骨组织βgal免疫染色实验技术方法

ß-gal Staining:Reagents:0.1M Phosphate Buffer (pH 7.3):0.1M Sodium Phosphate monobasic115ml0.1M sodium phosphate dibasic385mlTotal Volume500 mlFix solution:0.5% Gluteraldehyde:25% gluteraldehyde0.4 ml100mM EGTA pH 7.32.5 ml1M magnesium chloride0.1 ml0.1 M sodium phosphate pH 7.347.0 mlTotal Volume50.0 ml4% Paraformadehyde:paraformadehyde20 g1M magnesium chloride1ml100mM EGTA25ml~500 ml PBSPrepare fresh each timeWash ......阅读全文

动植物组织mRNA提取实验方法

一、材料   水稻叶片或小鼠肝组织。   二、设备   研钵,冷冻台式高速离心机,低温冰箱,冷冻真空干燥器,紫外检测仪,电泳仪,电泳槽。  三、试剂   1、无RNA酶灭菌水:用将高温烘烤的玻璃瓶(180℃ 2小时)装蒸馏水,然后加入0.01%的DEPC(体积/体积),处理过夜后高压灭菌。   2、

实验室组织细胞破碎方法

实验室对组织细胞的破碎方法很多,有机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法等。在破碎前,材料常需要预处理,如动物材料要除去与实验无关甚至有妨碍的结缔组织,脂肪组织和血污等,植物种子需要除壳,微生物材料需将菌体和发酵液成分分开等。不同实验规模、不同实验材料和实验要求,使用的破碎方法和条件也不同。一些

植物组织研磨样品典型实验方法

TL系列植物组织破碎仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂,通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦,在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨,最细可以达到5微米。对于不同的的样品,TL系列植物组织破碎仪需要用不同的条件来处理,这里面主要涉及研磨速度、研磨时间、研磨温度和研磨珠

动物组织研磨样品典型实验方法

TL系列动物组织研磨仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂,通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦,在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨,最细可以达到5微米。对于不同的的样品,TL系列动物组织研磨仪需要用不同的条件来处理,这里面主要涉及研磨速度、研磨时间、研磨温度和研磨珠

骨及软组织肥大的诊断及鉴别

  诊断  任何年龄均可发病,多数病例在出生或出生后不久发病。男多于女。骨及软组织肥大可累及一个或数个肢体致肢体肥大,常非同侧性。可伴内脏肥大、并指(趾)、脊柱裂和皮肤色素沉着,眼部表现有单侧先天性青光眼、眼球内陷、结膜毛细血管扩张、虹膜缺损、视网膜静脉曲张及脉络膜血管瘤等。  心血管损害:出生时即

我国成功实施世界首例组织工程再生骨修复大段骨缺损

  近日,第四军医大学西京医院成功实施世界首例组织工程再生骨修复大段骨缺损技术。此举标志着应用组织工程技术修复大段骨缺损成为可能。  当前,随着交通事故、高处坠落等高能损伤发生率日益增高,肢体大段骨缺损(通常指大于6厘米)的发生率可达四肢骨创伤的15.0%,但其修复一直是国际性医学难题。传统修复方法

下颌无牙颌微创骨劈开引导骨组织再生并同期牙种植...1

下颌无牙颌微创骨劈开引导骨组织再生并同期牙种植临床应用前牙区骨量不足的义齿修复一直是口腔种植领域的难点,传统的全口义齿修复难以固位,美观及咀嚼效率均较差。自体骨块移植虽能修复水平及垂直向骨缺损,但需开辟第二术区,创伤较大,愈合时间长,患者缺牙期较久,往往难以接受。而微创骨劈开术联合引导骨组织再生(G

下颌无牙颌微创骨劈开引导骨组织再生并同期牙种植...2

永久修复:①二期手术:术后4个月复诊,记录软硬组织愈合情况,拍摄CBCT评估骨结合状况(图5)。行二期手术,取出封闭螺丝,更换愈合基台。取藻酸盐印模制作个性化托盘。②取模:半个月后待软组织完全愈合,更换多基基台,各基台加力至35N·cm,取开窗式印模,灌注石膏模型,制作暂基托和蜡堤确定咬合关系,堤转

一例组织工程骨修复上颌骨缺损及牙种植诊疗分析

近年研究发现,脂肪基质中存在着一类具有多向分化潜能的成体间质干细胞——脂肪干细胞(adipose derived stem cell,ADSC),在体外向成骨、软骨、脂肪、肌肉等多个方向分化。脂肪干细胞体内分布广、分离培养操作简单,较骨髓间充质干细胞bone marrow derived mesen

原位杂交组织化学实验技术1

第一节 原位杂交组织化学概述  一、核酸分子杂交技术  1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究,其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,特别是70年代末到80年代初,分子克隆、质

原位杂交组织化学实验技术6

二、快速原位杂交细胞化学技术  原位杂交免疫细胞化学技术存在的难点之一是实验手续繁琐,实验周期长。国外Liesi等(1986)和国内学者何彬等应用光敏生物素-链亲合素(Biotin-streptavidin)胶体金系统进行原位杂交,得到了快速满意的结果,全部实验可在数小时内完成。  作用把含某种多肽

免疫组织化学技术实验标本介绍

实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一

原位杂交组织化学实验技术4

 二、生物素标记cRNA探针在原位杂交组织化学中的应用  (一)光敏生物素标记cRNA探针的应用  以线性质粒DNA为模板合成未加标记物的cRNA探针,使其最终浓度为0.5~1.0μg/μl(500~1000ng/μl),再与等体积的光敏生物素(1μg/μl)混合。在150瓦卤素灯下,距离光源20c

原位杂交组织化学实验技术5

(8)荧光显示:  ①生物素标记DNA探针的荧光显示。  1)应用PBS含5%无脂干奶(5μl每张盖片),也可用1%牛血清白蛋白(BSA)-PBS覆盖孵育5min室温,以封闭非特异性结合部位。  2)移除多余液体,加抗生素-FITC(5μg/ml在PBS含5%奶粉或1%BSA,5μl/cm2)。在湿

原位杂交组织化学实验技术3

(四)杂交后处理(post hybridisation treatment)  杂交后处理包括系列不同浓度,不同温度的盐溶液的漂洗。在原位杂交组织化学的实验程序中,这也是一个重要的环节 。特别因为大多数的原位杂交实验是在低严格度条件下进行的,非特异性的探针片段粘附在组织切片上,从而增强了背景染色。R

原位杂交组织化学实验技术2

 DNA合成仪的诞生使制造寡核苷酸探针成为可能,与上述探针不同的是寡核苷酸探针不是克隆性DNA探针,它是由DNA合成仪依照所需杂交的靶核苷酸序列合成的。具有制造方便,价格低廉的优点,也可进行放射性与非放射性标记,但其特异性不如克隆性探针强,亦不如其杂交信号高。  原位杂交组织化学技术在近20年的发展

3D生物打印复合材料完美修复骨组织及软组织

  记者26日从中国科学院合肥物质科学研究院了解到,该院强磁场中心王俊峰研究员团队开发出新型3D生物打印复合材料,用于组织工程修复领域,并取得了系列研究进展。相关成果日前发表在国际期刊《材料与设计》和《国际生物大分子杂志》上。  生物硼基玻璃(BBG)是一种生物活性材料,在骨组织修复和再生医学中已有

3D生物打印复合材料完美修复骨组织及软组织

科技日报合肥8月26日电(记者吴长锋)记者26日从中国科学院合肥物质科学研究院了解到,该院强磁场中心王俊峰研究员团队开发出新型3D生物打印复合材料,用于组织工程修复领域,并取得了系列研究进展。相关成果日前发表在国际期刊《材料与设计》和《国际生物大分子杂志》上。生物硼基玻璃(BBG)是一种生物活性材料

Betagal-staining-of-eukaryotic-cells-in-vitro

(Modification of methods of Dr. Seong-Seng Tan and Promega's "Protocols and Applications Guide")Cells previously transfected with a lac Z construc

Senescentassociated-bGal-Assay

Wash cells with PBSFix cells in 0.2% glutaraldehyde for 5’dilute this in PBSWash cell with PBSStain with X-gal solution (ingredients listed below) for

一例足部骨软组织缺损病例分析

我们收治1例左足皮肤软组织、跟骨、足底外侧动脉以及足底外侧皮神经节段性缺损患者,应用股前外侧穿支皮瓣桥接旋髂浅动脉蒂髂骨与皮神经复合组织瓣重建,取得较为满意效果。 一、临床资料 患者男,17岁,因车祸伤及左足、左手,疼痛、流血3 h入院。检查:左足内侧10 cm斜行开放伤口,舟骨脱出,内踝下有搏动性

骨组织学研究解密水龙兽生存策略

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2021/3/454791.shtm 新疆水龙兽的骨组织显微结构 近日,中国地质大学(武汉)副教授韩凤禄与中国科学院古脊椎动物与古人类研究所研究员刘俊、副研究员赵祺合作完成了对新疆地区水龙兽骨组织学的初步研

组织芯片技术

1998 年  Konoen 等提出了组织芯片的概念,在美国 Nature Medicine 上发表了制作组织芯片用于乳腺癌p53 基因扩增及其表达蛋白水平的研究。随后 Moch 等对肾癌,Scharan  等对不同类型肿瘤, Richter 等对尿道膀胱癌的组织芯片进行免疫组织化学和原位分子杂交等

关于组织培养技术的培养方法介绍

  1、非试管微组织快繁  非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。一般植物7~15天可以生长出根系。此技术投资低,操作环节少。  2、试管组织培养  试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在组培

关于病毒血清学检测—凝集实验的介绍

  凝集实验:颗粒性抗原与相应抗体结合后发生凝集的血清学试验。抗原与抗体复合物在电解质作用下,经过一定时间,形成肉眼可见的凝集团块。临床常用于鉴定菌种和梅毒感染的确认。6.病毒蛋白检测  病毒侵入宿主细胞后可合成自身结构蛋白与非结构蛋白,也可与宿主细胞发生相互作用而上调或下调宿主蛋白的表达,除直接检

应用-APAAP-免疫染色和原位杂交进行序列的-MAC-分析实验

实验方法原理实验材料用于分析的空气干燥的细胞铺试剂、试剂盒甲醛缓冲的丙酮固定剂PBSFBS兔抗鼠Ig抗血清溶液APAAP 底物溶液5 % 的吉姆萨染液乙醇甲醇 冰乙酸固定剂生物素或地高辛标记的重复序列探针Harris苏木素染液氨水溶液仪器、耗材Coplin 缸封片媒介细胞离心涂片器过滤器保湿盒过滤膜

实验技术与方法大全

目前最好的实验方法站点之一: http://www.protocol-online.org 有近三百种经典实验方法的生物学网站: http://iprotocol.mit.edu/ 目前最完美的生物技术收集网站之一: http://www.bioprotocol.com:包括动植物、果蝇、分子生物、

实验技术方法流程汇总

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3D生物打印技术在口腔颌面部骨组织缺损修复的研究进展

  各种致病因素如创伤、先天畸形、感染、肿瘤等都可导致颌面部骨组织缺损及缺失,继而引起严重的面部畸形和功能障碍,在生理和心理上给患者带来巨大痛苦。骨缺损的修复治疗大致可分为3类,即自体骨移植、异体骨移植和组织工程骨移植。自体骨的骨源有限且会对机体造成二次创伤,异体骨会引起机体对其产生免疫排斥反应,同

免疫染色法检定蛋白质

实验概要转印到纸上的蛋白质抗原,可与其专一性抗体结合,再以二次抗体-酶结合体(2nd Ab-HRP) 或Protein A-HRP 呈色;可在一群转印色带中,专一性地挑出目标蛋白质,是最有用的检定工具。主要试剂1. 抗体溶液:可用传统抗血清或单株抗体,其最适使用浓度,随抗体效价不同而异,以下为一般适