测序过程常见问题分析与解答
DNA测序样品用什么溶液溶解比较好? 答:溶解DNA测序样品时,用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应,需要一个最佳的 酶反应条件.如果DNA用缓冲液溶解后,在进行了测序反应时,DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体 系条件,造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客户在溶解DNA测序样品时使用TE Buffer。的确,TE Buffer能增加DNA样品保存期间的稳定性, 但TE Buffer对DNA测序反应有影响,根据我们的经验,我们还是推荐使用灭菌蒸馏水来溶解DNA测序样品。提供DNA测序样品时,提供何种形态的比较好? 答:我们推荐客户提供菌体,由我们来提取质粒,这样DNA样品比较稳定。 如果您要以提供DNA样品,我们也很欢迎,但一定要注意样品纯度和数量。 提供的测序样品为PCR产物时,特别需要注意DNA的纯度和数量。PCR产物应该进行切胶回收,否则无......阅读全文
测序过程常见问题分析与解答
DNA测序样品用什么溶液溶解比较好? 答:溶解DNA测序样品时,用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应,需要一个最佳的 酶反应条件.如果DNA用缓冲液溶解后,在进行了测序反应时,DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体 系条件,造成Taq酶的聚合性能下降。 有很多客户在
单细胞测序前期常见问题解答
目前,单细胞测序这项技术被应用的越来越多,领域包括了神经科学、肿瘤免疫、胚胎发育等等,您是否也计划着开展相关的研究呢?心中关于单细胞的疑惑就让古朵生物带您从常见问题出发,逐步拨开迷雾吧 1、为什么要做单细胞测序? 细胞与细胞之间的异质性,微环境里的细微差别,这些我们关注的信息都会被常规Bulk
移液器常见问题与解答大全
移液器是实验室里面最长使用的实验仪器之一,基本上每一个实验室人员都曾经或现在使用过移液器,因而也会遇到移液器使用时的一些问题。笔者总结归纳了移液器使用时常见的问题与解答大全,希望对于大家有所帮助:移液器使用时常见的问题与解答大全:问题可能原因提议移液器渗漏多道移液器吸嘴里不均衡的液体水平·吸嘴与移液
浓缩仪常见问题与解答
1、样品浓缩仪与氮吹仪的区别?答:样品浓缩和氮吹仪都是用氮气来进行吹扫,只是各厂家的命名不一样。2、如何能让实验速度更快、效率更高?答:样品浓缩仪的原理是通过提高样品的温度,使样品的溶剂在无氧状态下进行挥发,从而快捷高效的达到浓缩的目的。影响实验速度的原因有两个:1)加热的温度。2)气体的流量及气体
SWATH技术常见问题与解答
SWATH(Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra)采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX(全球领先的生命科学分析技术公司)的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术,科学家有史以来首次可
SWATH技术常见问题与解答
SWATH(Sequential Window Acquisition of all THeoretical Mass Spectra)采集模式是苏黎世联邦理工学院及AB SCIEX(全球领先的生命科学分析技术公司)的科学家联合推出的一项基于质谱应用的新技术。利用此项技术,科学家有史以来首次
eBioscience流式抗体常见问题与解答
1、eBioscience公司提供了哪些抗体? A:物种——人、小鼠、大鼠、非人灵长类、犬类等。检测指标——包括细胞表面标记(CD分子,膜骨架,趋化因子受体)和胞内指标(细胞因子,核内转录因子)。抗体标记——生物素标记抗体,亲和纯化抗体以及直标荧光素抗体。eB抗体的直标荧光素有(括号内是发射光波长
凝胶成像系统常见问题分析解答
1、凝胶成像系统的原理? 样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。 样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所
凝胶成像系统常见问题分析解答
1、凝胶成像系统的原理?样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品
测序常见问题及其分析
1、PCR 产物测序时出现重叠峰问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序结果移码)解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进行测序。问题图2(PCR 产物不纯,
测序常见问题及其分析
1、PCR 产物测序时出现重叠峰 问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序 结果移码) 解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE 纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进
测序常见问题及其分析
1、PCR 产物测序时出现重叠峰 问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序 结果移码) 解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE 纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进
细胞培养常见问题与解答2
8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么?丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。9.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?GIBICO的胎牛血清 没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白
CST抗体-Western-Blot常见问题与解答
1.Problem:高背景(曝光1-30秒后,背景高或无特异性蛋白带) 2.Problem:信号弱(1-30秒的曝光后检测不到信号) 3.Problem:无着色 4.Problem:着色太浅 5.Problem:着色太深 6.
细胞培养常见问题与解答4
22.在High Five无血清培养基中去污剂的浓度是多少? High Five无血清培养基中去污剂的浓度:0.025 g/L Tween-80,1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five细胞用多大的密度冻存? 3.0x10E6 ce
噬菌体展示技术常见问题与解答
1、在噬菌体展示技术的应用中,M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点? M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体,它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开
细胞培养常见问题与解答3
15.如何检测内毒素(热源)水平? LAL(Limulus Amebocyte Lysate)试验是可用的最敏感和特异的检测细菌内毒素的方法。Levin和Bang 发现细菌可引起鲎(Limulus polyphemus)血管内的凝集作用。内毒素启动一个细胞内酶原系统(丝氨酸蛋白酶级
细胞培养常见问题与解答1
1.为什么要热灭活血清?加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。2.如何用台盼兰计数活细胞?用无血清培养基把细胞悬液稀释到200-2000个/毫升,在0
免疫荧光技术常见问题与解答
1、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项? 参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是: (1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-F
测序常见问题及其分析(图)
1、PCR 产物测序时出现重叠峰问题图1【模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序结果移码】图1-1解决方法:将PCR产物克隆到质粒(如T载体)中挑单克隆测序,或将PCR产物进行PAGE纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进行测序。问题图2(PCR产物不纯,
烟气分析仪常见问题解答
烟气分析仪常见问题解答 Q1.什么是燃烧?燃烧的要素有哪些? A1.燃烧是燃料(可燃物质)和氧气发生化学反应以释放能量的过程,燃烧的要素有燃料和氧气等。 Q2.固体燃料、液体燃料、气体燃料都有哪些? A2.固体燃料有煤、泥炭、木材、麦杆,基本上含碳(C)、氢(H)、氧(O)以及少量的硫(
荧光定量PCR仪使用过程常见问题解答
定量PCR仪的开关机顺序是怎样的?按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率。开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验。关机顺序:确认实验已经结束后,首先关闭信号收集软件,然后关掉定量PCR
细胞冻存常见问题与解答FAQ2
14、DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO 等级, 必须为Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650), 其本身即为无菌状况, 第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中, 保存于4°C, 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质,
伺服电机与步进电机常见问题解答
电子式试验机与微机控制电子式试验机、电子式拉力试验机上都需要用到电机,一般低端的选用步进电机,的选用伺服电机。下面就伺服电机和步进电机常见几个问题做下解释。1、如何正确选择伺服电机和步进电机? 主要视具体应用情况而定,简单地说要确定:负载的性质(如水平还是垂直负载等),转矩、惯量、转速、精度、加
细胞冻存常见问题与解答FAQ1
细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。2、可否使用
菌落总数检测过程中TTC添加常见问题解答
从事微生物检测的朋友都知道,在菌落总数检测时,经常添加TTC这种物质,哪什么是TTC?添加TTC又有什么作用?TTC: 俗称红四氮唑,学名2,3,5-三苯基氯化四氮唑,化学式如下:在菌落总数检测时,添加TTC可以起到两方面的作用:其一,TTC可以使菌落显红色,便于区分菌落和杂质,更利于计数;其二,
使用胎牛血清过程中常见问题解答
细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理? 一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。 如果在镜下观察细胞,生长状态良好
制袋机吹膜机操作过程中常见问题解答!
28、平口机冷切刀切不断料需怎么处理?1:根据袋子的厚薄调节刀的重力和平衡点 2:刀不利;重新磨刀29、设备主要保修那些部件保修多久?整机免费保修一年;易耗件除外; 如(伺服电机、驱动、电脑、静电器等)保修一年易耗件:红绒布、发热板。弹簧、切刀、发热圈 30、四色印刷机可以单面印二个色?可
能力验证常见问题及解答
一、 CNAS-RL02《能力验证规则》中基本要求的相关问题 : 申请认可时,是否必须参加能力验证?参加能力验证的最低要求是什么? CNAS-RL02《能力验证规则》4.2.3款规定“只要存在可获得的能力验证,合格评定机构初次申请认可的每个子领域应至少参加过1次能力验证且获得满意结果(申请认
抗体常见问题解答
Q&A 常见问题: 如何选择合适的一抗? 如何选择合适的二抗? 如何选择合适的同型对照? 如何选择阳性对照? 如何确定一抗的稀释比例? 如何选择合适的抗原修复方式? 为何WB检测条带大小与预期有差别? 抗体能够用于其他种属/实验