应用APAAP免疫染色和原位杂交进行序列的MAC分析实验

实验方法原理实验材料用于分析的空气干燥的细胞铺试剂、试剂盒甲醛缓冲的丙酮固定剂PBSFBS兔抗鼠Ig抗血清溶液APAAP 底物溶液5 % 的吉姆萨染液乙醇甲醇 冰乙酸固定剂生物素或地高辛标记的重复序列探针Harris苏木素染液氨水溶液仪器、耗材Coplin 缸封片媒介细胞离心涂片器过滤器保湿盒过滤膜装有照相机的明视野显微镜配有相机的显微镜实验步骤展......阅读全文

应用-APAAP-免疫染色和原位杂交进行序列的-MAC-分析实验

实验方法原理实验材料用于分析的空气干燥的细胞铺试剂、试剂盒甲醛缓冲的丙酮固定剂PBSFBS兔抗鼠Ig抗血清溶液APAAP 底物溶液5 % 的吉姆萨染液乙醇甲醇 冰乙酸固定剂生物素或地高辛标记的重复序列探针Harris苏木素染液氨水溶液仪器、耗材Coplin 缸封片媒介细胞离心涂片器过滤器保湿盒过滤膜

细胞组分的分析方法——核酸序列的原位杂交

一.基本原理  核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一,是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的一种手段。DNA分子是高度有序的双键分子。一条链的碱基与另一条链的碱基以氢键配对相连.形成腺嘌呤与胸腺嘧啶(A.T),鸟嘌呤与胞嘧啶(G

用非同位素探针进行原位杂交和检测实验——荧光原位杂交

实验方法原理实验材料载有样本的载玻片试剂、试剂盒 20〜150 ng非同位素标记的DNA探针去离子的甲酰胺l0 mg mL经超声处理的鲑精DNA主杂交混合液50% (V V)甲酰胺(未去离子)SSCpH 7.0生物素检测液或地高辛检测液或生物素 地高辛检测液0.1% (V V) Triton ×-1

荧光免疫染色和DAPI染色实验步骤

免疫染色实验方法和步骤免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)、免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等,可以参考如下步骤进行操作。 1. 样品准备(Sample

用非同位素探针进行原位杂交和检测实验

实验方法原理 实验材料 载有样本的载玻片试剂、试剂盒 20〜150 ng非同位素标记的DNA探针去离子的甲酰胺l0 mg mL经超声处理的鲑精DNA主杂交混合液50% (V V)甲酰胺(未去离子)SSC pH 7.0生物素检测液或地高辛检测液或生物素 地高辛检测液0.1% (V V) Tr

用非同位素探针进行原位杂交和检测实验

荧光原位杂交 杂交信号的放大 地高辛标记探针的信号放大             实验方法原理 实验材料

核酸序列分析实验

实验方法原理针对核酸序列的分析就是在核酸序列中寻找基因,找出基因的位置和功能位点的位置,以及标记已知的序列模式等过程。在此过程中,确认一段 DNA 序列是一个基因需要有多个证据的支持。一般而言,在重复片段频繁出现的区域里,基因编码区和调控区不太可能出现;如果某段 DNA 片段的假想产物与某个已知的蛋

通过序列杂交和条形码进行单细胞原位分析

  现代系统生物学有两种革新技术:基因组学和单细胞生物学,前者具备同时监测生物体中所有基因和蛋白质的能力,后者则可以在自然微环境中跟踪单细胞的一些特定基因。  两种技术都很强大,但具有互补的局限性:基因组学平均了一个细胞群的异质性和空间复杂性,而单细胞技术一次只能探测几个基因。因此,将基因组学与单细

原位杂交的定义和应用

原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。

蛋白质序列分析和结构预测实验

实验步骤1.  人脂联素蛋白质序列的检索(1)调用Internet浏览器并在其地址栏输入Entrez网址(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Entrez);(2)在Search后的选择栏中选择protein;(3)在输入栏输入homo sapiens adiponectin;(

蛋白质序列分析和结构预测实验

蛋白质序列分析和结构预测实验             实验步骤 1.  人脂联素蛋白质序列的检索(1)调用Internet浏览器并在其

蛋白质序列分析和结构预测实验

实验步骤 1.  人脂联素蛋白质序列的检索(1)调用Internet浏览器并在其地址栏输入Entrez网址(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Entrez);(2)在Search后的选择栏中选择protein;(3)在输入栏输入homo sapiens adiponectin;

回文序列的特点和应用

遗传学上讲的回文序列指的是双链DNA或RNA分子中的特定的核苷酸片段,该片段在其中一条链上按5'到3'读取的序列与其互补链上按相同的5'到3'读取的序列一致。回文序列的单链DNA或RNA,存在对称中心,对称中心两侧碱基关于该对称中心对称,可形成互补。故回文序列能够形成

SD序列的特点和应用

Shine-Dalgarno (SD)是细菌和古细菌中信使RNA中核糖体结合位点序列。通常位于翻译起始密码子AUG上游约8~10个碱基位置。SD序列帮助招募核糖体RNA,并将核糖体比对并结合到信使RNA(mRNA)的起始密码子,从而开始蛋白质合成。一旦被招募,tRNA可以按照密码子的指令顺序添加氨基

原位杂交技术原理和应用

  原理:  荧光,又作“萤光”,是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后进入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。

荧光原位杂交体植入的应用实验

荧光原位杂交体植入的应用实验PBl、PB2 标本的制备 1.在 50 mL 培养瓶准备新鲜固定液(甲醇:冰乙酸=3:1),在冰柜中保存备用。 2.将毛细吸管在小型喷灯的火焰上拉出内径约 50pm 的尖,内径太大可能会丢失极体。 3.加几滴固定液再处理预先处理过的玻片以清除可能存在的油脂或灰尘,用无尘

ALKALINE-PHOSPHATASE-(APAAP)-TECHNIQUE

Preparation: Cytological PreparationsFixation: Air dry films or cytospin preparations overnight at room temperature. For frozen and paraffin sections

重组MVA活体免疫染色实验

实验方法原理活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰/乙醇抗外源基因表达蛋白一抗辣根

重组MVA活体免疫染色实验

基本方案             实验方法原理 活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记

重组MVA活体免疫染色实验

实验方法原理 活体免疫染色可用于检测改造的痘苗病毒Ankara (MVA),因为MVA不能形成分开的、易辨认的噬斑,并且这种技术不需要利用筛选的标记基因。实验材料 汇片生长的CEF细胞试剂、试剂盒 完全 MEM-2、MEM-2.5 和 MEM-10 培养基转染细胞裂解液干冰/乙醇抗外源基因表达蛋白一

用非同位素探针进行原位杂交和检测实验——杂交信号放大

实验材料载有样本的载玻片试剂、试剂盒1〜3μg ml生物素酰化抗亲和素抗体 溶于4×SSC 1% (m V) BSA (组分 V)生物素信号放大溶液:含2〜5μg ml荧光素亲和素DCS 溶于 4×SSC 1% (m V) BSA (组分V)仪器、耗材广口瓶载玻片湿盒实验步骤1) 用生物素酰化探针与

电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

实验材料 冻干的纯化蛋白样品试剂、试剂盒 甲酸氢溴酸过氧化氢NaOH 固体仪器、耗材 旋转蒸发器小试管实验步骤 1.加入 100ul 过氧化氢到 900ul 甲酸中,在室温下放置让,将反应产生过甲酸 (HCOOOH)。2.在冰上冷冻过甲酸至 0°C。3.在预冷的小试管中,将蛋白质溶解于 50ul 过

电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

方案1 蛋白质的过甲酸氧化实验 方案2 蛋白质还原和S-羧甲基化:大规模方法 方案3 蛋白质还原和S-羧甲基化:微量方法 方案4 用Ellman 试剂测定自由巯基和二硫键实验 方案5 蛋白质的胰酶消化实验 方案6 用溴化氰切割 M

原位杂交的应用

①细胞特异性mRNA转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;②感染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位,如EB病毒mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病毒DNA的检测;③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;④基因在染色体上的定位;⑤检测染色体的变化,如染色体数

荧光原位杂交技术原理和应用特点

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结

荧光原位杂交(FISH)技术的应用与实验流程

分子诊断是诊断市场增长最快的部分。萤光原位杂交和FISH分析包括700万人口的5亿美元的市场。。FISH市场预计为11%,较去年同期成长为下一个五年。400至500万人口的市场,在美国产生。FISH测试是用来识别生物标记DNA / RNA的形式。它是用于遗传作图和基因表达分析公知的方法。这种

原位杂交实验仪的用途和特点

  产品用途:  原位杂交仪采用微处理技术结合PID控制方式,实现12张玻片的变性和杂交过程。密封式上盖和加湿部件确保杂交环境更加理想,集成了变性/杂交,杂交,多步运行三种操作模式,适用于多种原位杂交实验。  产品特点:  1.支持断电恢复功能,运行过程中出现意外断电,在电力恢复后可按原定程序自动恢

序列分析仪的原理和用途

中文名称序列分析仪英文名称sequencer;sequenator定  义测定有序线性聚合物(如DNA、寡肽等)基本组成单位残基(核苷酸、氨基酸)排列顺序的仪器设备。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

毗邻序列分析的方法特点和作用

中文名称毗邻序列分析英文名称nearest neighbor sequence analysis定  义分析核酸链中某核苷酸与其他核苷酸相邻频率的技术。即用5′-α-32P标记的某核苷三磷酸为底物参入核酸链,然后用特定的酶降解此核酸链生成3′核苷酸,则原来在某核苷酸5′侧的32P就转到相邻核苷酸的3

正常角膜缘干细胞的免疫染色实验

正常角膜缘干细胞的免疫染色试剂和材料:1. 一抗:(1) ABCG2-----------------小鼠单克隆BXP-21---------1:100(2) 连接蛋白-43-----------兔多克隆CX43-------------1:100(3) 细胞角蛋白3(K3)-----小鼠单克隆AE