免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液2ml,加热煮沸15min~30min,直至颜色变红。冷却后加入0.1Mol/L K2CO30.5ml,混匀即可。 (3)15nm、18nm~20nm、30nm或50nm胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加热煮沸。根据需要迅速加入1%枸橼酸三钠水溶液4ml、2.5ml、1ml或0.75ml,继续煮沸约5min,出现橙红色。这样制成的胶体金颗粒则分别为15nm、18~20nm、30nm和50nm。 2.鞣酸—枸橼酸钠还原法 A液:1%......阅读全文
免疫胶体金技术的颗粒制备及蛋白制备
颗粒制备 根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的
免疫胶体金技术的颗粒制备
根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。 1.枸橼酸三钠还原法 (1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。 (2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.
免疫胶体金技术的使用优点及颗粒制备
使用优点 (1)使用方便快速,便于基层使用和现场使用,所有反应能在15分钟内完成; (2)成本低,不需要特殊的仪器设备; (3)应用范围广,可适应多种检测条件; (4)可嗄以进行多项检测,若阳性样本比较难获得,多项检测可以节省样品,降低成本; (5)标记物稳定,标记样品在4℃贮存两年年
免疫胶体金技术的蛋白制备
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。 1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.0
胶体金分散颗粒制备实验
实验步骤1. 取 0.01% AuCl3 • HCl 水溶液 100 ml,加热至沸腾。2. 加入 4 μl 195Au。 3. 迅速加入 4 ml 1% 柠檬酸三钠水溶液,搅拌 5~7 min,至出现透明的橙红色。4. 其含量为脉冲数 1×106/min。胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的
胶体金分散颗粒制备实验
实验方法原理 白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较为简便,制备出来的胶体金颗粒大小较一致,因而应用较为广泛,现以 Faulk 和 Taylor(1971)的报道为基础介绍这一方法。试剂、试剂盒 氯化金K2CO3双蒸水实验步骤 1. 取 1% 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2C
免疫胶体金的制备过程
1蛋白质的处理:由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附,并可使溶胶聚沉,故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意,蛋白质溶液应绝对澄清无细小微粒,否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在,因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。2蛋白质最适用量的
胶体金与蛋白制备
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1.待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.005Mo
常用来制备胶体金颗粒的方法
1.枸橼酸三钠还原法(1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。(2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液2ml,加热煮沸15min~30m
制备胶体金分散颗粒的其他方法
乙醇-超声波还原法(Baigent和Muller,1980)(1)取1%AuCl3·HCl水溶液lml加入100ml双重蒸馏水。(2)用0.2mol/LK2CO3调pH至7.2,再加入lml无水乙醇。(3)用20KC、135W超声波探头浸入溶液内进行超声振荡,此法制备的颗粒为6~10nm。硼氢化钠还
常用来制备胶体金颗粒的方法介绍
根据不同的还原剂可以制备大小不同的胶体金颗粒。常用来制备胶体金颗粒的方法如下。1.枸橼酸三钠还原法(1)10nm胶体金粒的制备:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸橼酸三钠水溶液3ml,加热煮沸30min,冷却至4℃,溶液呈红色。(2)15nm胶体金颗粒的制备:取0.01%HAuCl
白磷还原法制备胶体金分散颗粒
胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子,可用于制备胶体金的还原剂有50余种,但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等。白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较为简便,制备出来的
白磷还原法制备胶体金分散颗粒
胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子,可用于制备胶体金的还原剂有50余种,但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等。 白磷还原法的建立已有近百年的历史,由于此法操作较
胶体金分散颗粒制备实验——白磷还原法
胶体金可用多种方法制备,其中应用较为广泛的是化学还原法。这一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的还原剂,使金离子还原为金原子,可用于制备胶体金的还原剂有 50 余种,但在生物医学领域内最为常用的还原剂是白磷、柠檬酸三钠以及鞣酸等,因此将重点介绍这三种还原剂制备胶体金分散颗粒的具体方法和步骤。
胶体金分散颗粒制备实验——白磷还原法(改进)
实验方法原理白磷还原法一般只能制备出单一颗粒直径的胶体金。因此,用于电镜双重标记或多重标记时此法显得有些不足,还需结合其他方法。Henegouwen 等(1986)发展了传统的白磷还原法,可制备出多种不同直径的胶体金,取得了良好的效果。这一方法的特点是通过循环还原的引入使原白磷还原法的适用范围得到扩
胶体金的制备常用方法
胶体的制备一般采用还原法,常用的还原剂有柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。2.1柠檬酸三钠还原法制备金溶胶取0.01%氯金酸水溶液100mL加热至沸,搅动下准确加入1%柠檬酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O)水溶液0.7mL,金黄色的氯金酸水溶液在2min内变为紫红色,继续煮沸15min
胶体金标记技术(制备方法和应用)
胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细
免疫胶体金的制备及其在医学检验中的应用
摘要免疫胶体金技术是四大免疫标记技术之一,问世二十多年来发展十分迅速,在生物医学各研究领域特别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。本文从胶体金技术的基本原理、制备方法、标记技术和实际应用等几个方面对胶体金技术作了较系统介绍。 1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此
胶体金制备注意事项及应用
一、胶体金的稳定性及免疫胶体金的贮存胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。 金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质
胶体金分散颗粒制备实验——柠檬酸钠还原法
实验方法原理柠檬酸钠还原法(Frens,1973)制备过程十分简单,制备出的金颗粒均匀一致,因此广为采用。大量研究已表明该法制备胶体金时,颗粒的大小是柠檬酸钠用量的函数,即在一定的范围内任意给定一个柠檬酸钠的量,总有一定大小的胶体金颗粒与它相对应,因而这种方法可很好地满足电镜双重标记和多重标记的要求
-乙肝免疫球蛋白的制备方法
乙肝免疫球蛋白是从健康献血员中筛选出来的,其血浆含有滴度较高的乙肝表面抗体(抗-HBs),经过生物浓缩工艺制成的高效价乙肝免疫球蛋白 。我国生产的为每毫升含抗-HBs 100单位以上的注射剂。每升含抗-HBs 100单位以上的注射剂,这种含量的制剂完全可以中和入侵人体的乙肝病毒(HBV)并将其清除,
胶体金怎么样制备?
(一)制备原理:一般采用还原法,常用的还原剂有枸橼酸钠、鞣酸、维生素C、白磷、硼氢化钠等。向金溶液内加入还原剂,使金离子还原成金原子,形成金颗粒悬液,也称金溶胶。(二)技术要点:金溶胶的光散射性与溶胶颗粒的大小密切相关,一旦颗粒大小发生变化,光散射也随之发生变异,产生肉眼可见的显著的颜色变化,这就是
颗粒剂的制备实验_感冒退热颗粒剂的制备
实验材料大清叶板蓝根连翘拳参试剂、试剂盒纯化水乙醇蔗糖粉糊精仪器、耗材烧杯玻璃棒天平旋蒸仪圆底烧瓶桑皮纸实验步骤一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同,可采用不同的溶剂和方法进行提取,一般多用煎煮法提取有效成分,用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排情况,适
胶体金分散颗粒制备实验——鞣酸柠檬酸钠还原法
实验方法原理在鞣酸-柠檬酸钠还原法中,柠檬酸钠是主要的还原剂;而鞣酸则具有双重作用,既起还原作用,也有保护作用,它控制着「晶核」的形成过程,故可改变鞣酸的用童来制备不同颗粒的胶体金。实验步骤A 液(80 ml):1% 氯化金,1 ml;双重蒸馏水,79 ml。B 液(20 ml):1% 柠檬酸钠,4
胶体金分散颗粒制备实验——硼氢化钠还原法
实验步骤1. 取 0.6 ml 1% 氯化金水溶液,加入 40 ml 预冷(4℃)双蒸馏水。2. 再加入 0.2mol/L K2CO3 0.2 ml。3. 边搅拌边加入新鲜配制的硼氢化钠水溶液(0.5 mg/ml)2 ml,至溶液由蓝紫色变为橙红色为止。然后继续搅拌 5 min,获得的金颗粒直径在
胶体金分散颗粒制备实验——乙醇超声波还原法
实验步骤1. 取 1% AuCl3 • HCl 水溶液 1 ml 加入 100 ml 双重蒸馏水。2. 用 0~2mol/L K2CO3 调 pH 至 7.2,再加入 1 ml 无水乙醇。3. 用 20 KC、135 W 超声波探头浸入溶液内进行超声振荡,此法制备的颗粒为 6~10 nm。
免疫标记电镜技术标本制备的要求
为保持组织的抗原性,固定剂不宜过强。 1.包埋前染色 优点是切片染色前不经过锇酸固定、脱水及树脂包埋等过程,抗原未被破坏,易于获得良好的免疫反应。特别适用于含抗原量较少的组织。 2.包埋后染色 优点是超微结构保存较好,方法简便,阳性结构有高度的可重复性,能在同一张切片上进行多重免疫染色。
免疫学技术:免疫血清制备方法
免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时
免疫球蛋白抗血清制备方法
免疫球蛋白抗血清制备方法此法用于制备间接法抗抗体。因抗原为可溶性,故多需加佐剂。(1)淋巴结注射法1)选择体重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),编号;2)在家兔两后脚掌共注射活卡介苗,50mg(约0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮内0.2mL)。7~10d后,鼠或国窝处淋巴结肿大如黄豆或
颗粒剂的制备
实验材料 大清叶板蓝根连翘拳参试剂、试剂盒 纯化水乙醇蔗糖粉糊精仪器、耗材 烧杯玻璃棒天平旋蒸仪圆底烧瓶桑皮纸实验步骤 一、准备 1. 原辅料的处理: 根据药材的有效成分不同,可采用不同的溶剂和方法进行提取,一般多用煎煮法提取有效成分,用等量乙醇精制时放置的时间、回收乙醇后放置的时间可根据实验安排