免疫组织化学技术实验标本介绍

实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。......阅读全文

免疫组织化学技术实验标本介绍

实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理切片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一

免疫组织化学技术的标本来源

  组织标本主要取之于活组织检查标本、手术切除标本、动物模型标本以及尸体解剖标本等。前三者均为新鲜组织,后者是机体死亡2h以上的组织,可能有不同程度的自溶,其抗原可能有变性消失,严重弥散现象,因此,尸检组织应尽快固定处理,以免影响免疫组化标记效果。但有些较稳定性抗原,如HBsAg、HBcAg等在尸检

免疫组织化学技术的标本来源

  组织标本主要取之于活组织检查标本、手术切除标本、动物模型标本以及尸体解剖标本等。前三者均为新鲜组织,后者是机体死亡2h以上的组织,可能有不同程度的自溶,其抗原可能有变性消失,严重弥散现象,因此,尸检组织应尽快固定处理,以免影响免疫组化标记效果。但有些较稳定性抗原,如HBsAg、HBcAg等在尸检

免疫组织化学技术的应用介绍

免疫荧光组织化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一,是由Coons和他的同事(1941)建立,免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞(或组织)化学。它与葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素与卵白素、植物血凝素(ConA等)相结合拓宽了领域;与激光技术、电子计算机,扫描电视和双光子显微镜等技

免疫组织化学技术的相关介绍

  免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种

免疫组织化学技术的技术特点

免疫组织化学技术又称为免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗原或抗体在组织细胞原位通过抗原抗体的免疫反应和组织化学的呈色反应,对相应的抗原或抗体进行定性、定位、定量测定的一项免疫学检测方法。

免疫组织化学法实验

实验方法原理 实验材料 在3〜5 cm培养皿上生长的单层细胞(培养皿越小所需的抗体就越少 但培养皿应适合显微镜下观察)试剂、试剂盒 VPBS 40℃2% (m V)高聚甲醛(PFA)固定液 4℃ 用于细胞表面抗原固定100%甲醇 -10〜-20℃ (置于冰箱的结冻室冷却较为理想);或含0.1

亲和免疫组织化学实验

实验方法原理 ABC 法即亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法,是许世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基础上改良的,其特点是利用亲和素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。ABC 法与 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗体不为生物素所标记,生物素标记的第二抗体与

免疫组织化学技术简介

免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原((多肽和蛋白质)

免疫组织化学技术原理

1. 免疫荧光细胞化学技术将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.2. 免疫酶细胞化学技术是免疫组织化学研究中最常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或

脱落细胞检查技术/标本采集/标本制作

脱落细胞检查技术: 一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种

尿液标本接种实验

1、涂片检查:一般细菌涂片:以无菌操作取尿 5-10 ml 放入无菌管中,经 3000 r/min 离心 30 min 后,倾去上清液,取沉渣,涂片,革兰氏染色,镜检。如发现有革兰氏阴性或阳性细菌,即可做出报告。2、尿细菌培养:临床多采用中段尿做细菌培养,应做菌落计数,培养结果才有诊断价值。(1)平

尿液标本接种实验

实验方法原理尿路感染是一种比较常见的疾病,是大量微生物在尿道生长繁殖而引起的炎性病变,尤其在妇女及儿童中更为常见,临床上常采用尿细菌培养鉴定及药敏检测的方式对尿路感染进行诊断,但治疗时间长,不利于患者及时接受治疗。而尿液细菌直接涂片镜检的检测时间短且简单可行,得出结果迅速准确,根据菌体形态、染色等对

实验动物实验标本的采集实验

(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。②眼眶后静脉丛采血:一手拇指及食指抓住鼠两耳之

显微标本制作技术

一、实验原理 显微标本的制作技术是组织学,胚胎学,生理学及细胞学等学科研究观察细胞、组织的生理、病理形态变化的一种主要方法。大多数的生物材料,在自然状态下是不适合显微观察的,也无法看到其内部结构。因为材料较厚,光线不易透过,以致不易看清其结构,另外细胞内的各个结构,由于其折射率相差很小,即使光线可透

显微标本制作技术

一、实验原理 显微标本的制作技术是组织学,胚胎学,生理学及细胞学等学科研究观察细胞、组织的生理、病理形态变化的一种主要方法。大多数的生物材料,在自然状态下是不适合显微观察的,也无法看到其内部结构。因为材料较厚,光线不易透过,以致不易看清其结构,另外细胞内的各个结构,由于其折射率相差很小,即使光线可透

免疫学实验免疫组织化学染色法介绍

免疫组织化学染色法介绍:  免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多

免疫组织化学(immunohistochemistry)技术的基本原理介绍

  根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰

实验动物组织标本的制备实验

实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2

痰标本处理实验

实验步骤1、一般细菌涂片检查:挑选痰液中脓性或带血部分,涂成均匀薄片,行革兰氏染色,镜检。根据其细菌形态,排列和染色性,大致可以初步推定菌属(或种)如镜见排列成葡萄状的革兰氏阳性球菌,可报告为:「找到革兰氏阳性球菌,形似葡萄球菌」;如见到爪子仁形或矛头状的尖端相背,成双排列,具有明显荚膜的革兰氏阳性

痰标本处理实验

1、一般细菌涂片检查:挑选痰液中脓性或带血部分,涂成均匀薄片,行革兰氏染色,镜检。根据其细菌形态,排列和染色性,大致可以初步推定菌属(或种)如镜见排列成葡萄状的革兰氏阳性球菌,可报告为:「找到革兰氏阳性球菌,形似葡萄球菌」;如见到爪子仁形或矛头状的尖端相背,成双排列,具有明显荚膜的革兰氏阳性球菌时,

血液标本的采集实验

仪器、耗材采血针带刃的三枝针注射器止血带实验步骤1、毛细血管采血法采血部位:WHO推荐采取末梢血以手中指或无名指尖内侧为宜。我国有的地方仍采耳垂血、但其血循环较差。受气温影响较大。采血条件不及手指恒定。因此,采耳垂时要注意局部按摩、改善血循环。半岁以下婴幼儿耳垂和手指太小,通常向拇趾或足根采取。一、

免疫电镜标本固定实验

实验步骤1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力,详见有关书籍。灌注固定一般维持 10~15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即投入到固定液中,

免疫电镜标本固定实验

实验方法原理 实验步骤 1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力,详见有关书籍。灌注固定一般维持 10~15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即

亲和免疫组织化学实验——ABC-法

实验方法原理ABC 法即亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法,是许世明于 1981 年在 BAB 法和 LAB 法的基础上改良的,其特点是利用亲和素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。ABC 法与 LAB 法、BAB 法不同的是第一抗体不为生物素所标记,生物素标记的第二抗体与 ABC 复合物

亲和免疫组织化学实验——-CSA法

实验方法原理催化信号放大系统(catalyzed signal amplification system,CSA),也称酿胺信号放大(tyramine signal amplification system,TSA)或称 CARD(catalyzed repoter deposition)。该方法的

亲和免疫组织化学实验——LSAB-法

实验方法原理LSAB 法或称 S-P 法、SABC 法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有 HRP 或 AKP 酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量 60000,不含糖链,等电点 pI 为 6.0~6.5

生物实验室技术规范​标本的安全操作规范

标本的安全操作1、标本收集  收集标本的容器要求坚固,最好使用塑料制品以防止意外坠落或冻融过程中破损。标本在容器内不得超过总体积的50%,盖子或塞子盖好后无泄漏,在容器外无残留物。容器上粘贴标签以便于识别。标本要求或说明书与标本分开放置,并置于防水袋中。2、标本运输  标本在设施内运输或传递要求使用

病毒透射电镜病毒标本制备实验——负染色技术

实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象,即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色,即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮,从而清楚地显示出被衬物的

免疫组织化学技术的应用范围

免疫组织化学技术又称为免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗原或抗体在组织细胞原位通过抗原抗体的免疫反应和组织化学的呈色反应,对相应的抗原或抗体进行定性、定位、定量测定的一项免疫学检测方法。