竞争性RTPCR:竞争子RNA的构建实验
试剂、试剂盒 乙醇双蒸水DNA 模板[a-32P]ATP仪器、耗材 RT-PCR 竞争子构建试剂盒实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇去除 RNA 酶的双蒸水2. 核酸和寡核苷酸DNA 模板（0.5~1.0ug 线性化的质粒模板或 0.1~0.5ugPCR 模板）3. 放射性复合物[a-32P]ATP(10mCi/ml)(lCi=37 GBq)4. 实验器材RT-PCR 竞争子构建试剂盒（Ambion; 包括 T7RNA 聚合酶、10 倍的转录缓冲液、5 倍的 NTP 溶液、MnCl2、DNA 酶 I、凝胶上样缓冲液、探针洗脱缓冲液）二、方法1. 室温下准备转录反应，按下列顺序添加试剂。10 倍的转录缓冲液 &n......阅读全文
竞争性－RTPCR:－竞争子－RNA－的构建实验
试剂、试剂盒 乙醇 双蒸水 DNA 模板 [a-32P]ATP 仪器、耗材 RT
竞争性－RTPCR:－竞争子－RNA－的构建实验
第一部分：竞争子的设计；第二部分：竞争子RNA的合成、纯化和定量。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇双蒸水DNA 模板[a-32P]ATP仪器、耗材RT-PCR 竞争子构建试剂盒实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇去除 RNA 酶的双蒸水2. 核酸
竞争性－RTPCR:－竞争子－RNA－的构建实验
试剂、试剂盒 乙醇双蒸水DNA 模板[a-32P]ATP仪器、耗材 RT-PCR 竞争子构建试剂盒实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇去除 RNA 酶的双蒸水2. 核酸和寡核苷酸DNA 模板（0.5~1.0ug 线性化的质粒模板或 0.1~0.5ugPCR 模板）3. 放射性复合物[a-3
竞争性－RTPCR:－拷贝数的评估
试剂、试剂盒 双蒸水 RT-PCR 缓冲液 MMLV 逆转录酶 SUPERaseIN Taq DNA 聚合酶 总 RNA
竞争性－RTPCR:－拷贝数的评估
试剂、试剂盒 双蒸水RT-PCR 缓冲液MMLV 逆转录酶SUPERaseIN Taq DNA 聚合酶总 RNA 随机引物dNTP 混合物 基因特异的正向引物基因特异的反向引物仪器、耗材 PCR 仪 PCR 管实验步骤 第一部分：单链 cDNA 的合成一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去除 RNA 酶
竞争性－RTPCR:－拷贝数的评估
在预实验中，对样品和竞争子应分别做反转录，然后，不变的这种样品反转录产物的量与竞争子反转录产物 2 的对数倍稀释的量相结合，用于 PCR，这种方法可以确定样品的最适拷贝数。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒双蒸水RT-PCR 缓冲液MMLV 逆转录酶SUPER
相对－RTPCR:－引物与竞争子比例的决定实验
试剂、试剂盒 双蒸水RT-PCR 缓冲液TaqDNA 聚合酶cDNAdNTP 混合物基因特异的正向引物基因特异的反向引物dCTP仪器、耗材 PCR 仪 PCR 管Quantum RNA Universal 18S standards实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去除 RNA 酶的双蒸水1
相对－RTPCR:－引物与竞争子比例的决定实验
这个方案的目的是要选择一个 18SrRNA 引物和竞争子之间的恰当比例，可以模仿目的转录本的表达量。对于大多数转录本来说，一般比例为 3:7。对于模板比较稀少的，采用2:8 或 1:9 可能更恰当。准备的 PCR 反应混合物应比 5 个反应多 10%。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：
相对－RTPCR:－引物与竞争子比例的决定实验
试剂、试剂盒 双蒸水 RT-PCR 缓冲液 TaqDNA 聚合酶 cDNA dNTP 混合物 基因特异的正向引物 基因特异的
竞争性分析Epitope－Mapping实验方法
ABSTRACTThe simplest way to determine whether two monoclonal antibodies bind to distinct sites on a protein antigen is to carry out a competition assa
竞争性检测原理
竞争性检测原理：使用一种具有吸附所有β-内酰胺药物的特殊受体细菌，该细菌同14c标记的特定量青霉素G一起加入牛奶样品。牛奶样品中的任何一直β-内酰胺类均能和这种特殊标记的青霉素G竞争性地与细菌cell上的特异性受体结合。
竞争性检测原理
竞争性检测原理：使用一种具有吸附所有β-内酰胺药物的特殊受体细菌，该细菌同14c标记的特定量青霉素G一起加入牛奶样品。牛奶样品中的任何一直β-内酰胺类均能和这种特殊标记的青霉素G竞争性地与细菌cell上的特异性受体结合。
竞争性pcr原理
竞争性PCR 是靶基因与参考标准在同一反应管中共同扩增，用参 考标准作对照估计出一种特异性靶DNA或RNA分子的相对含量。 • 竞争PCR 有效地控制了不同反应管间扩增效率的差异。 竞争 PCR -理论基础 在PCR扩增过程中，PCR产物的量用公式Y= A （1+R）n表示，其Y表
非竞争性抑制
⑴ 非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似;⑵ 底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合;⑶ 抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响;⑷ 动力学参数:Km值不变，Vm值降低。
竞争性抑制的特点
特点：抑制剂与底物竞争酶的活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合后，底物就不能再与酶结合，同样反之。
竞争性抑制的特点
特点:抑制剂与底物竞争酶的活性部位，当抑制剂与酶的活性部位结合后，底物就不能再与酶结合，同样反之。
竞争性抑制的机理
竞争性抑制的机理1 抑制剂与底物在结构上有类似之处2 可能结合在底物所结合的位点（如结合基团）上，从而阻断了底物和酶的结合3 降低酶和底物的亲和力。注意：结合在酶的同一部位以及结构类似并不是竞争性抑制的必要条件，抑制剂结合的部位阻碍底物和酶的结合，即产生空间位阻也可以造成竞争性抑制。
竞争性抑制的概念
竞争性抑制是指当抑制物与底物的结构类似时，它们将竞争酶的同一可结合部位一一活性位，阻碍了底物与酶相结合，导致酶催化反应速率降低。这种抑制作用称为竞争性抑制。
竞争性抑制的机理
1 抑制剂与底物在结构上有类似之处2 可能结合在底物所结合的位点(如结合基团)上，从而阻断了底物和酶的结合3 降低酶和底物的亲和力。注意:结合在酶的同一部位以及结构类似并不是竞争性抑制的必要条件，抑制剂结合的部位阻碍底物和酶的结合，即产生空间位阻也可以造成竞争性抑制。
什么是竞争性抑制？
竞争性抑制是指当抑制物与底物的结构类似时，它们将竞争酶的同一可结合部位一一活性位，阻碍了底物与酶相结合，导致酶催化反应速率降低。这种抑制作用称为竞争性抑制。
什么是非竞争性抑制？
非竞争性抑制是指有些抑制物往往与酶的非活性部位相结合，形成抑制物一酶的络合物后会进一步再与底物结合；或是酶与底物结合成底物一一酶络合物后，其中有部分再与抑制物结合。虽然底物、抑制物和酶的结合无竞争性，但两者与酶结合所形成的中间络合物不能直接生成产物，导致了酶催化反应速率的降低，这种抑制称为非竞争性抑
反竞争性抑制的定义
反竞争性抑制是指抑制剂不直接与游离酶相结合，而仅与酶-底物复合物结合形成底物-酶-抑制剂复合物，从而影响酶促反应的现象。
非竞争性抑制的概念
非竞争性抑制是指有些抑制物往往与酶的非活性部位相结合，形成抑制物一酶的络合物后会进一步再与底物结合;或是酶与底物结合成底物一一酶络合物后，其中有部分再与抑制物结合。虽然底物、抑制物和酶的结合无竞争性，但两者与酶结合所形成的中间络合物不能直接生成产物，导致了酶催化反应速率的降低，这种抑制称为非竞争性抑
苯海拉明对组胺的竞争性拮抗作用实验
实验方法原理组胺（histamine）可局部作用于H1受体，引起胃、肠道、气管、支气管平滑肌收缩。H1受体阻断药苯海拉明（diphenhydramine）对组胺具有竞争性拮抗作用，其作用强度可用拮抗参数（PA2值）来反映。当激动药与拮抗药合用时，拮抗药使两倍浓度的激动药仅产生原浓度激动药的反应水平，
苯海拉明对组胺的竞争性拮抗作用实验
实验方法原理 组胺（histamine）可局部作用于H1受体，引起胃、肠道、气管、支气管平滑肌收缩。H1受体阻断药苯海拉明（diphenhydramine）对组胺具有竞争性拮抗作用，其作用强度可用拮抗参数（PA2值）来反映。当激动药与拮抗药合用时，拮抗药使两倍浓度的激动药仅产生原浓度激动药的反
非竞争性抑制的作用介绍
作用：抑制剂与游离酶或酶-底物复合物结合的一种酶促反应抑制作用。酶-底物-抑制剂复合物（ESI）不能进一步释放出产物。这种抑制使得Vmax变小，但Km不变。非竞争性抑制作用
非竞争性抑制的基本特点
⑴ 非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似；⑵ 底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合；⑶ 抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响；⑷ 动力学参数：Km值不变，Vmax值降低。
RNA干扰载体的构建的实验流程
RNA干扰载体主要用来研究基因表达调控，RNA干扰技术已已被广泛用于基因结构功能研究和传染性疾病及基因治疗领域，进行RNA干扰实验首先是构建RNA干扰载体，本文以pRI系列载体为例论述了干扰载体的构建的实验流程。产品技术背景pRI系列载体是基于III类rna聚合酶启动子：人类H1启动子的专用于哺乳动
反竞争性抑制的基本信息
反竞争性抑制是指抑制剂不直接与游离酶相结合，而仅与酶-底物复合物结合形成底物-酶-抑制剂复合物(该复合物不能生成产物)，从而影响酶促反应的现象。
关于竞争性拮抗剂的基本介绍
药物与受体有亲和力但不产生受体激动效应，可以阻止激动剂与该受体的结合。在激动剂浓度固定时，提高可逆性竞争性拮抗剂的浓度可以逐渐抑制激动剂产生的反应。在达到一个高浓度时，拮抗剂可以完全阻止反应的发生。反之，足够高浓度的激动剂能够移去一定浓度的拮抗剂的作用，仍然可以达到最大效应Emax。因为拮抗作用