研究揭示抑制PFKFB3介导的糖酵解防治多种严重肺疾病
肺是呼吸系统的主要器官，其借助外呼吸功能不断为机体提供氧气、排出二氧化碳，以维持机体血气平衡和内环境稳定。许多病理性因素可导致肺部功能发生改变，从而导致肺部疾病甚至危及生命。目前肺动脉高压和败血症致死率高，治疗药物疗效差，仅能改善患者的生活质量，一些严重病人最终只能求助于肺或心脏移植手术。进一步深入研究肺部疾病的发病机制，开发有效的治疗策略和药物是医药界刻不容缓的使命。 北京大学深圳研究生院化学生物学与生物技术学院研究团队通过构建内皮细胞和平滑肌细胞特异性Pfkfb3敲除小鼠，同时利用慢性缺氧诱导小鼠，复制肺动脉高压模型。研究结果表明，内皮细胞特异性敲除Pfkfb3后，显著降低了内皮细胞的糖酵解水平，进而抑制了糖酵解代谢产物丙酮酸的产生。丙酮酸水平降低导致对PHDs的抑制能力减弱，使细胞中HIF2A被降解增多，最终使生长因子、促炎细胞因子和细胞黏附因子的表达降低，进而抑制肺血管平滑肌细胞的异常增殖，以及肺血管周炎症细胞的浸......阅读全文
PNAS：研究揭示抑制PFKFB3介导的糖酵解防治多种肺部疾病
肺是呼吸系统的主要器官，其借助外呼吸功能不断为机体提供氧气、排出二氧化碳，以维持机体血气平衡和内环境稳定。许多病理性因素可导致肺部功能发生改变，从而导致肺部疾病甚至危及生命。目前肺动脉高压和败血症致死率高，治疗药物疗效差，仅能改善患者的生活质量，一些严重病人最终只能求助于肺或心脏移植手术。进一步
研究揭示抑制PFKFB3介导的糖酵解防治多种严重肺疾病
肺是呼吸系统的主要器官，其借助外呼吸功能不断为机体提供氧气、排出二氧化碳，以维持机体血气平衡和内环境稳定。许多病理性因素可导致肺部功能发生改变，从而导致肺部疾病甚至危及生命。目前肺动脉高压和败血症致死率高，治疗药物疗效差，仅能改善患者的生活质量，一些严重病人最终只能求助于肺或心脏移植手术。进一步
巨噬细胞在内皮细胞调控肌肉再生新机制中的应用
内皮细胞（endothelial cell，EC）遍布血管,是氧气和营养物质输送、免疫细胞运输以及清除远组织废物的重要管道。目前认为内皮细胞（ECs）代谢是促进血管生成的重要因素，ECs不同的代谢途径，如糖酵解、脂肪酸氧化和谷氨酰胺代谢，在血管形成过程中发挥了不同的重要作用。研究发现,糖酵解过程
Redox－Biology:－糖尿病内皮细胞的糖酵解依赖DNA修复缺陷
糖尿病心血管疾病和微血管并发症，如糖尿病视网膜病变(DR)，是糖尿病患者发病和死亡的主要原因，糖尿病血管并发症的患病率正在迅速增加。糖尿病血管并发症的一个关键事件是血管通透性增加，内皮细胞(ECs)丢失。 这种统一的机制引起了人们对氧化应激诱导的DNA损伤在糖尿病内皮细胞病理中的作用的关注：活
补体介导的细胞毒实验——补体介导法
细胞毒实验可应用于：（1）检查细胞膜抗原；（2）鉴定抗体的特异性。实验方法原理带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死
病毒介导基因转移
病毒介导基因转移：前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移（viral mediatedgene transfer）是通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体（vector），将外源目的基因通过基因重组技术，将其组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运
脂质体介导的真核细胞转染实验——质体介导短暂表达
用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高，重复性更好。实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒质粒DNA完全培养基氯化铯DMEM仪器、耗材培养皿培养箱聚苯乙烯管实验步骤1. 按5×105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞，在37℃ 5%CO2培养箱中 培养过夜，直至细胞80%汇片。
细胞介导免疫的定义
细胞免疫又称细胞介导免疫。狭义的细胞免疫仅指T细胞介导的免疫应答，即T细胞受到抗原刺激后，分化、增殖、转化为致敏T细胞，对抗原的直接杀伤作用及致敏T细胞所释放的细胞因子的协同杀伤作用。广义的细胞免疫还应该包括原始的吞噬作用以及NK细胞介导的细胞毒作用。细胞免疫是清除细胞内寄生微生物的最为有效的防御反
农杆菌介导法简介
农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位 [1] ，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。因此，农杆
细胞介导免疫的概念
细胞介导免疫（英语：Cell-mediated immunity）是一种不涉及抗体的免疫应答；相对于体液免疫，可简称细胞免疫、胞介免疫。细胞介导免疫会活化巨噬细胞和自然杀伤细胞使它们能破坏胞内病原体、激活抗原特异性细胞毒性T细胞（CD8+），并释放各种细胞因子对抗原做出应答。不像体液免疫，其中没有抗
抗体介导的调理作用
ADCC,antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity 抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用。简而言之，就是有些杀伤性细胞在抗体的作用下产生的细胞杀伤作用。其中最主要发挥作用的细胞是NK细胞，它的表面有抗体Fc段受体，在与抗体Fc段结合的情况下可以直接杀
农杆菌介导水稻转化
实验概要本实验介绍了农杆菌介导的水稻转化。主要试剂GUS染色液：100 mmol/L NaPO4 (pH7.0)；0.1% Triton X-100；10 mmol/L EDTA；0.5 mmol/L亚铁氰化钾头抱霉素，乙醇，次氯酸钠溶液主要设备高速离心机，培养箱，人工气候室实验材料水稻种子实验步骤
农杆菌介导法概述
农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，农杆菌的介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用。此外，生物技术学家还可以通过发根农杆菌转化，在液体培养基中培养高密度的根，作为一种在转基因植物中获得大量蛋白质的方法。 农杆菌Ti质粒的T-DNA可高效率地整合到植物受体细胞的染色体上并得到
农杆菌介导转化拟南芥
实验概要1. 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理。2. 掌握农杆菌介导转化拟南芥 的实验方法，了解拟南芥的生理特点及在基因工程实验中应用实验原理拟南芥（Arabidopsis thaliana）是一种十字花科植物，二年生草本，高7～40厘米，花期3～5月。广泛用于植物遗传学、发育生物学和
脂质体介导的瞬时转染
实验材料靶细胞DNA试剂、试剂盒阳离子脂质D-PBSA缓冲盐溶液NaCl0.25%胰蛋白酶仪器、耗材细胞培养基还原的血清培养基无血清培养基多孔培养板实验步骤A . 贴壁细胞的转染1. 将 1.3X105 个细胞/孔接种到 6 孔培养板，加 3 ml 培养基。2. 于 37°C 的 CO2 孵箱培养至
RNA介导的基因沉默实验
实验材料pGEM-T 载体 DNA 模板 试剂、试剂盒d
脂质体介导的瞬时转染
实验材料 靶细胞DNA试剂、试剂盒 阳离子脂质D-PBSA缓冲盐溶液NaCl 0.25%胰蛋白酶仪器、耗材 细胞培养基还原的血清培养基无血清培养基多孔培养板实验步骤 A . 贴壁细胞的转染1. 将 1.3X105 个细胞/孔接种到 6 孔培养板，加 3 ml 培养基。2. 于 37°C 的 CO2
脂质体介导的瞬时转染
实验材料 靶细胞 DNA 试剂、试剂盒 阳离子脂质 D-PBSA缓冲盐溶液 Na
受体介导的胞吞现象介绍
细胞外的生物大分子(包括病毒、毒素等)选择性地与受体结合后经胞吞作用而进入细胞的过程。是受体-配体复合体得以解离，和某些受体的再利用所必需的过程。既是细胞高效率、高选择性和快速摄取胞外亲水分子的重要方法，也是穿越细胞膜运送物质的方式之一。
内含肽介导的蛋白连接
通过改变裂解条件以及对内含肽进行适当修饰，可以生物合成c端带有硫酯键或N端带有半光氨酸的蛋白质分子。两种蛋白质混合以后，硫酯键和半光氨酸利用“自然化学连接”(native chemical ligation)的原理进行自发的连接反应，在硫酯和半光氨酸之间形成肽键，从而将两种蛋白质连接起来。自然化学连
线粒体介导的凋亡过程介绍
当线粒体的膜电位下降，线粒体膜通透性增加，线粒体内促凋亡因子（例如：当线粒体的膜电位下降，线粒体膜通透性增加，线粒体内促凋亡因子（例如：Cyt C、AIF、SMAC/DIABLO、HTRA2/OMI、ENDOG）释放到胞质中。Cyt C释放到胞内以后，与Apaf-1相互作用，在ATP和dATP的协
环介导等温扩增技术原理
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification)，是一个比较公认的等温扩增方法，现如今等温扩增法很多，比如RCA,NASBA,RPA...如果可以，你可以参考这篇文献：Loop-mediated isothermal amplification inte
通道蛋白介导的易化扩散
运输过程借助于穿越脂双分子层的通道蛋白完成。通道蛋白中心是亲水性小孔，不同种类的通道蛋白可分别运输离子，水等小分子。主要运输离子的通道蛋白也称为离子通道，对离子具有高度亲和力和高度选择性。离子通道运输速率高，每秒运输离子数量多达几百万个，载体蛋白每秒运载的分子数目则不足一千个。某些离子通道蛋白星关闭
脂质体介导DNA转染法
脂质体（LR）试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物（1：1）。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时，首先需要优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞
通道蛋白介导的易化扩散
运输过程借助于穿越脂双分子层的通道蛋白完成。通道蛋白中心是亲水性小孔，不同种类的通道蛋白可分别运输离子，水等小分子。主要运输离子的通道蛋白也称为离子通道，对离子具有高度亲和力和高度选择性。离子通道运输速率高，每秒运输离子数量多达几百万个，载体蛋白每秒运载的分子数目则不足一千个。某些离子通道蛋白星关闭
载体蛋白介导的易化扩散
运输过程是通过载体蛋白发生可逆的构象变化实现的。载体蛋白是膜上与物质运输有关的穿膜蛋白，对所运输的物质具有高度选择性，当载体蛋白一端表面的特异结合部位与专一的溶质分子结合，引发载体蛋白空间构象改变，将运送的溶质分子从结合的一侧转运到膜的另一侧；变构的载体蛋白对被转运物质的亲和力同时发生改变，于是被转
RNA介导的基因沉默实验
实验材料 pGEM-T 载体DNA 模板试剂、试剂盒 dNTP 混合物DNA 聚合酶（Sigma) 及配套缓冲液限制酶仪器、耗材 PCR 纯化试剂盒或柱子实验步骤 一、筛选目的基因片段的参数1. 序列( 1 ) 构建一个指定的 RNA 沉默载体首先要进行生物信息学分析。根据目的基因对应的已知 c
LAMP（环介导等温扩增）技术
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用，其灵敏度高、特异性好，是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂，对仪器和人员要求比较高，不适合基层或现场快速诊断，因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci
病毒介导基因转移技术介绍
病毒介导基因转移：前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移（viral mediatedgene transfer）是通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体（vector），将外源目的基因通过基因重组技术，将其组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运
RNA介导的基因沉默实验
实验材料pGEM-T 载体DNA 模板试剂、试剂盒dNTP 混合物DNA 聚合酶（Sigma) 及配套缓冲液限制酶仪器、耗材PCR 纯化试剂盒或柱子实验步骤一、筛选目的基因片段的参数1. 序列( 1 ) 构建一个指定的 RNA 沉默载体首先要进行生物信息学分析。根据目的基因对应的已知 cDNA 序列