-RTPCR:-竞争子-RNA-的构建实验

第一部分:竞争子的设计;第二部分:竞争子RNA的合成、纯化和定量。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇双蒸水DNA 模板[a-32P]ATP仪器、耗材RT-PCR 竞争子构建试剂盒实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇去除 RNA 酶的双蒸水2. 核酸

竞争性-RTPCR:-竞争子-RNA-的构建实验

            试剂、试剂盒 乙醇 双蒸水 DNA 模板 [a-32P]ATP 仪器、耗材 RT

竞争性-RTPCR:-竞争子-RNA-的构建实验

试剂、试剂盒 乙醇双蒸水DNA 模板[a-32P]ATP仪器、耗材 RT-PCR 竞争子构建试剂盒实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇去除 RNA 酶的双蒸水2. 核酸和寡核苷酸DNA 模板(0.5~1.0ug 线性化的质粒模板或 0.1~0.5ugPCR 模板)3. 放射性复合物[a-3

纤维素酶的制法用途

制法 一般用黑曲霉(Aspergillus niger)或李氏木霉菌(Trichoderma reesel;T.longibrachiatum)进行培养,然后将发酵液用盐析法使之沉淀并精制而成。由此所制得的商品中除纤维素酶外,尚含有半纤维素酶、果胶酶、蛋白酶、脂酶、木聚糖酶、纤维二糖酶和淀粉葡萄糖苷

碱性蛋白酶的制法和用途

制法 由地衣状芽孢杆菌(B aeillus licheniformis)经深层发酵制得。用途 蛋白水解酶制剂。主要用于明胶生产,可大大缩短萃取时间。亦用于植物蛋白、动物蛋白和鱼蛋白的水解。