常见的4大HPLC故障你能搞定几个?内附解决方案!

一、压力持续偏高1、流速设定过高。将流速调整到适当数值。2、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀。更换流动相,冲洗色谱柱。3、柱前筛板堵塞。在允许情况下反冲色谱柱,更换筛板,更换色谱柱。4、保护柱堵塞。清洗或更换保护柱。 二、压力持续偏低1、流速设定过低。将流速适当调高。2、系统漏液。检查色谱柱接口、泵等位置,确定漏液位置并维修。3、色谱柱选择不当。更换合适的色谱柱。 三、压力波动较大1、管道中有气体,流动相脱气不充分。流动相继续脱气或改变脱气方法(如在线脱气等)。2、单向阀、泵密封损坏。更换单向阀和泵。3、流动相粘度变化引起压力波动。改用溶剂梯度洗脱。 四、漏液通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题,就必须将接头取下,检查是否损坏(例如,卡套损坏、密封表面有杂质);损坏的接头应该更换......阅读全文

HPLC与GC有什么差别?

HPLC可通过高效液相色谱(HPLC)被称为(高效液相色谱)也称为高压液相色谱法。与气相色谱最重要的区别如下:高效液相色谱流动相为液体(液-液分配原理)。GC的流动相(载气)为气体(气-液分配原理)。但是,这两项工作所采用的分离原理基本相同,都是用色谱理论分析的,都可以使用多种检测器,常用于定量分析

HPLC中冲洗柱子的方法

如果样品中有盐的话,最好还是用(水:乙腈=9:1)先冲洗一下,如果柱子里盐不冲洗干净的话,再用小极性的流动相冲柱子时,盐就会析出,影响色谱柱寿命。要是没有盐的话,就无所谓了,用甲醇乙腈冲洗都行,冲洗到什么程度,主要看柱压是否已经回落,稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂(乙腈最好)中,避

水质对-HPLC-分析的影响

  简介:  优化的高效液相色谱法分析需要高纯度溶剂和试剂。同时,在流动相准备阶段,色谱柱中盐和有机溶剂的选择十分谨慎,所以水质是非常重要的。在洗脱液中,中痕量有机物的存在可能会导致长期不好的结果。随着时间推移,柱效可能会阻塞,导致分辨率降低,峰拖尾。大量实验表明,水中的有机物可能极大地影响液相色谱

做HPLC的“鬼峰”知识

鬼峰,顾名思义,就是指在相同的色谱条件下,有时候出现,有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的,查询了相关文献,结合本人以往的经验,来谈谈鬼峰的成因及应对策略,主要体现在以下几个方面:1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时,由于开始时有机相比例不高,洗脱能力不强,部分杂质在便富集在色谱

HPLC组分的快速冻干法

  分析测试百科网讯 Genevac的系列3 HT蒸发器的快速冻干功能是为了提供一种快速、高通量可以替代冷冻干燥的HPLC纯化组分的方法而开发的。  传统的蒸发去溶剂方法,例如水和乙腈,通常会因为溶剂与样品的相互作用而形成胶状或油状物质。采用系列3 HT蒸发器的LyoSpeed™快速冻干技术,使得制

液相色谱(HPLC)入门(一)

什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料,粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶

HPLC对流动相的要求

① 必须是HPLC级的,不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度,要求k在1~10范围内(可用范围)或2~5(最佳范围)。k值太小,不利于分离;k值太大,可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时,不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气:由于流动

HPLC基础知识教程(九)

  5)、池体积:除制备色谱外,大多数HPLC检测器的池体积都小于10µ;l。在使用细管径柱时,池体积应减少到1~2µ;l甚至更低,不然检测系统带来的峰扩张问题就会很严重。而且这时池体、检测器与色谱柱的连接、接头等都要精心设计,否则会严重影响柱效和灵敏度。  3.紫外检测器(ul

VE中苯并芘的HPLC检测

苯并芘是由5个苯环构成的多环芳烃化合物,是一种强致癌物,在生产植物油的过程中可能因环境污染、原材料携带或加工时温度过高而产生。目前,维生素E的生产都是以植物油生产脱臭过程的副产物-脱臭馏分作为原料,因此苯并芘也不可避免地残留于脂溶性的维生素E产品中。为了评价维生素E中苯并芘含量是否超标,本方法

过滤与HPLC还有这关系

在日常生活中你是不是经常看到这些... 生活用水的净水器 早起的纯纯的豆浆 最美的男医生(身上的过滤器) 等等如此这些 那么 今天,咱们分享的主题就是膜分离。 膜分离其主要分类有反渗透、微滤、超滤、纳滤扩散渗析、电渗析、气体分离、

hplc进样浓度多少合适

3ug/ml。HPLC高效液相色谱法,High Performance Liquid Chromatography缩写,进样浓度为3ug/ml,S/N为180,一针一针试,先配一个浓度进针再根据结果调整,6次进样,最小检测浓度不超过1×10-7g/ml萘/甲醇溶液, 高效液相色谱法(HPLC)是应用

HPLC的酸清洗和钝化

  HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸,暴露在实验室化学环境,与零部件制造相关的残留物,或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗,但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上,因而会降低总的性能。  •磷酸清洗:通常用于从系统中除去有机杂质。可能

HPLC日常维护有哪些步骤

  高效液相色谱(HPLC)是色谱法的一种,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。  高效液相色谱(HPLC)的日常维护有哪些呢?  1.高效液相级色谱醇,

液相色谱(HPLC)入门(二)

什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中,黄色谱带完全通过了检测器流通池;产生的电信号被送到计

HPLC是做什么的

HPLC是高效液相色谱,英文全称是HighPerformanceLiquidChromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、

液相色谱(HPLC)入门(五)

正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中,茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末; 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极

HPLC基础知识教程(二)

  II.基本概念和理论  一、基本概念和术语  1.色谱图和峰参数  色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elutionprofile)。  基线(baseline)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出

赛默飞在HPLC-2018推出最新HPLC色谱柱--提供更高分辨率

  分析测试百科网讯 第47届高效液相分离及相关技术国际研讨会于2018年7月29日-8月2日在华盛顿举行,为了支持高效液相色谱的创新和应用,赛默飞在会上展示其最新的HPLC色谱柱产品。  “我们的客户不断面临新的分析挑战,因为他们使用用HPLC来加深对分析样品,”赛默飞色谱和质谱分析的副总裁兼总经

HPLC检测三聚氰胺

  1、反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量  2、高效液相色谱 -二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺  建立用高效液相色谱 -二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺的检测方法。对不同样品采用不同的前处理方法,然后用Agilent TC2C18 4. 6 ×250 mm色谱柱,柱温为40

分享|HPLC的酸清洗和钝化!

HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸,暴露在实验室化学环境,与零部件制造相关的残留物,或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗,但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上,因而会降低总的性能。•磷酸清洗:通常用于从系统中除去有机杂质。可能是由于洗

HPLC色谱柱的分类以及选择

现代液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中,现如今多采用细粒径以获得高分辨率。但是,细粒径填料的流体阻力往往很大,必须采用高压泵以将流动相强制输运通过柱子。所以,柱子必须能承受高压而不泄漏、不破坏才行。色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。常用的HPL

HPLC紫外灯的维护和更换

  HPLC紫外灯的维护和更换   一、HPLC紫外灯的维护   对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为:   1.缩短检测前的开灯时间   尽量在检测前1小时开紫外灯,具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相,对色谱柱也不好。  

HPLC中常用色谱柱类型

极性,非极性,弱极性是气相色谱柱常用的分类方法。液相色谱柱一般是分为如下几类:尺寸排阻色谱法(SEC)色谱柱 反相液相色谱法(RPLC或RPC)色谱柱离子交换(IEC)色谱柱 亲合作用(HILIC)色谱柱疏水作用(HIC)色谱柱正相液相色谱(NPC)色谱柱

HPLC造成峰分叉的原因分析

保护柱或分析柱污染;取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。样品溶剂不溶于流动相;改变样品溶剂,如果可能采取流动相作为样品溶剂。

分享|HPLC的酸清洗和钝化!

  HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸,暴露在实验室化学环境,与零部件制造相关的残留物,或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗,但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上,因而会降低总的性能。   •磷酸清洗:通常用于从系统中除去有机杂质。

依利特将参加HPLC-2011-Dalian

    依利特分析仪器有限公司将参加2011年10月8日至11日在大连世界博览广场览馆举办的第37 届国际高效液相色谱及相关技术会议(含仪器展览会)(HPLC 2011 Dalian)。     期间我们将向您展出大流量工业制备型高效液相色谱仪、P1201高效液相色谱仪、LU23

第33-届HPLC-会议参展通知

第33 届HPLC 会议参展通知 HPLC2008 Kyoto The 33rd International Symposium on High Performance Liquid Phase Separations and Related Techniques   时间:2008 年1

HPLC保留时间漂移的故障排除

  保留时间不重现有两种不同的情况:即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起;而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同机

HPLC紫外灯的维护和更换

  一.HPLC紫外灯的维护  对紫外灯的最根本维护就是在不进行测定时应及时关灯。具体的做法为:  1.缩短检测前的开灯时间。尽量在检测前1小时开紫外灯,具体时间根据系统的稳定时间而定。太早会缩短灯的使用寿命太晚会浪费流动相,对色谱柱也不好。  2.检测结束后的关灯。在检测结束后应立即关灯,最好采用