测定核酸的方法

琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶具有较大的孔径,因而适用于对较大分子的电泳分离,目前琼脂糖电泳凝胶法已成为核糖核酸和脱氧核糖核酸检测、分离和性质研究的标准手段。核酸在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率取决于琼脂糖浓度、核酸分子的大小以及核酸分子的形状三个因素。一般来说,较低浓度的琼脂糖凝胶适合于较大分子物质的电泳分离,其电泳速度与分子量大小有关,且分子量的对数值与电泳迁移率之间存在着线性关系,由此可以作为定量的基础。其操作方法如下:1 仪器装置电泳室及直流电源。常用的水平式电泳室即可,电源为稳压直流电源,常压电泳一般在100-500V,高压电泳一般在500-10000V。2 试剂(1) 醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节到pH值至3.0,在加水至1000ml。(2) 甲苯胺蓝溶液 去甲苯胺蓝0.1g,加水100ml使溶解。3 操作法(1) 制胶 取琼脂糖约0.2g,加水10ml,置水浴中使溶胀......阅读全文

核酸鉴定方法之浓度

核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要,因此,对纯化后的核酸进行鉴定也是*的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括:浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 (1)紫外分光光度计:原理:由于核酸中的碱基都

核酸蛋白测定仪仪器分析

核酸蛋白测定仪简介基于BioPhotometer核酸蛋白测定仪的成功经验,Eppendorf隆重推出全新的 BioPhotometer plus核酸蛋白测定仪。此款精致轻巧却功能强大的测定仪不但操作简便,而且可以快速得到可靠的检测结果。相较之原先的12种常规检测方 法,BioPhotometer p

核酸的提取方法,您知道几种

   核酸是生物体内的高分子化合物。它包括脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)和核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)两大类。DNA和RNA都是由一个一个核苷酸(nucleotide)头尾相连而形成的。RNA平均长度大约为2000个核苷酸,而人的DNA却是很长

磁珠法提取核酸的方法

引言 随着分子生物学技术的高速发展,以核酸杂交、核酸扩增及核酸序列分析为代表的分子诊断和检测技术在诸多领域中日益凸显出至关重要的作用。核酸提取作为分子诊断实验的“第一步”,也是最关键的一步,其获得的核酸质量的优劣将直接影响到下游分子生物学试验的成败。 1、核酸提取传统方法 自1869年核酸被首次发现

核糖核酸酶(胰腺)的测定实验

实验方法原理 RNaseⅠ 分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2',3'-环状磷酸中间体。 实验材料 酶样品 试剂、试剂盒 乙酸缓冲液乙酸铀酰-高氯溶液RNA(酵母)溶液核酸核酸酶 仪器

超微量核酸蛋白测定仪的作用

Nano-600超微量核酸蛋白测定仪(超微量分光光度计)作为一款高再现性的全波长分光光度计,采用基座和比色皿上样双检测模式, 适用于更宽浓度范围的样品检测,操作简便,不仅可用于测量DNA,RNA纯度、浓度,测量蛋白质浓度,也可用于一般物质分析中的吸光度检测。

超微量核酸蛋白测定仪的作用

Nano-600超微量核酸蛋白测定仪(超微量分光光度计)作为一款高再现性的全波长分光光度计,采用基座和比色皿上样双检测模式, 适用于更宽浓度范围的样品检测,操作简便,不仅可用于测量DNA,RNA纯度、浓度,测量蛋白质浓度,也可用于一般物质分析中的吸光度检测。

核糖核酸酶(胰腺)的测定实验

基本方案             实验方法原理 RNaseⅠ分解 RNA 形成 3'-磷酸单核苷酸和 3'-磷酸多核苷酸,以 Cp 或 Up 结尾形成一个 2'

核酸的定量测定实验——地衣酚显色法

实验方法原理RNA 与浓盐酸共热时发生降解, 产生的核糖又可转变为糖醛, 在FaCl3 或CuCl2催化下, 糖醛与3 , 5-二羟基甲苯( 地衣酚、苔黑酚)反应形成绿色复合物, 该产物在670 nm 处有最大吸收。当RNA 浓度为20~250 μg/ ml 时光密度与RNA 浓度成正比。实验材料蛋

依赖核酸序列的扩增的基本方法

基本方法为:将引物,标本加入扩增反应液,65℃1min使RNA分子二级结构打开,降温至37℃加入逆转录酶,T7rna聚合酶和RNaseH,并在37℃反应1——1.5小时,其产物经琼脂 糖电泳,溴乙锭染色即可在紫外仪下看到条带.NASBA的特点为操作简便,不需特殊仪器,不需温度循环.整个反应过程由三种

核酸的纯化主要方法和分离纯化核酸时的注意事项(一)

分离纯化核酸时的注意事项:防止物理因素的降解:1.尽量简化操作步骤,缩短提取时间,以减少变性机会。2.防止热变性,避免高温。一般0-4℃。3.防止机械剪切作用  动作轻缓;搅拌温和;加山梨醇等增加渗透压。防止化学因素的降解:1.避免强酸强碱作用,抽提液pH要保持在4-10之间。2.保持提取液一定的离

核酸的纯化主要方法和分离纯化核酸时的注意事项(二)

核酸的纯化主要方法:超离心(提纯和分离最常用的方法,又分为①沉降速度超离心②沉降平衡超离心ρ=1.660+(G+C)%,相似条件下核酸密度ssRNA>dsRNA>ssDNA>dsDNA>tRNA和蛋白质环状DNA>线状DNA,DNA分子密度与构想有关,加入重金属AgHg)核酸提取的一般步骤:1、破碎

核酸离心机分类方法

核酸离心机分类方法有多种。1、按速度可分:核酸低速离心机和核酸高速离心机。2、按温控可分:核酸冷冻离心机和核酸常温离心机。3、按分离规模可分:小型核酸离心机和大型核酸离心机。4、按分离目的可分:核酸实验室离心机和核酸工业离心机。5、按结构可分:台式核酸离心机和落地式核酸离心机。6、按应用范围可分:专

核酸离心机分类方法

 核酸离心机分类方法有多种。1、按速度可分:核酸低速离心机和核酸高速离心机。2、按温控可分:核酸冷冻离心机和核酸常温离心机。3、按分离规模可分:小型核酸离心机和大型核酸离心机。4、按分离目的可分:核酸实验室离心机和核酸工业离心机。5、按结构可分:台式核酸离心机和落地式核酸离心机。6、按应用范围可分:

核酸离心机分类方法

核酸离心机分类方法有多种。1、按速度可分:核酸低速离心机和核酸高速离心机。2、按温控可分:核酸冷冻离心机和核酸常温离心机。3、按分离规模可分:小型核酸离心机和大型核酸离心机。4、按分离目的可分:核酸实验室离心机和核酸工业离心机。5、按结构可分:台式核酸离心机和落地式核酸离心机。6、按应用范围可分:专

核酸定量分析方法

核酸定量分析 DNA 或 RNA(以260nm处的吸光值为基础) 1. 制备用蒸馏水稀释过的DNA 或 RNA 样品溶液 ( 典型稀释比为 1:100 或 5:500μl) 2. 使用紫外光源,在260 nm 处测定吸光值,也可以在280 nm 和230 nm 测定吸光值 (260/280 的光吸收

紫外吸收法测定核酸浓度与纯度

实验概要学习测定DNA或RNA的浓度与纯度。实验原理核酸分子中的碱基集团含有共轭双键,它们对紫外光有强烈的吸收。核酸的最大吸收波长在260 nm,吸收低峰在230 nm。可以利用核酸的这一特性对其浓度进行测定。在波长260 nm下,A260=1时,双链DNA的含量为50 µg/ml,单链DN

检测核酸的方法是什么?准确吗?

  检测核酸的方法是一种灵敏度较高的核酸检测方法。曾经有美国科研人员发现,核酸检测能够检测得出刚染上人类免疫缺陷病毒(HIV)的病患,而现有的标准检测还无法做到这点。  中国工程院院士钟南山曾经回应核酸检测的准确性,他表示,这个方法本身还是正确的,应该相信核酸的检测,但得看取材,平常绝大多数是取鼻的

核酸提取仪的主要步骤及方法

1. 环境温度:5℃~40℃;环境相对湿度;电压:50%~80%范围:100~240Vac,50/60 Hz。2. 将仪器放在水平实验台上。3. 放置仪器时应保证仪器周围10cm内无障碍物;多台仪器同时使用时,每台仪器之间的距离应不小于50cm。4. 仪器主机通电之前,必须先用六角扳手取下磁棒架固定

转移核糖核酸的合成方法

生物合成:在生物体内,DNA分子上的tRNA基因经过转录生成tRNA前体,然后被加工成成熟的tRNA:tRNA前体的加工包括:切除前体分子中两端或内部的多余核苷酸;形成tRNA成熟分子所具有的修饰核苷酸;如果前体分子3′端缺乏CCA顺序,则需补加上CCA末端。加工过程都是在酶催化下进行的。人工合成:

核酸-活性多肽及递质的提取方法

 核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DND)。核酸的分子量极大,人数万致亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点。溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别,有一定

简述核酸疫苗的注射途径与方法

  核酸疫苗免疫接种的方法主要分为三种:  ①可产生高转染效率的途径,如肌肉接种;  ②转染效率虽不高,但是经常被用于实验动物接种的途径,如皮下、腹腔内接种;  ③转染效率不高,但有高水平的局部免疫监视,如皮肤、呼吸道接种。  一般地,用注射器直接注射要求DNA为10~200ug枪注射要求的DNA量

核酸提取仪的主要步骤及方法

1. 环境温度:5℃~40℃;环境相对湿度;电压:50%~80%范围:100~240Vac,50/60 Hz。2. 将仪器放在水平实验台上。3. 放置仪器时应保证仪器周围10cm内无障碍物;多台仪器同时使用时,每台仪器之间的距离应不小于50cm。4. 仪器主机通电之前,必须先用六角扳手取下磁棒架固定

核酸提取仪的主要步骤及方法

1. 环境温度:5℃~40℃;环境相对湿度;电压:50%~80%范围:100~240Vac,50/60 Hz。2. 将仪器放在水平实验台上。3. 放置仪器时应保证仪器周围10cm内无障碍物;多台仪器同时使用时,每台仪器之间的距离应不小于50cm。4. 仪器主机通电之前,必须先用六角扳手取下磁棒架固定

核酸提取仪的主要步骤及方法

1. 环境温度:5℃~40℃;环境相对湿度;电压:50%~80%范围:100~240Vac,50/60 Hz。2. 将仪器放在水平实验台上。3. 放置仪器时应保证仪器周围10cm内无障碍物;多台仪器同时使用时,每台仪器之间的距离应不小于50cm。4. 仪器主机通电之前,必须先用六角扳手取下磁棒架固定

核酸-活性多肽及递质的提取方法

核酸分为两大类:一类为核糖核酸(RNA),另一类为脱氧核糖核酸(DND)。核酸的分子量极大,人数万致亿万。核酸是两性化合物,在一定的等电点。溶于水,其水溶液呈酸性,不溶于乙醇等有机溶剂。细胞内的核酸常和蛋白质结合成核蛋白。核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白在不同浓度的电解质溶液中的溶解度有显著区别,有一定浓

核酸提取仪的主要步骤及方法

核酸提取仪,是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器,核酸提取仪分为两类:一类是大型的自动化的,一般称为自动液体工作站;另一类是小型自动核酸提取仪,利用封装好的配套试剂自动完成提取纯化过程。大型自动液体工作站因为设备成本高昂,运行成本高,适合一次提取几千个同一种类标本,所以真正得到

紫外线(UV)吸收法测定核酸的含量

实验原理核酸及其衍生物,核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收UV的性质,其吸收高峰在260nm波长处。核酸的摩尔消光系数(或称吸收系数)用来表示。为每升溶液中含有1克原子核酸磷的光吸收值(即A值)(表)。测得未知浓度核酸溶液的A260nm值,即可以计算出其中RNA或DNA的含量。该法操作简便,迅速,并对被

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

            实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A

核酸纯度、浓度与分子量测定实验

实验方法原理 溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm,在此波长下,吸光度1 A相当于一定浓度的核酸,可以通过A260/A280 的比值,来测定所得核酸的纯度。实验材料 DNA试剂