用异硫氰酸胍和有机溶剂提取ＲＮＡ
收集细胞，离心5000r/min ，5分钟，弃上清，加入异硫氰酸胍变性液（异硫氰酸胍4mol/L；柠檬酸钠25mmol/L，Sarkosy10.5%,β-巯基乙醇0.1mol/L）500ml，混匀，振荡10秒，加2 mol/L醋酸钠50ml，水饱和酚500m l和氯仿/异戊醇（49：1）100m l颠倒混合数秒钟，冰浴15分钟，4℃离心10,000 r/min，15分钟，吸取上清，加入等体积异丙醇或2倍体积无水乙醇，4℃离心10,000 r/min，10分钟，弃上清，70%酒精洗涤一次，抽干，加35mlDEPC处理水溶解，取5ml经稀释后紫外测定RNA提取量，其余30ml分装，-20℃保存备用。......阅读全文
果胶的提取方法和原理
传统的工业果胶生产方法是酸提取法，所用的酸可以是硫酸、盐酸、磷酸等。为了改善果胶成品的色泽，也可以用亚硫酸。其基本原理是利用果胶在稀酸溶液中能水解，将果皮中的原果胶质水解为水溶性果胶，从而使果胶从桔皮中转到水相中，生成可溶于水的果胶。然后利用沉淀法或盐析法分离果胶，工业上常用金属盐析或有机溶剂（乙醇
酶的提取和分离纯化
(一)细胞破碎处理 许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶，首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多，主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指
RNA－的提取和纯化实验
虽然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位点，但并不推荐使用 poly(A)+RNA，因为在反转录反应中可能污染寡核苷酸，并因此增加假阳性的概率。所以建议使用总 RNA 做 FDD 分析。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒氯仿焦
RNA－的提取和纯化实验
试剂、试剂盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 异丙醇 苯酚-胍盐单相溶液 磷酸盐缓冲液
酶的提取和分离纯化
(一)细胞破碎处理 许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶，首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多，主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指利用
叶绿素的提取和分离方法
提取叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里，室温保持在25℃。提取步骤如下：(1) 取1000克新鲜的绿叶，在韦氏搅切器中粉碎。(2) 将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中（温度20℃）进行萃取，直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。(3) 将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100
RNA－的提取和纯化实验
试剂、试剂盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇异丙醇苯酚-胍盐单相溶液磷酸盐缓冲液仪器、耗材 离心机和转头移液器离心管锥形管平板匀浆器实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液（用 DEPC 处理过的 H20 配制）
总黄酮的提取和测定
实验原理黄酮类化合物是植物的重要次生代谢产物，也是一些保健品和中药材的有效成分之一。黄酮类化合物的定量方法常用的有 HPLC法和分光光度法，在实际生产和科研过程中，对于黄酮单体的定量常采用HPLC法，而对总黄酮的测定，考虑到方法的简便、快捷以及可行性，多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。在
逆流提取设备结构和特点
该逆流提取：由投料斗、旋转式提取筒、出渣螺旋输送器等组成。原料经粗粉碎、浸润后从投料斗投入，提取筒旋转，同时固定在提取筒内壁上的螺旋带将物料从机组前端向后缓慢推进，同时提取溶剂从机组末端的进液管进入提取筒内，由筒后端穿过移动的物料向前端流动，固液两相物质在这种逆向运动中充分接触，从而将药材中有效
生化实验室15大常识
1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇? 保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DN
实验室常识
1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇？ 保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase
生化实验室15大常识
1.在重蒸酚中为什么加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇? 保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入0.1%的8-羟基喹啉及少量巯基乙醇。8-羟基喹啉是带有淡黄色的固体粉沫，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制
萃取剂都是有机溶剂吗
不一定是有机溶剂~萃取剂就是用于萃取的溶剂 两种液体互不相溶，需要萃取的物质在两液体中溶解度差别很大的时候可以进行萃取。如四氯化碳加入溴水,溴单质就会从水中溶解入四氯化碳。 选用的萃取剂的原则: ① 和原溶液中的溶剂互不相溶; ② 对溶质的溶解度要远大于原溶剂; ③ 要不易于挥发; ④ 萃
有机溶剂浓缩蛋白质
蛋白质浓缩有多种方法，有盐析，超滤，离子交换，有机溶剂沉淀等方法有机溶剂沉淀法在多肽分离中用的特别多，现简要说明如下，希望对各位新虫有所帮助有机溶剂沉淀法：有机溶剂能降低溶液的电解常数，从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力，导致溶解度的降低；另外，有机溶剂与水的作用，能破坏蛋白质的水化膜，故蛋白质在一
关于有机溶剂的危害介绍
①神经毒性。以脂肪烃(正己烷、戊烷、汽油)、芳香烃（苯、苯乙烯、丁基甲苯、乙烯基甲苯）、氯化烃(三氯乙烯、二氯甲烷)，以及二硫化碳、磷酸三邻甲酚等脂溶性较强的溶剂为多见。有机溶剂对神经系统的损害大致有三种类型：第一种为中毒性神经衰弱和植物神经功能紊乱。病人可有头晕、头痛、失眠、多梦、嗜睡、无力、
俄研究用新方式改善基因疗法效果
如何使具有治疗作用的遗传物质顺利穿过靶细胞的内外膜，并且躲避细胞器的分解，是基因疗法成功与否的关键。俄罗斯科研人员发现，用一种蛋白质制作“密封船”运送少量遗传物质，有望获得更佳疗效。图片来源网络将核糖核酸（ＲＮＡ）或脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）等外源性遗传物质植入细胞的过程名为“转染”。此前研究发现
用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
实验方法原理 通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：氯仿抽提，就能从大规模制备的 λ 噬菌体中很好地分离到 DNA。该方法也适用于小量（50~100 ml ) 制备物。实验材料 蛋白酶 K限制性内切核酸酶λ 噬菌体颗粒试剂、试剂盒 氯仿透析缓冲液EDTA乙醇酚酚：氯仿SDS乙
用蛋白酶K和SDS从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：氯仿抽提，就能从大规模制备的 λ 噬菌体中很好地分离到 DNA。该方法也适用于小量（50~100 ml ) 制备物。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理通过一种有效的蛋白酶（如蛋白酶 K ) 的消化作用及随后的酚：
德研究人员找到可模拟合成生命起源关键分子新“配方”
生命如何在地球上起源是至今未解的问题，科学界认为ＲＮＡ（核糖核酸）在其中发挥着关键作用，但一直没找到模拟远古地球环境而合成ＲＮＡ的方法。科研人员近日找到一种新“配方”，可以用远古地球上存在的简单物质模拟合成ＲＮＡ的基本“模块”。 ＲＮＡ是重要的遗传物质，它被认为在原始生命的遗传信息传递和蛋白质
Northern杂交试验指导手册(1)
一、RNA提取方法一、改良异硫氰酸胍提取法试剂及其配制异硫氰酸胍变性液：贮存液－在含484ml 水（经DEPC处理）, 17.6ml 0.75mol/L柠檬酸钠（pH7.0）和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入250g异硫氰酸胍，加热至60~65℃并持续搅拌使之充分溶解。贮存液室温保存备
俄研究用新方式改善基因疗法效果
如何使具有治疗作用的遗传物质顺利穿过靶细胞的内外膜，并且躲避细胞器的分解，是基因疗法成功与否的关键。俄罗斯科研人员发现，用一种蛋白质制作“密封船”运送少量遗传物质，有望获得更佳疗效。 将核糖核酸（ＲＮＡ）或脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）等外源性遗传物质植入细胞的过程名为“转染”。此前研究发现，用特
有关PCR技术的dNTP的质量与浓度
dNTP的质量与浓度和PCR扩增效率有密切关系，dNTP粉呈颗粒状，如保存不当易变性失去生物学活性。dNTP溶液呈酸性，使用时应配成高浓度后，以1M NaOH或1M Tris。HCL的缓冲液将其PH调节到7.0～7.5，小量分装，-20℃冰冻保存。多次冻融会使dNTP降解。在PCR反应中，dNT
食品容器和包装材料残留有机溶剂的分析（GC）
食品包装材料和容器上的印刷油墨和粘合剂含有有机溶剂，因此，需对残留的有机溶剂进行质量控制。通常情况下，需对包装材料中的残留有机溶剂进行分析。顶空气相色谱法（利用顶空方式制备样品）为常用的分析技术。 岛津气相色谱仪GC-2010 Pro特点 提高分析效率的设计 1、柱温箱快速升温
食品容器和包装材料残留有机溶剂的分析（GC）
食品包装材料和容器上的印刷油墨和粘合剂含有有机溶剂，因此，需对残留的有机溶剂进行质量控制。通常情况下，需对包装材料中的残留有机溶剂进行分析。顶空气相色谱法（利用顶空方式制备样品）为常用的分析技术。岛津气相色谱仪GC-2010 Pro特点提高分析效率的设计1、柱温箱快速升温/冷却 GC-2010 Pr
机聚合材料中聚合单体和残留的有机溶剂的分析（顶...
有机聚合材料中挥发性有机物的分析 对于树脂（聚乙烯、聚苯乙烯等）和塑料等有机聚合材料中聚合单体和残留的有机溶剂的分析，目前主要采取顶空分析法．有机聚合材料对有机溶剂的吸附力强，用固体直接加热来进行分析很难达到顶空和固相间的平衡，而且这样的平衡难以重现，运用静态顶空一般加入稀释剂和基质改
用离心机提取乳酸脱氢酶及辅酶
台式离心机可以应用于乳酸脱氢酶及辅酶的提取。乳酸脱氢酶，是一种不需氧脱氢酶，以辅酶I（NAD﹢）为辅酶，催化乳酸与丙酮酸的可逆的氧化还原反应。肌肉中含有大量的乳酸脱氢酶，在乳酸含量较高及氧气充足情况下，催化乳酸生成丙酮酸，体外实验中，为观察方便，在隔绝空气后以甲烯蓝作为受氢体，井用固定反应中生成的
提取质粒用的5种buffer分别有什么作用
提取质粒用的5种buffer分别作用：buffer P1：除去RNA。buffer P2：裂解细胞。buffer P3：沉淀DNA。buffer WA、buffer WB：都是洗涤液。TE：溶解DNA。
中药材分析用样品制备方法超声提取法
超声波具有助溶作用,因此可用于样品中待测组分的提取。超声提取较冷法速度快,一般仅需数十分钟即可达到平衡。超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失,所以进行含量测定时,应于超声振荡前先称定重量,提取完毕后,放冷至室温,再称重,并补足减失的重量,滤过,取续滤液备用。超声提取法简便,不需加热,提取时间短,适用
中药材分析用样品制备方法回流提取法
回流提取法是将样品粉末置烧瓶中,加入一定量的有机溶剂,加热进行回流提取的方法。在加热条件下组分溶解度增大,溶出速率加快,有利于提取。回流提取法主要用于固体制剂的提取。提取前应将样品粉碎成细粉,以利于组分提出。提取溶剂沸点不宜太高,对热不稳定或具有挥发性的组分不宜采用回流提取法提取。回流提取法提取速度
索氏提取法和超声波提取法有什么不同
超声法：将样品至于玻璃容器中（不可用铁质或者金属容器），加溶剂，置于超声波仪器中，打开超声，一段时间后，取出过滤得到滤液。需要超声波仪器。 优点 1.提取效率高：超声波独具的物理特性能促使植物细胞组织破壁或变形，使中药有效成分提取更充分，提取率比传统工艺显著提高达50—500%； 2.提取