用异硫氰酸胍和有机溶剂提取ＲＮＡ
收集细胞，离心5000r/min ，5分钟，弃上清，加入异硫氰酸胍变性液（异硫氰酸胍4mol/L；柠檬酸钠25mmol/L，Sarkosy10.5%,β-巯基乙醇0.1mol/L）500ml，混匀，振荡10秒，加2 mol/L醋酸钠50ml，水饱和酚500m l和氯仿/异戊醇（49：1）100m l颠倒混合数秒钟，冰浴15分钟，4℃离心10,000 r/min，15分钟，吸取上清，加入等体积异丙醇或2倍体积无水乙醇，4℃离心10,000 r/min，10分钟，弃上清，70%酒精洗涤一次，抽干，加35mlDEPC处理水溶解，取5ml经稀释后紫外测定RNA提取量，其余30ml分装，-20℃保存备用。......阅读全文
利用有机溶剂脱水和共沸蒸馏纳米颗粒分散技术
一、共沸蒸馏在纳米颗粒形成的湿凝胶中加入沸点高于水的醇类有机物。混合后进行共沸蒸馏，可以有效地除去多余的的水分子，消除了氢键作用的可能，并且取代羟基的有机长链分子能产生很强的空间位阻效应，使化学键合的可能性降低。 二、偶联剂法 偶联剂具有两性结构，其分子中一部分基团可与颗粒表面的各种官能团反应，形成
有机溶剂过滤器的使用和维护要注意了
有机溶剂过滤器的原理和方法是利用滤膜过滤流动相溶液中的杂质，使用真空泵加快过滤的速率。其中，起关键性作用的就是滤膜，滤膜分为有机和水系这两种，滤膜种类的选择根据过滤流动相溶液的性质而不同。水系滤膜适用于水基溶液，不耐有机溶剂，具有较高的化学和热稳定性，流速快、耐酸碱能力强，具有高机械强度，对蛋白质
DNA的提取和纯化
1 DNA提取⑴ 新鲜外周静脉血3~5ml，以ACD（柠檬酸纳缓冲液）1/7体积抗凝；⑵ 3500rpm 15分钟离心，吸除上层血浆；⑶ 加5倍体积蒸馏水（灭菌），摇匀，静置5~10分钟，3500rpm15分钟离心，去上清，（若沉淀不够，可重复1~2次）；⑷ 吸取沉淀（少许液体）放入1.5ml离心管
DNA和RNA提取原理
TRIzol试剂有多组分分离作用,与其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚／SDS法、盐酸胍法、硫氰酸胍法等相比，最大特点是可同时分离一个样品的RNA\DNA\蛋白质．TRIzol使样品匀浆化，细胞裂解，溶解细胞内含物，同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性。在加入氯仿离心后，溶液分为水相和有机相，R
RNA－和－DNA－提取：洗脱
DNA 提取方案的还剩余IDE步骤步就是从硅胶中释放纯 DNA 或 RNA。对于 DNA 制备,通常使用 pH 值为 8-9 的 10 mM Tris。DNA 在弱碱性 pH 值下更稳定,在缓冲液中溶解得更快。即使对于 DNA 颗粒也是如此。水的 pH 值往往较低,低至 4-5,并且高分子量 DNA
Northern杂交试验指导手册
Northern杂交试验指导手册DIG标记的Northern杂交试验指导一、 RNA提取方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液：贮存液－在含484ml 水（经DEPC处理）, 17.6ml 0.75mol/L柠檬酸钠（pH7.0）和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入25
有机溶剂的配制方法
带有脂肪性污物的器皿，可以用汽油、甲苯、二甲苯、丙酮、酒精、三氯甲烷、 乙醚等有机溶剂擦洗或浸泡。但用有机溶剂作为洗液浪费较大，能用刷子洗刷的大件仪器尽量采用碱性洗液。只有无法使用刷子的小件或特殊形状的仪器才使用有机溶剂洗涤，如活塞内孔、移液管尖头、滴定管尖头、滴定管活塞孔、滴管、小瓶等。
有机溶剂水分检测方法
很多化工企业、生物企业等等都需要测量有机溶剂的水分大小。有机溶剂的品种多，水分通常比较小，一般选用卡尔费休库伦法测量水分大小。芳香烃类、脂肪烃类、脂环烃类、醚类、醇类、酯类等都可以使用库伦法水分测定仪。卡尔费休水分仪的试剂一般有三种：醛酮类试剂、库伦法试剂、容量法试剂。醛酮类物质需要配套专用
有机溶剂极性排列顺序
常用溶剂的极性顺序：水(最大）>甲酰胺>三氟乙酸>DMSO>乙腈>DMF>六甲基磷酰胺>甲醇>乙醇>乙酸>异丙醇>吡啶>四甲基乙二胺>丙酮>三乙胺>正丁醇>二氧六环>四氢呋喃>甲酸甲酯>三丁胺>甲乙酮>乙酸乙酯>三辛胺>碳酸二甲酯>乙醚> 异丙醚>正丁醚>三氯乙烯>二苯醚>二氯甲烷>氯仿>二氯乙烷>
常见有机溶剂极性表
有机溶剂是能溶解一些不溶于水的物质的一类有机化合物，其特点是在常温常压下呈液态，具有较大的挥发性，在溶解过程中，溶质与溶剂的性质均无改变。 有机溶剂的种类较多，按其化学结构可分为10大类： 1、芳香烃类：苯、甲苯、二甲苯等； 2、脂肪烃类：戊烷、己烷、辛烷等； 3、脂环烃类：
Northern杂交试验指导手册（1）－RNA提取
方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液：贮存液－在含484ml 水（经DEPC处理）, 17.6ml 0.75mol/L柠檬酸钠（pH7.0）和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入250g异硫氰酸胍，加热至60~65℃并持续搅拌使之充分溶解。贮存液室温保存备用（不超过3个
植物总RNA提取方法及过程介绍
目的:用于 Northern 杂交、纯化 mRNA、RT-PCR 及 DDRT-PCR 等。材料:植物油嫩组织器官或种子萌发的幼苗。1、异硫氰酸胍法(1)试剂①异硫氰酸胍溶液:4mol/L 二异硫氰酸胍,25mmol/L 柠檬酸钠(pH7.0),0.5%十二烷基肌氨酸钠,0.1mol/L 巯基乙醇。
用有机溶剂（乙醇等）作介质时要不要另加分散剂，为...
用有机溶剂（乙醇等）作介质时要不要另加分散剂，为什么？ 大部分有机溶剂作介质24. 颗粒"凝聚"的原因是什么？ 颗粒"凝聚"是指多个颗粒粘附到一起成为"团粒"的现象。"凝聚"的主要原因是颗粒所带的电荷、水份、范德华力等使颗粒相互作用的结果。颗粒越细，其表面能越大，"凝聚"的机会就越多。
植物组织总RNA的提取
实验概要由于RNA分子的结构特点，容易受RNA酶的攻击反应而降解，加上RNA酶极为稳定且广泛存在，因而在提取过程中要严格防止RNA酶的污染，并设法抑制其活性，这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA酶，人的皮肤、手指、试剂、容器等均可能被污染，因此全部实验过程中均需戴手套操作并经常更换（使用一
有机溶剂为何需要专用有机溶剂喷雾干燥机来操作
有机溶剂就是在有机物中呈现液态，我们常拿来溶解其他物质的液体。 为什么有机溶剂会易燃呢？因为有机溶剂是属于有机物，有机物都有C元素，C%越大，越容易燃烧，燃烧也越剧烈。 因此，大多数的有机物都能燃烧，当然这也包括了有机溶剂，当含有有机溶剂含量的物料需要进行喷雾干燥就要选择专业的有机溶
有机溶剂沉淀法浓缩蛋白质实验——有机溶剂沉淀法
实验方法原理将有机溶液例如丙酮和乙醇加入蛋白质溶液时，和高浓度盐类似产生沉淀，这是因为它们能够降低蛋白质的溶解度。在温度为 10 ℃ 左右时蛋白质在有机溶剂中容易变性，所以在沉淀时必须特别注意冷却溶液和离心转头（0 ℃～4 ℃ 为佳），建议离子强度为 0.05～0.2 mol/L。有机溶剂的浓度按体
动植物组织总RNA提取(Trizol法)和mRNA提取
一、材料 水稻叶片或小鼠肝组织。 二、设备 研钵，冷冻台式高速离心机，低温冰箱，冷冻真空干燥器，紫外检测仪，电泳仪，电泳槽。 三、试剂 1、无RNA酶灭菌水：用将高温烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小时）装蒸馏水，然后加入0.01%的DEPC（体积/体积），处理过夜后高
食品容器和包装材料残留有机溶剂的分析
提高分析效率的设计1、柱温箱快速升温/冷却 GC-2010 Pro配备了“双喷射冷却系统”，从而将450℃降至50℃的时间缩短至3.4分钟，实现了更为有效的快速冷却。2、支持高速分析 采用窄口径毛细管柱的快速分析可有效节约分析时间，改善样品的处理能力。GC-2010 Pro具有优异的流量和压力控制系
简述番茄红素的有机溶剂萃取的原理和工艺
原理：番茄红素是一种具有11个碳碳不饱和双键的脂肪烃，它不溶于水，难溶于甲醇、乙醇，可溶于乙醚、石油醚、己烷、丙酮，易溶于氯仿、二硫化碳、苯等有机溶剂。根据这一性质，可利用亲脂性有机溶剂从番茄中提取番茄红素。 工艺流程：番茄→捣碎成泥→烘干→粉碎→有机溶剂浸提→提取液→过滤→滤液→浓缩→粗品
实验室常识
1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？ 保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase
生化实验室15大常识
1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇? 保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DN
生化实验室15大常识
1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇? 保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制
前体脂肪细胞提取可以用幼体么
前体脂肪细胞系及原代培养的各种动物的脂肪基质微管细胞(SVF)是目前研究脂肪细胞增殖、分化的主要细胞模型.但这些细胞模型各有缺点:如3T3-L1细胞系来源于17～19日龄小鼠胚胎细胞,染色体非整倍体,不能很好的反映动物体内环境;原代培养的SVF虽然能够较好的模拟动物体内环境,但这种细胞纯度不高,不利
细胞DNA的提取一般用什么方法
高中：原理： 1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。 2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤： 1．提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 5 min 2．溶解DNA： 3．析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢 4．过滤：
大黄提取时为什么用乙醇不用甲醇
那是因为大黄提取物蒽醌在70%乙醇水溶液中溶解度最好，能够更充分地提取蒽醌。 大黄中蒽醌苷元，其结构不同，因而酸性强弱也不同。大黄酸连有-COOH，酸性最强；大黄素连有β-OH，酸性第二；芦荟大黄素连有苄醇-OH，酸性第三；大黄素甲醚和大黄酚均具有1,8-二酚羟基，前者连有-OCH3和-CH
萃取剂都是有机溶剂吗
不一定是有机溶剂~萃取剂就是用于萃取的溶剂 两种液体互不相溶，需要萃取的物质在两液体中溶解度差别很大的时候可以进行萃取。如四氯化碳加入溴水,溴单质就会从水中溶解入四氯化碳。 选用的萃取剂的原则: ① 和原溶液中的溶剂互不相溶; ② 对溶质的溶解度要远大于原溶剂; ③ 要不易于挥发; ④ 萃
关于有机溶剂的危害介绍
①神经毒性。以脂肪烃(正己烷、戊烷、汽油)、芳香烃（苯、苯乙烯、丁基甲苯、乙烯基甲苯）、氯化烃(三氯乙烯、二氯甲烷)，以及二硫化碳、磷酸三邻甲酚等脂溶性较强的溶剂为多见。有机溶剂对神经系统的损害大致有三种类型：第一种为中毒性神经衰弱和植物神经功能紊乱。病人可有头晕、头痛、失眠、多梦、嗜睡、无力、
有机溶剂浓缩蛋白质
蛋白质浓缩有多种方法，有盐析，超滤，离子交换，有机溶剂沉淀等方法有机溶剂沉淀法在多肽分离中用的特别多，现简要说明如下，希望对各位新虫有所帮助有机溶剂沉淀法：有机溶剂能降低溶液的电解常数，从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力，导致溶解度的降低；另外，有机溶剂与水的作用，能破坏蛋白质的水化膜，故蛋白质在一
逆流提取设备结构和特点
该逆流提取：由投料斗、旋转式提取筒、出渣螺旋输送器等组成。原料经粗粉碎、浸润后从投料斗投入，提取筒旋转，同时固定在提取筒内壁上的螺旋带将物料从机组前端向后缓慢推进，同时提取溶剂从机组末端的进液管进入提取筒内，由筒后端穿过移动的物料向前端流动，固液两相物质在这种逆向运动中充分接触，从而将药材中有效
RNA－的提取和纯化实验
虽然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位点，但并不推荐使用 poly(A)+RNA，因为在反转录反应中可能污染寡核苷酸，并因此增加假阳性的概率。所以建议使用总 RNA 做 FDD 分析。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒氯仿焦