InGelDigestionofProteinsSeparatedbyPolyacrylamideGelElectrophoresis
1. Excision of protein bands (spots) from polyacrylamide gelsRinse the gloves you use with water to avoid traces of dust in your sample.Rinse the gel with water.Excise spots with clean pipette tip (f 2 mm) cutting as close to the edge of the spot as possible (to reduce the volume of ''background'' gel)Transfer gel spot into a well of a 96-microtitre plate (Costar # 3363 + 3092)2. Reduction and alkylat......阅读全文
Immunoprecipitation
实验概要In the IP method, the protein from the cell or tissue homogenate is precipitated in an appropriate lysis buffer by means of an immune complex
Bacic-Immunoprecipitation
实验概要 Immunoprecipitation (IP) is one of the most widely used immunochemical techniques. Immunoprecipitation followed by SDS-PAGE and immunoblotting,
毛细管凝胶电泳技术介绍
中文名称毛细管凝胶电泳英文名称capillary gel electrophoresis;CGE定 义将凝胶移到毛细管中作支持物进行的一种电泳。由于溶质分子体积不同,在起分子筛作用的聚合物内进行电泳时被分离。适用于生物大分子的分析及PCR产物分析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技
毛细管凝胶电泳定义和应用介绍
中文名称毛细管凝胶电泳英文名称capillary gel electrophoresis;CGE定 义将凝胶移到毛细管中作支持物进行的一种电泳。由于溶质分子体积不同,在起分子筛作用的聚合物内进行电泳时被分离。适用于生物大分子的分析及PCR产物分析。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF(二)
RapiGest SF虽然是一种表面活性剂,但其全面适应液质分析的要求。在使用RapiGest SF作为变性剂完成蛋白酶切后,如果只进行色谱分析,则可无需对RapiGest SF进行处理。如进行液质联用分析,则通过简单的加酸步骤就可将RapiGest SF去除。而酸性溶液环境又恰恰是液质
Infusion-biobrick-assembly
OverviewThis is a method to assemble two BioBricks using the Clontech In-Fusion PCR Cloning Kit and maintains BioBrick standard formats. There are cur
用RNase-III制备siRNA库来诱发RNAi(2)
Figure 1. Silencing Gene Targets by RNase III Derived siRNA Cocktails. A 200 bp dsRNA (15 µg) for each gene of interest was digested with 2.5 U RN
Double-Digestion(双酶切反应)时Universal-Buffer(通用缓冲液)的...
Double Digestion(双酶切反应)时Universal Buffer(通用缓冲液)的使用表■ 说明使用二种酶同时进行DNA切断反应 (Double Digestion) 时,为了节省反应时间,通常希望在同一反应体系内进行。TaKaRa采用Universal Buffer表示系统,
E.Z.N.A.®-Total-RNA-Midi-Kit-Protocol-DNase-I-digestion-Protocol
实验概要E.Z.N.A.® Total RNA Midiprep Kit provides a rapid and easy method for the isolation of up to 600 ug of total RNA from cultured eukaryotic cells,
Double-Digestion(双酶切反应)时Universal-Buffer(通用缓冲液)的...
说明使用二种酶同时进行DNA切断反应 (Double Digestion) 时,为了节省反应时间,通常希望在同一反应体系内进行。TaKaRa采用Universal Buffer表示系统,并对每种酶表示了在各Universal Buffer中的相对活性。尽管如此,在进行Double Dig
Western印迹法(试剂配制和操作步骤)6
(五)免疫反应(1)将膜用TBS从下向上浸湿后,移至含有封闭液的平皿中,室温下脱色摇床上摇动封闭1h。(2)将一抗用TBST稀释至适当浓度(在1.5ml离心管中);撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验台面上,四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整;将抗体溶液加到保鲜膜上;从封闭液中取出膜,用滤纸吸去残留液后,
Fast-and-reliable-miniprep-RNA-extraction-from-Neurospora-crassa
We have developed a method for isolating high quality total RNA from N. crassa mycelia that reliably yields large quantities. It is possible to extrac
沉淀反应实验:免疫电泳(immune-electrophoresis)实验
免疫电泳实验免疫电泳实验是先将抗原物质在琼脂凝胶中做电泳分离,然后于凝胶槽中加入抗体血清。使抗原抗体进行双向扩散,在比例适宜部位形成特异的抗原抗体沉淀弧线。每条沉淀弧线代表一组抗原抗体复合物,故可用抗原成分分析;且可以根据其迁移率与抗体所出现的特异反应进行鉴定。1、材料(1)待检标本(抗原):正常人
关于沉淀反应—火箭电泳(rocket-electrophoresis)-的简介
火箭电泳(rocket electrophoresis) 若在单向琼脂扩散基础上,加入抗原后,将琼脂板置电场中,使抗原置于负极即向正极定向扩散,在与板中的抗体结合而形成锥形沉淀峰,形似火箭,故名火箭电泳。沉淀峰的高度与抗原浓度成正比。由于在电场作用下,促使带负电荷多的抗原泳动,故火箭电泳需时短,
反转电场凝胶电泳
中文名称反转电场凝胶电泳英文名称field-inversion gel electrophoresis;FIGE定 义一种脉冲电场凝胶电泳,使用单对电极和一个可转动的潜入式琼脂糖凝胶板托,电泳时电场有规律地颠倒180。,驱动DNA先向后退,再向前进,使向前的脉冲时间或场强大于向后,样品获得向前的净
反转电场凝胶电泳的定义
中文名称反转电场凝胶电泳英文名称field-inversion gel electrophoresis;FIGE定 义一种脉冲电场凝胶电泳,使用单对电极和一个可转动的潜入式琼脂糖凝胶板托,电泳时电场有规律地颠倒180。,驱动DNA先向后退,再向前进,使向前的脉冲时间或场强大于向后,样品获得向前的净
蛋白质的理化性质有哪些
蛋白质主要的理化性质以及对应的分离纯化方法如下: 电荷 Charge:等电聚焦 isoelectricfocussing离子交换 Ion-Exchange等电点沉淀 Isoelectric precipitation疏水性 Hydrophobicity:反相层析 Reverse phase chro
Extraction-of-RNA-from-Frozen-Sections
RNA Extraction from Frozen Tissue Sections Tissue Handling: Note that all unfixed human tissue should be handled as BioSafety Level 2 materials (wear
ProZyme公司推出GlycanQ系统用于综合的N糖分析
分析测试百科网讯,位于加利福尼亚州海沃德的ProZyme公司,糖生物学领先的试剂和工具制造商,2016年11月14日宣布推出Glycan-Q糖分析系统, 一个集成的高通量平台, 可进行用户友好的糖基分析。Glycan-Q系统利用ProZyme在快速糖样品制备和分析级糖基标准品方面的专长, 并结合
聚丙烯酰胺凝胶的基本信息介绍
是一种人工合成凝胶,是以丙烯酰胺为单位, 由甲叉双丙烯酰胺交联成的,经干燥粉碎或加工成形制成粒状,控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。交联剂越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶-P (Bio-Gel P),由日本tosoh的TSKGEL的pw系列,适合蛋白和多糖的纯化。即丙烯酰胺和少量
Dot-blot-protocol
实验概要A technique for detecting, analyzing, and identifying proteins, similar to the western blot technique but differing in that protein samples are
Differential-Display-of-Cotton-Transcripts
Plant MaterialsCotton ovules (Gossypium hirsutum cv. Coker 312) were collected 8, 15, and 20 days after anthesis. Total RNA was extracted from strippe
一文读懂分子诊断常用技术(二)
二核酸序列测定测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。(一)第1代测序1975年
漫谈分子诊断技术50年(二)
二、核酸序列测定 测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。 (一)第1代
分子诊断技术、PCR技术、基因测序技术的区别、原理(二)
二、核酸序列测定 测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。 (一)第1代
Isolation-of-liver-lymphocyte
Isolation of liver lymphocyte Several lymphocyte subpopulations reside in the normal adult human liver. Liver lymphocytes mainly include a large n
Verification-of-In-...
实验概要Environmental stresses often trigger rapid generation of reactive oxygen species (ROS) in plants. Excessive amount of ROS can cause damage to
The-iPhyClassifier,-an-Interactive-Online-Tool-for-Phytoplasma-...
The i PhyClassifier is an internet-based research tool for quick identification and classification of diverse phytoplasmas. The i PhyClassifier simu
磷酸交联AFFIGEL-10-亲和介质实验
实验方法原理 本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步骤最终能产生 3 ml 柱床体积的亲和树脂;每毫升Affi-Gel 10上能交联 3 μl 肽。实验材料 寡聚肽
凝胶迁移(Gel-Shift)实验操作方法2
探针冷竞争反应:Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) 2微升细胞核蛋白或纯化的转录因子 2微升未标记的探针 1微升标记好的探针 1微升总体积 10微升突变探针的冷竞争反应:Nuclease-Free Water 4微升EMSA/Gel-Shif