从大规模裂解物中制备λ噬菌体颗粒
材料：缓冲液和溶液：氯仿NaCl（固体）聚乙二醇（PEG 8000）SM酶和缓冲液：胰Dnase I (1mg/ml)胰Dnase I (1mg/ml)于TE中（ph7.6）离心机和转子：Sorvall GSA 转子或相当型号专用设备：量筒（2L）载体和菌株：大肠杆菌培养物，经λ噬菌体感染和裂解方法：用PEG沉淀噬菌体颗粒1、 将含有λ噬菌体的裂解培养物冷却至室温，加胰Dnase I和Dnase 至终浓度约为1ug/ml，室温温育30min。2、 每500ml培养物加入29.2固体NaCl（终浓度为1mon/L），搅拌使其溶解。将培养物冰浴1h。3、 4℃，11000g（8300r/min于Sorvall GSA转子中）离心10min以去除细胞碎片，将四份培养物的上清混合置于2L的干净量筒中。4、 测定所收集上清的总体积，然后转移至2L的烧瓶中，加固体PEG至终浓度为1......阅读全文
培养细胞标记和裂解物的制备实验——SDS煮沸法
实验材料培养细胞试剂、试剂盒SDS裂解液RIPA校正液免疫沉淀洗液仪器、耗材离心机培养箱玻璃培养管实验步骤1. 标记和洗涤细胞（温和去污裂解法，步骤1~7）。 2a. 对于贴壁细胞：加入适量SDS裂解液至培养皿中。（35 mm 培养皿加0.1 ml，50 mm 培养皿0.25 ml，100 ml
cDNA的筛选3
免疫学染色1.为了洗去顶层琼脂上的残余物和细胞碎片，将硝酸纤维素滤膜一次最多5张转移放在摇床上的盘子（10×10cm）内，用25ml TBS室温洗涤10 min 2次。2.然后滤膜用25ml封闭缓冲液（每张90mm直径的滤膜至少15ml）于室温温育 30min，以封闭滤膜上的非特异性结合位点。不断晃
从藻类大规模提取生物燃料有望实现
荷兰瓦格宁根农业大学两名研究人员在新一期《科学》杂志上发表文章说，人类有望在10年至15年内研发出从藻类中大规模提取生物燃料的技术，届时整个欧洲使用的矿物燃料将有望被这种新能源取代。 研究人员说，目前每公顷土地种植的油菜子只能提炼出6000升生物燃料，但是同样面积用于培植藻类却能产生
2.3.2－果蝇RNA的大规模制备
本方法可从 100 只果蝇或约 2g 果蝇胚胎中制备 RNA。试剂、试剂盒5mol LLiCl70% 乙醇酚：氯仿（1:1)20 mg ml 蛋白酶 K95%(V V) 乙醇.RNA 匀浆缓冲液3mol L 乙酸钠实验步骤一 材料与设备1)5mol/L LiCl2)70% 乙醇：70% (V/V)E
颗粒剂的制备实验_感冒退热颗粒剂的制备
实验材料大清叶板蓝根连翘拳参试剂、试剂盒纯化水乙醇蔗糖粉糊精仪器、耗材烧杯玻璃棒天平旋蒸仪圆底烧瓶桑皮纸实验步骤一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同，可采用不同的溶剂和方法进行提取，一般多用煎煮法提取有效成分，用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排情况，适
文库甘油储存料中噬菌体抗体的制备
实验概要本实验从文库甘油储存料中制备了噬菌体抗体。主要试剂1. 2×TY/amp/glu培养基2. TYE/amp/glu平板3. 含有25ug/ml卡那霉素和2％葡萄糖的TYE平板(TYE/kan/glu)4. 含100ug/ml氨苄青霉素和25ug/ml卡那霉素的2×TY培养基(2×TY/amp
通过平板裂解和刮取制备λ噬菌体原种
方法：1、铺平板感染培养物的制备：对直径为10cm的培养皿，取105pfu的噬菌体（通常约为一个噬菌斑重悬液的1/10或一个大噬菌斑重悬液的1/100）与0.1ml铺平板细菌混匀。对直径为15cm的培养皿，去2*105pfu的噬菌体与0.2ml铺平板细菌混匀。至少要置一个含为感染细胞的对照管，将感染
文库甘油储存料中噬菌体抗体的制备
实验概要本实验从文库甘油储存料中制备了噬菌体抗体。主要试剂1. 2×TY/amp/glu培养基2. TYE/amp/glu平板3. 含有25ug/ml卡那霉素和2％葡萄糖的TYE平板(TYE/kan/glu)4. 含100ug/ml氨苄青霉素和25ug/ml卡那霉素的2×TY培养基(2×TY/amp
从鼠尾或其他小样本中制备基因组DNA
实验方法原理 这一简单的实验方案在成百上千的实验室被广泛应用于转基因或基因剔除小鼠的基因型鉴定以及从小量培养的细胞或组织块中提取 DNA。 实验材料 蛋白
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
实验材料细胞试剂、试剂盒Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材电子显微镜实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消化步骤，每 107 个细胞最少要用 1 ml 缓冲液，以后减半
从鼠尾或其他小样本中制备基因组DNA
这一简单的实验方案在成百上千的实验室被广泛应用于转基因或基因剔除小鼠的基因型鉴定以及从小量培养的细胞或组织块中提取 DNA。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理这一简单的实验方案在成百上千的实验室被广泛应用于转基因或基因剔除小鼠的基因型鉴定以及从小量培养的细胞或组织块中提取
细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核
实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃须刀片将组织切碎，转入一个干净试管中，加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用
从鼠尾或其他小样本中制备基因组DNA
实验方法原理 这一简单的实验方案在成百上千的实验室被广泛应用于转基因或基因剔除小鼠的基因型鉴定以及从小量培养的细胞或组织块中提取 DNA。实验材料 蛋白酶 K培养的细胞鼠尾或小鼠组织试剂、试剂盒 乙醇异丙醇酚氯仿异戊醇磷酸盐缓冲溶液SNETTE仪器、耗材 Sorvall 离心机及 H1000B、SH
颗粒剂的制备
实验材料 大清叶板蓝根连翘拳参试剂、试剂盒 纯化水乙醇蔗糖粉糊精仪器、耗材 烧杯玻璃棒天平旋蒸仪圆底烧瓶桑皮纸实验步骤 一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同，可采用不同的溶剂和方法进行提取，一般多用煎煮法提取有效成分，用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排
大规模测序研究：从遗传变异到功能
随着测序研究的深入，人们已不再满足于了解遗传变异，而是期待探究功能。在最近几个星期，三个以“从遗传变异到功能”为主题的大规模测序项目都发表了很有意思的论文。 Transcriptome and genome sequencing uncovers functional variation
关于局限性转导的基本介绍
噬菌体只能传递供体染色体上原噬菌体整合位置附近的基因的转导。λ噬菌体和φ80噬菌体是大肠杆菌K－12的局限性转导噬菌体。λ噬菌体只能转导大肠杆菌K－12染色体半乳糖基因（gal）和生物素基因（bio）等少数基因。φ80噬菌体只能转导色氨酸基因（trp）、胸腺嘧啶激酶基因（tdk）等少数基因。产生
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验
实验方法原理因为噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现其特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体一般是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体；乳牛场有较多的乳酸杆菌，也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。虽然近年的研究表明，自由噬菌
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验
实验方法原理 因为噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现其特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体一般是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体；乳牛场有较多的乳酸杆菌，也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。虽然近年的研究表明，自由噬
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。 实验材料 λ 噬菌体颗粒悬浮液
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。实验材料 λ 噬菌体颗粒悬浮液试剂、试剂盒 EDTA甘油SM胰 DNase Ⅰ仪器、耗材 Beckman SW41 或 SW28 转子或相当型号离心管实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液E
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。实验材料λ 噬菌体颗粒悬浮液试剂、试剂盒ED
CDNA文库筛选
CDNA文库筛选（一）λgt11 cDNA文库铺平板宿主细菌制备1．用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基（Y1088用于噬菌斑杂交，Y1090用于免疫筛选），于37℃振荡培养过夜。2．将过夜培养物以3000×g离心5min。3．分别用2ml λ-dil（10 mmol/L
M13噬菌体衍生载体的制备实验
载体衍生法 实验材料 质粒 试剂、试剂盒
M13噬菌体衍生载体的制备实验
实验材料 质粒试剂、试剂盒 YT培养基仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 将来自一个单菌落的过夜培荞新鲜菌液按1 ：50稀释，在含有适当抗生素的2×YT培养液（1~5 ml）中，于37℃培养至OD600=0.1。2. 按1，10，20，50 MOI感染细胞，于37℃剧烈振荡下培养4.
通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种实验
实验方法原理 来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备，通常有两种方法：① 平板裂解，这是一种噬菌体在生长于顶层琼脂或琼脂糖的细菌中增殖的方法；② 小量液体培养，这是用生长于液体培养基中的细菌进行噬菌体增殖的方法。实验材料 λ 噬菌体原种大肠杆菌铺平板细菌试剂、试剂盒 氯仿SM仪器、耗材 LB 或
噬菌体的检测为什么要制备双层平板
加入底层平板后可以弥补培养皿底部不平的缺陷，这样可以使所有的噬菌斑都位于近乎同一平面上。上层琼脂层较稀，可以形成形态较大，便于观察和计数的噬菌斑。
M13噬菌体单链DNA的制备
实验方法原理 M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的，首先在高盐存在下，丝状病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀浓缩，然后用酚抽提释放单链 DNA，最后乙醇沉淀收集单链 DNA。
M13噬菌体单链DNA的制备
M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的，首先在高盐存在下，丝状病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀浓缩，然后用酚抽提释放单链 DNA，最后乙醇沉淀收集单链 DNA。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌
通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种实验
实验方法原理 来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备，通常有两种方法：① 平板裂解，这是一种噬菌体在生长于顶层琼脂或琼脂糖的细菌中增殖的方法；② 小量液体培养，这是用生长于液体培养基中的细菌进行噬菌体增殖的方法。
M13噬菌体单链DNA的制备
实验方法原理 M13 噬菌体单链 DNA 是从感染细胞分泌至周围培养液中的病毒颗粒中制备的，首先在高盐存在下，丝状病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀浓缩，然后用酚抽提释放单链 DNA，最后乙醇沉淀收集单链 DNA。实验材料 M13 单链噬菌体载体感染 M13 噬菌体的大肠杆菌培养物未感染的大肠杆菌的培养