PCR技术概论

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。 PCR技术简史 PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术,Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。PCR的实现 1985年美国PE-Cetus公司......阅读全文

PCR技术概论

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一

PCR技术(一):PCR技术概论

  PCR技术概论PCR技术简史PCR技术的基本原理PCR反应体系与反应条件PCR反应特点PCR扩增产物的分析  聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出

入门:PCR技术概论

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一

贫血概论

凡单位容积血液内血红蛋白低于正常参考值下限即为贫血。成年男性

色谱泵使用操作的技术要点分析阐述概论

为了延长色谱泵的使用寿命和维持其输液的稳定性,必须按照下列注意事项进行操作:防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相zui好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2m或0.4

光学薄膜概论

光学薄膜概论光学工业除了镜片的研磨,系统之设计以外,有一项科技是发展高级光学仪器所不可缺的,就是光学薄膜的蒸镀技术。何谓光学薄膜,就是在镜片上镶上一层或多层非常薄的特殊材料,使镜片能达到某种特定的光学效果。我们所常见的太阳眼镜,抗反射镜片就是一个光学薄膜在日常生活上zui简单的应用 。其他如各种反射

仪器分析概论(二)

二.电化学分析法电化学分析法是根据被测物质溶液的各种电化学性质(电极电位、电流、电量、电导或电阻等)来确定其组成及其含量的分析方法。1.电位分析法是用一个电极电位与被测物质活(浓)度有关的指示电极和另一个电位保持恒定的参比电极与试液组成化学电池,根据测量电池电动势或指示电极电位进行分析的方法称为电位

离心机概论

离心机是利用离心力,分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械。   离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开;或将乳浊液中两种密度不同,又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油);它也可用于排除湿固体中的液体,例如用洗衣机甩干湿衣服;特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合

仪器分析概论(一)

仪器分析法根据被测量的物理和物理化学性质可分为以下几类:光学分析法电化学分析法色谱分析法质谱分析法热量分析法放射化学(又称活化)分析法分析化学是研究物质的化学组成,测定有关成分的含量以及鉴定物质化学结构的科学。随着科学技术的发展,分析化学分支为化学分析和仪器分析。其中化学分析是以化学反应为基础的分析

抗菌药物概论

第三十四章   抗菌药物概论第一节  抗菌药物与化学疗法一、            常用术语1、抗菌药:对病原菌有抑制或杀灭作用,用于防治细菌感染性疾病的药物。仅抑制病原菌生长繁殖而无杀灭作用的药物为抑菌药。不仅抑制病原菌的生长繁殖,而且具有杀灭作用的药物为杀菌药。2、抗菌谱:抗菌药的抗菌范围。又分

PCR技术-PCR技术的应用

  一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。

PCR技术-PCR技术的应用

  一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。

PCR技术-PCR技术的应用

一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也

滴定分析法概论

  滴定分析法和滴定方式  1.化学计量点、滴定终点、滴定误差(TE)的概念要知道  滴定误差(TE):取决于滴定反应的完全程度和指示剂的选择是否恰当。  滴定曲线的特点:(1)曲线的起点取决于被滴定物质的性质或浓度,一般被滴定物质的浓度越高,滴定曲线起点越低(2)滴定开始时,曲线平缓;至化学计量点

PCR技术(六):PCR技术应用进展

PCR技术自1985年建立以来,发展之迅速、应用之广泛,表明其具有强大的生命力.近些年来,基于PCR的基本原理,许多学者充分发挥创造性思维,对PCR技术进行研究和改进,使PCR技术得到了进上步地完善,并在此基础上派生出了许多新的用途. 原位PCR技术  原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应,它结

PCR技术(七):mRNA差异PCR技术

生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因,而主 基因在某个特定的细胞中,只有占15%的一小部分表达。而且在不同的细胞中,选择性表达的基础也是不同的。正是这些基因的选择不同决定了整个生命的过程:如细胞的生长分化,激素和细胞困子对细胞的作用、

激光清洗技术概论及其在轮胎业上的应用

一、引言在工业生产、文物保护以及牙科疾病的治疗中,常常需要用到清洗技术。例如:工业制品在电镀、磷化、喷涂、焊接、包装以及集成线路的装配时,为保证下道工序中工件的质量,必须除去产品表面上的油脂、灰尘、锈垢或残留的溶剂、粘结剂等污物。由于环境污染和保护不善等原因,很多的文物和艺术品正逐渐被锈蚀和污损,为

PCR技术

 PCR常见问题总汇 PCR产物的电泳检测时间  一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带  PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。  模板:①模

PCR技术

   PCR技术www.runwelltac.comPCR技术的基本原理与操作流程聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,为zui常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿

PCR技术

1 导论 多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是美国Perkin-Elmer/Cetus公司人类遗传研究室Mullis K. B.等人于1985年发明的一种快速体外DNA片段扩增技术,是八十年代分子生物学资源领域的一项革命性突破,被誉为分子生物学资源发展史上

PCR技术

            实验方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依赖于DNA聚合酶的酶促反应。PCR技术的特异性取决于引物和模板结合的特异性。反应分为变性、退火、延伸三步,经过一定的循环,介于两个引物之间的特异DNA片段得到大量扩增。 

PCR技术

实验方法原理 PCR是在模板DNA、引物和dNTPs的存在下依赖于DNA聚合酶的酶促反应。PCR技术的特异性取决于引物和模板结合的特异性。反应分为变性、退火、延伸三步,经过一定的循环,介于两个引物之间的特异DNA片段得到大量扩增。实验材料 转基因水稻叶片DNA引物试剂、试剂盒 矿物油MgCl2Pri

PCR技术(十四):反向PCR

描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法,使在已知序列的核心区边侧的未知 DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA,以产生适合于PCR扩 增大小的片段,然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区 的末端序列,但其方向性,使链的延长经过环上的未知区而不是分开引

溶血性贫血概论

1)定义、分类 溶血性贫血是限指那些红细胞呈病理性的破坏增加,而骨髓对贫血的刺激反应良好的疾病,即是以红细胞的破坏和活跃的红细胞生成同时并存为特征的一组疾病。正常骨髓其红系统增生的能力可以达到正常时的6到8倍。所以,红细胞的寿命从正常的120天降低到15-20天时仍无贫血发生,此称为代偿性溶血性疾病

分配色谱仪概论

分配色谱仪是利用被分离组分在固定相和流动相中的溶解度差别进行分离的。一、固定相:分配色谱仪的固定相由载体和固定液组成。1、载体:为表面积大的惰性物质,起负载一定量固定液的作用。常用载体有吸水硅胶、纤维素和多孔硅藻土等。2、固定液:应是样品的良好溶剂,不溶或难溶于流动相。3、化学键合相固定相:分配色谱

分配色谱仪概论

分配色谱仪是利用被分离组分在固定相和流动相中的溶解度差别进行分离的。一、固定相:分配色谱仪的固定相由载体和固定液组成。1、载体:为表面积大的惰性物质,起负载一定量固定液的作用。常用载体有吸水硅胶、纤维素和多孔硅藻土等。2、固定液:应是样品的良好溶剂,不溶或难溶于流动相。3、化学键合相固定相:分配色谱

肺念珠菌病概论

肺念珠菌病是念珠菌属引起的急性、亚急性或慢性支气管、肺部感染,多为院内感染。临床分为支气管炎型、肺炎型和过敏型。【诊断要点】见三级诊断标准。1.症状:咳嗽、咳白色粘液痰或脓痰、咯血、气急等。2.体征:检查口腔、咽部可见覆盖点状白膜,肺部可闻干、湿性啰音。3.辅助检查:胸片可见小片状或斑点状阴影,部分

PCR技术(十六):PCR产物测序

PCR技术代替了为测序而反复进行的分子克隆和模板制备步骤。PCR技术与自动测 序技术相结合后,它将成为一种最快、最有效的测定核苷权序列的方法。本章主要综 述各种测模板的制备以及如何完成PCR产物的直接测序。与传统的将PCR片段克隆入质 粒或病毒基因组相比,直接序列分析有两个主要的优点:1)由于它是一

免疫PCR技术(ImmunoPCR)

免疫PCR技术(Immuno-PCR) 免疫PCR方法(Immuno-PCR)是Takeshi等1992年将免疫学反应和PCR技术相结合而创建的一种新的检测技术,具有抗原、抗体反应的特异性和PCR技术的高效性。它运用PCR的高度敏感性来放大抗原抗体反应的特异性,使实验中只需数百个抗原分子即可检测,甚