凝胶迁移滞后实验基本原理
凝胶迁移滞后实验（electrophoretic mobility shift assays，EMSA）是近年发展起来的研究核酸与蛋白质相互作用简单、快速、敏感的方法。目前已经成为转录因子研究的经典方法。其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合，电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢，即表现为相对滞后（如下图所示）。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白，并可通过加入特异性的抗体（supershift）来检测特定的蛋白质，并可进行未知蛋白的鉴定。简单说明以下EMSA技术的优缺点，基本原理和实验方法。Electrophoretic mobility shift assay (EMSA)IntroductionAdvantage：can separate different types of complexes, such as monomer and dimer => better than f......阅读全文
凝胶迁移滞后实验基本原理
凝胶迁移滞后实验（electrophoretic mobility shift assays，EMSA）是近年发展起来的研究核酸与蛋白质相互作用简单、快速、敏感的方法。目前已经成为转录因子研究的经典方法。其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合，电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的
凝胶迁移实验（EMSA）——凝胶迁移
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）可以：（1）研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用；（2）可用于DNA定性和定量分析；（3）用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。实验方法原理一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初
凝胶迁移实验（EMSA）
实验方法原理 凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列
凝胶迁移实验（EMSA）
实验方法原理 一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的D
凝胶迁移实验（EMSA）实验方法
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。 一、实验原理 EMSA主要基于蛋白
凝胶迁移实验（EMSA）之一
实验操作方法1.探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer （10X） 1微升Nuclease-Free Water
凝胶迁移或电泳迁移率实验
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）可以：（1）研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用；（2）可用于DNA定性和定量分析；（3）用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。凝胶迁移或电泳迁移率实验凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobili
凝胶迁移实验（EMSA）之三：实验步骤
实验材料：DNA样品试剂、试剂盒： [γ-32P]ATP、T4多聚核苷酸激酶、Nuclease-Free Water、T4多聚核苷酸激酶缓冲液、醋酸铵、TE、无水乙醇、TBE buffer、重蒸水、甲叉双、丙烯酰胺、丙烯酰胺、甘油、过硫酸铵、TEMED（四甲基乙二胺）、EMSA Gel
凝胶迁移率变动分析实验
在本实验中, 我们用 DNA 亲和层析所用的同一互补寡核苷酸 (具体序列见实验 3 的引言的末尾) 来进行 AP-1 的凝胶迁移率变动分析。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸铵TEMED(NNN'N'四甲基乙二胺）甘油 (50%;
凝胶迁移率变动分析实验
试剂、试剂盒 丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸铵TEMED(NNN'N' 四甲基乙二胺）甘油 (50%;v v)竞争 DNA迁移率变动分析探针TBE凝胶迁移率变动分析缓冲液 TE实验步骤 材料丙烯酰胺双丙烯酰胺过硫酸铵（10%;w/v)TEMED(N,N,N',N', 四甲基
凝胶迁移率变动分析实验
凝胶迁移率变动分析实验 试剂、试剂盒 丙烯酰胺 双丙烯酰胺 过硫酸铵
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA－)
实验概要凝胶迁移或电泳迁移率实验是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。通常将纯化的蛋白或细胞粗提液和标记的DNA探针一同保温，在非变性的聚丙烯凝胶电泳上，分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物比非结合的探针移动得慢。标记的探针依研究的结合蛋白的不同，
凝胶迁移实验系列二实验操作方法
1.探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer （10X） 1微升Nuclease-Free Water
什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验？
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性
凝胶迁移实验系统提供了什么试剂？
Promega公司提供一种凝胶迁移实验系统检测DNA结合蛋白，系统可作为这类实验的一种阳性对照。系统包括目的寡核苷酸，对照DNA结合蛋白，结合缓冲液，用于寡核苷酸探针末端标记所需的试剂。Core 系统包括含重组AP2蛋白（AP2抽提液）的大肠杆菌抽提液和AP2的同源寡核苷酸。AP2抽提液是
EMSA凝胶迁移－(Electrophoretic－mobility－shift－assay)实验
实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，
凝胶迁移实验（EMSA）之二：实验方法原理
凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通
EMSA凝胶迁移（一）
实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术zui初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保
EMSA凝胶迁移（二）
实验步骤生物素标记探针:1. 按如下顺序加入反应物，温和混匀，切勿涡漩 超纯水 25μl5×TdT Reaction Buffer 10μl探针(1μM)
凝胶迁移（Gel－Shift）实验操作方法2
探针冷竞争反应：Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shift结合缓冲液（5X） 2微升细胞核蛋白或纯化的转录因子 2微升未标记的探针 1微升标记好的探针 1微升总体积 10微升突变探针的冷竞争反应：Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shif
凝胶迁移（Gel－Shift）实验操作方法1
1.探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer （10X） 1微升Nuclease-Free Water 5微升[γ-32P]ATP（3,000Ci/mmol at 10mCi/ml）
凝胶迁移实验中需要用到什么试剂？
凝胶迁移实验需要的结合蛋白，可来源于纯化或部分纯化的蛋白，或粗的核和胞质抽提液。还必须制备同位素标记的DNA或RNA。一般，DNA核苷酸探针用32P和T4多核苷酸激酶来作末端标记，同位素标记的RNA用噬菌体RNA聚合酶和同位素标记的核苷酸在体外合成。Promega公司的Riboprobe/sup系统
成功进行凝胶迁移实验需要优化哪些因素？
凝胶迁移实验在理论上很简单也很快速，但要成功地进行凝胶迁移实验，需要优化一些参数，这主要受结合蛋白的来源和探针结合位点特点的影响。以下是需要优化的因素：抽提液的制备（核酸酶和磷酸酶污染会使探针降解），结合蛋白的浓度，探针的浓度，非特异性探针的浓度，缓冲液的配方和pH，聚丙烯凝胶电泳的特点和电泳条件，
凝胶迁移率变动分析
中文名称凝胶迁移率变动分析英文名称gel mobility shift assay定 义利用凝胶进行的电泳迁移率变动分析。不同大小的分子在凝胶中电泳移动的速度不同，当某种分子与另一种分子特异性结合后，它在非变性凝胶电泳带中的位置就发生了变化，由此可以分析不同分子间的相互作用。如待检测DNA样品与核
凝胶迁移实验（gel－shift）基本知识问题与回答3
TFIIB与预启动复合物结合后，致使RNA聚合酶II和TFIIF结合到转录启始区。故TFIIB在预启动复合物的形成中有重要作用。当用纯化的 TFIID作凝胶迁移实验时，poly dI-dC不用加入结合反应中。结合缓冲液含10%甘油，20mM Tris（pH8.0）， 10mM MgCl2,
凝胶迁移实验（gel－shift）基本知识问题与回答1
（1）什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验？凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记
凝胶迁移实验（gel－shift）基本知识问题与回答2
1.AP1（激活蛋白1）：是一个转录调节因子，它结合的同源序列为5'-TGAGTCA-3'。当基因的启动子区域存在AP1的结合位点时，这些基因可以被诱导，比如用佛波酯可诱导蛋白激酶C（2,7）。在细胞中，AP1形成c-Jun或Jun相关蛋白的同聚双体，或者形成c-Jun或Jun相关蛋
EMSA凝胶迁移－(Electrophoretic－mobility－shift－assay)
实验概要凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前
凝胶迁移率变动分析的特点
中文名称凝胶迁移率变动分析英文名称gel mobility shift assay定 义利用凝胶进行的电泳迁移率变动分析。不同大小的分子在凝胶中电泳移动的速度不同，当某种分子与另一种分子特异性结合后，它在非变性凝胶电泳带中的位置就发生了变化，由此可以分析不同分子间的相互作用。如待检测DNA样品与核