从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒
材料:缓冲液和溶液:氯仿NaCl(固体)聚乙二醇(PEG 8000)SM酶和缓冲液:胰Dnase I (1mg/ml)胰Dnase I (1mg/ml)于TE中(ph7.6)离心机和转子:Sorvall GSA 转子或相当型号专用设备:量筒(2L)载体和菌株:大肠杆菌培养物,经λ噬菌体感染和裂解方法:用PEG沉淀噬菌体颗粒1、 将含有λ噬菌体的裂解培养物冷却至室温,加胰Dnase I和Dnase 至终浓度约为1ug/ml,室温温育30min。2、 每500ml培养物加入29.2固体NaCl(终浓度为1mon/L),搅拌使其溶解。将培养物冰浴1h。3、 4℃,11000g(8300r/min于Sorvall GSA转子中)离心10min以去除细胞碎片,将四份培养物的上清混合置于2L的干净量筒中。4、 测定所收集上清的总体积,然后转移至2L的烧瓶中,加固体PEG至终浓度为1......阅读全文
M13噬菌体单链DNA的制备
实验方法原理 M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的,首先在高盐存在下,丝状病毒被聚乙二醇(PEG) 沉淀浓缩,然后用酚抽提释放单链 DNA,最后乙醇沉淀收集单链 DNA。
M13噬菌体双链(复制型)DNA的制备
感染 M13 噬菌体的细菌含病毒双链 RF DNA,培养基中粗提病毒颗粒中含单链子代 DNA,双链 RF DNA 可以采用类似于质粒纯化的方法从感染细胞的小量培养物中分离。从 1~2 ml 的感染细胞培养物中可以分离几微克的 RF DNA,这个量足以进行亚克隆和作限制酶酶切图谱。本实验来源「分子克隆
M13噬菌体双链(复制型)DNA的制备
感染 M13 噬菌体的细菌含病毒双链 RF DNA,培养基中粗提病毒颗粒中含单链子代 DNA,双链 RF DNA 可以采用类似于质粒纯化的方法从感染细胞的小量培养物中分离。从 1~2 ml 的感染细胞培养物中可以分离几微克的 RF DNA,这个量足以进行亚克隆和作限制酶酶切图谱。本实验来源「分子克隆
从肥皂制备药物?这次不是幻想
中世纪的欧洲,有一群痴迷于“炼金术”的人,梦想能够实现普通金属到贵金属的转变。虽然日后科学的发展否定了“点石成金”的可能性,然而现代化学家正在做着“化腐朽为神奇”的事情。 近日,美国斯克里普斯研究所教授余金权在《科学》上发表论文,报道了钯催化脂肪酸一步转化为α,β—不饱和羧酸或丁烯内酯类化合物
制备DNA测序模板实验——制备单链M13噬菌体DNA
本实验包含了用于制备适用于双脱氧测序的模板及适用于末端标记和化学测序的DNA的实验方案。所有用于双脱氧测序的双链模板在与引物退火前必须变性,在一般应用上,碱变性在测序中的效果比热变性好。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LBTEM13聚乙二醇容易让顶层琼脂乙酸钠乙醇仪器、耗材巴斯德吸管试管离心机实验步骤1
大规模精确制备碳基纳米材料获突破
近日,中科学院理化所超分子光化学研究团队联合复旦大学、北京大学的科研人员,利用光化学和有机化学的合成手段,在精确构建新型碳基纳米材料研究中取得新进展。相关研究成果发表于《美国化学会志》。 在材料合成领域,大规模精确制备碳基纳米材料是一个重要的科学问题,可为发挥有机化学在合成复杂含碳分子方面的
我国制备出最大规模光量子计算芯片
美国《科学》杂志子刊《科学—进展》日前发表了上海交通大学物理与天文学院金贤敏团队最新研究成果。该研究报道了世界最大规模的三维集成光量子芯片,并演示了首个真正空间二维的随机行走量子计算。同时这也是国内首个光量子计算芯片。这一成果对于推进模拟量子计算机研究具有重要意义。 近年来,关于通用量子计算机
颗粒剂的制备实验
实验材料 大清叶 板蓝根 连翘 拳参 试剂、试剂盒 纯化水 乙
基因转导的类别
普遍性转导转导噬菌体能传递供体细菌的任何基因的转导。鼠伤寒沙门氏菌的P22噬菌体、大肠杆菌P1噬菌体、枯草杆菌的PBS1、PBS2、SP10噬菌体都是普遍性转导噬菌体。由普遍性转导产生的转导子(即接受了噬菌体传递的供体细胞基因的受体细胞)不具溶源性,说明转导噬菌体中不带有完整的噬菌体染色体,却带有噬
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
实验方法原理 一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法,在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法,包括通过用 32P 标记的探针进行原位杂交以大量筛选噬菌斑。实验材料 λ 噬菌体文库大肠杆菌铺平板细菌试剂、试剂盒 变性液中和液SM
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法,在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法,包括通过用 32P 标记的探针进行原位杂交以大量筛选噬菌斑。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理一个从 λ 噬菌体文库中鉴
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
实验方法原理 一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法,在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法,包括通过用 32P 标记的探针进行原位杂交以大量筛选噬菌斑。
M13噬菌体双链(复制型)DNA的制备
实验方法原理 感染 M13 噬菌体的细菌含病毒双链 RF DNA,培养基中粗提病毒颗粒中含单链子代 DNA,双链 RF DNA 可以采用类似于质粒纯化的方法从感染细胞的小量培养物中分离。从 1~2 ml 的感染细胞培养物中可以分离几微克的
M13噬菌体双链(复制型)DNA的制备
实验方法原理 感染 M13 噬菌体的细菌含病毒双链 RF DNA,培养基中粗提病毒颗粒中含单链子代 DNA,双链 RF DNA 可以采用类似于质粒纯化的方法从感染细胞的小量培养物中分离。从 1~2 ml 的感染细胞培养物中可以分离几微克的 RF DNA,这个量足以进行亚克隆和作限制酶酶切
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构细胞核的预先分离实验材料细胞 试剂、试剂盒Tritron X-100
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结...
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构实验实验材料 细胞试剂、试剂盒 Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构 从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构 细胞核的预先分离 实验材料
噬菌体制备及定量的一般实验方案
大部分噬菌体展示方案都涉及这样一个基本步骤:从被感染的细菌中制备噬菌体或噬菌粒颗粒的储液(增殖),并滴定这些储液以测定有感染力的颗粒的浓度。对于噬菌体载体(以及辅助噬菌体),对于噬菌体载体(以及辅助噬菌体),要通过计数宿主菌菌苔上的噬菌体斑来测定这些可变颗粒的浓度。为了确保能得到一个能繁殖的噬菌体的
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—核提取物制备
实验材料转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)试剂、试剂盒PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管(对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管)Dounce 氏玻璃匀浆器(B
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
对于某些用途来说(如体内感染细胞),有必要浓缩反转染病毒原液以增加其滴度。如果想要用不编码可选择标记的病毒感染一群细胞,必须用髙滴度的病毒。操作中需用几百毫升至几升的产毒细胞上清。聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒实验材料病毒试剂、试剂盒PEGNTE仪器、耗材转子离心机实验步骤1. 制备病毒原液。加5
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
实验材料 病毒细胞试剂、试剂盒 小牛血清仪器、耗材 滤器转子实验步骤 1. 将产病毒细胞按1:10或1:20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中,培养细胞至50%~90%汇片。2. 弃去培养液,轻轻加入半量的培养液,注意培养液碱性不要过大,培养2~3天。 3. 收取上清,用
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
离心法 聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒 实验材料 病毒细胞 试剂
Nature:从原子水平上解析噬菌体感染细菌的分子机理
细菌噬菌体是感染细菌的一种病毒,近日,来自瑞士洛桑联邦理工学院(EPFL)的研究人员利用先进的研究工具描述了一百万个原子“尾部”结构,细菌噬菌体可以利用尾部结构来突破细胞的表面进入到细胞内部,该研究对于理解细菌噬菌体感染细菌的机制,以及后期应用于新型细菌性疾病疗法的开发提供了新的线索和希望,相关
胶体金分散颗粒制备实验
实验方法原理 白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较为简便,制备出来的胶体金颗粒大小较一致,因而应用较为广泛,现以 Faulk 和 Taylor(1971)的报道为基础介绍这一方法。试剂、试剂盒 氯化金K2CO3双蒸水实验步骤 1. 取 1% 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2C
中药配方颗粒是如何制备的
其制药工艺流程是:药材前处理(采收—洗净—干燥)—提取—分离—纯化—(粉碎)—筛析—混合—制粒其中,各个环节均需谨慎处理,后而制粒。相关文献的话,希望到:中国知识资源总库,里面查阅,里面的文献很多也很专业。
胶体金分散颗粒制备实验
实验步骤1. 取 0.01% AuCl3 • HCl 水溶液 100 ml,加热至沸腾。2. 加入 4 μl 195Au。 3. 迅速加入 4 ml 1% 柠檬酸三钠水溶液,搅拌 5~7 min,至出现透明的橙红色。4. 其含量为脉冲数 1×106/min。胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的
九味羌活颗粒的制备方法
白芷粉碎成粗粉,照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法,用70%乙醇作溶剂,浸渍24小时后进行渗漉,收集漉液,备用。羌活、防风、苍术、细辛、川芎提取挥发油,蒸馏后的水溶液另器收集;药渣与其余黄芩等3味加水煎煮3次,每次1小时,合并煎液,滤过,滤液与上述水溶液合并,浓缩至约900ml,加等量的乙醇使沉淀,
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
核提取物的制备 核提取物制备优化 细胞质(S-100)组分的制备 实验方法原理 实验材料
从哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物
实验方法原理 实验材料 转瓶或单层培养的哺乳动物细胞(如HeLa细胞)试剂、试剂盒 PBS低渗缓冲液高盐缓冲液含1. 2 mol L KCl透析缓冲液液氮仪器、耗材 贝克曼 JS4. 2 转子或相当的转子50 mL 圆锥形刻度聚丙烯离心管(对较小体积的提取物也可用 15 mL 的离心管)Doun