PhageTiter

IntroductionLambda phage is a commonly used vector for transgenes. Its very high rate of infectivity makes it ideal for creating large numbers of clones. Large numbers of clones are often needed for construction of gene libraries that represent large populations of molecules. These libraries are also easy to sort through, as lambda phage clones are particularly easy to array spatially at high density. This is called ......阅读全文

High-Efficiency-Transformation

Day 0Make sure you have the necessary solutions (instructions for how to make them can be found here):Single-stranded carrier DNAPEG 3350 50% w/vol1.0

烈性噬菌体的简介

  噬菌体的繁殖一般分为5个阶段,即吸附、侵入、增殖(复制与生物合成)、成熟(装配)和裂解(释放)。凡在短时间内能连续完成以上5个阶段而实现其增殖的噬菌体,称为烈性噬菌体(virulent phage),反之则称为温和噬菌体(temperate phage)。

核酸的修饰酶

The restriction/modification system in bacteria is a small-scale immune systemfor protection from infection by foreign DNA. W. Arber and S. Linn (1969

Genomic-Libraries

Genomic DNA libraries Size of some genomes and chromosomes:Comparative Sequence Sizes(Bases)(yeast chromosome 3)350 ThousandEscherichia coli (bacteriu

氨水滴度的概念和换算

滴度(Titer,缩写tt或Ti),是在氮肥企业里,表示溶液中的常用名词,是以物质的量浓度(mol/L)的1/20为单位来表示的浓度,即1mol/L相当于20tt。氨水滴度换算1滴度=1/20当量浓度=1/20×17克氨/升=0.85克氨/升

Lambda-DNA-Preparation

Lambda DNA PreparationThis is a plate method that gives very good yield for cloning. I have combined the Promega and Maniatis protocols.Solutions T-TY

含量计算滴定度

滴定度用T表示。T为滴定度的英文单词 titer的缩写,单位为mg/mL。滴定度是滴定液浓度的一种特殊表示形式使用滴定度可以使滴定结果的计算简化,即WA=T×VB,被各国药典所采用。被测药物的摩尔质量不同,与滴定剂反应的摩尔比不同,因此,同一滴定液对不同被测药物的滴定度也是不同的,滴定度计算如式2所

血清学筛选克隆新抗原/新基因(二)

19. 第一轮筛选得到阳性克隆需要进行第二轮筛选以去除假阳性并获得阳性单克隆噬菌体。过程如第一轮筛选,只不过用直径90mm 平板;具体过程见步骤4,这时所加入的噬菌体溶液是第一轮筛选得到的噬菌体上清(见步骤18),在用前要滴定好噬菌体的滴度,噬菌斑的数量以可区分出单个克隆,同时密度不能太稀为

EZ-96®-M13-Isolation-Spin-Protocol

实验概要The  E.Z.N.A.™ family of products is an innovative system that radically  simplifies the extraction and purification of nucleic acids from a  vari

EZ-96®-M13-Isolation-Vacuum-Manifold-Protocol

实验概要The  E.Z.N.A.™ family of products is an innovative system that radically  simplifies the extraction and purification of nucleic acids from a  vari

针对病毒包装五大环节的解决方案

不论是细胞治疗还是基因治疗都离不开病毒载体。目前使用最多的病毒载体类型包括:腺相关病毒(AAV)、慢病毒(Lv)、逆转录病毒(Rv)和腺病毒(Adv)等,这些常用病毒载体特性如下图所示:特征慢病毒Lentivirus逆转录病毒Retrovirus腺相关病毒AAV腺病毒ADV基因表达稳转/瞬转稳转瞬转

EZ-96®-M13-Isolation-Vacuum-Manifold-Protocol

实验概要The  E.Z.N.A.™ family of products is an innovative system that radically  simplifies the extraction and purification of nucleic acids from a  vari

Single-Primer-(SemiRandom)-PCR

DescriptionSingle primer PCR allows amplification from known to unknown regions in chromosomes, phage, plasmids, large PCR products and other sources

DNA克隆

DNA克隆(主要内容如下)·         General Procedure·         PCR Cloning·         Subcloning·         ET Cloning·         Vector Preparation·         Ligation Re

细胞化学词汇DNA噬菌体

中文名称:DNA噬菌体英文名称:DNA phage定  义:能感染细菌并在细菌内复制自身的DNA病毒。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

什么是DNA噬菌体?

中文名称DNA噬菌体英文名称DNA phage定  义能感染细菌并在细菌内复制自身的DNA病毒。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

核酸以及核苷酸的基本换算

核酸以及核苷酸的基本换算1.核酸的换算:(1.1) 摩尔数与质量:1 mg 1,000bp DNA = 1.52 pmol1 mg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol1 mg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol1 mg SV40 DNA

近百项吸入式疫苗研发进行时,粘膜免疫效果该如何评价

时隔三年,新冠仍在蔓延自2019年底至今,已经持续三年之久的新冠疫情仍旧不断困扰着人们的生活,不断进化的新型变异毒株伴随着更强的免疫逃逸能力与更强的传播能力。尽管疫苗研发的脚步从未停止,但不断升级的新冠病毒依然给疫苗接种效果及免疫屏障的建立带来挑战。目前全球获批的新冠疫苗多依赖于肌肉注射给药,其均被

关于烈性噬菌体的基本介绍

  烈性噬菌体也称为毒性噬菌体,噬菌体的繁殖一般分为5个阶段,即吸附、侵入、增殖(复制与生物合成)、成熟(装配)和裂解(释放)。凡在短时间内能连续完成以上5个阶段而实现其增殖的噬菌体,称为烈性噬菌体(virulent phage)

血清学筛选克隆新抗原/新基因(一)

一、E.coli/phage 裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes(NC)浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中,室温下水平摇动30

基因克隆(gene-clone)的几种常用方法介绍2

其基本原理是:用一个在种源上相近的基因组将靶基因组中所有共同的基因掩盖起来,而只暴露出特异的基因,在整个反应中只有特异基因能被扩增。其操作程序为:(1)用同一限制性内切酶(一般用Bam HI,Bgl II或Hind III)同时处理靶基因组和掩盖基因组DNA,其中掩盖基因组DNA的量至少要2

噬菌体肽文库的定义

中文名称噬菌体肽文库英文名称phage peptide library定  义将编码多肽的外源基因插入含噬菌体外壳蛋白基因的载体,构建得到能与外壳蛋白融合表达多肽的基因文库。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

什么是噬菌体肽文库?

中文名称噬菌体肽文库英文名称phage peptide library定  义将编码多肽的外源基因插入含噬菌体外壳蛋白基因的载体,构建得到能与外壳蛋白融合表达多肽的基因文库。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

Polyclonal-Antibody-Production

实验概要Very useful for rapid and simple generation of antibodies for western blots, ELISA assays, and immunoprecipitation.实验步骤Rabbit Immunization Initial

Immunoblot-Protocol

This method was successful in our lab using prostate tissue and for our specific objectives. Investigators must be aware that they will need to tailor

血清学筛选克隆新抗原/新基因——血清学筛选法

通过以血清的各种反应为中心的机体免疫反应和变态反应的研究体系来筛选新抗原和新基因。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒TBST 裂解液 血清 NZY top IPTG 一抗 二抗 SM 封闭液 MgSO4 LB AP BCIP-NBT 显色液仪器、耗材硝酸纤维素膜 滤纸 冰箱 培养箱 水浴锅 平板 脱色摇床

什么样的噬菌体都能感染大肠杆菌吗

不能那么理解。噬菌体(bacteriophage, phage)是感染细菌、真菌、藻类 、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称,因部分能引起宿主菌的裂解,故称为噬菌体。根据以上定义可以看出,噬菌体不但可以感染大肠杆菌,还可以感染其他细菌及真菌等,而感染真菌等的大肠杆菌是不能再感染细菌的。

血清学选克隆新抗原或新基因

实验材料血清试剂、试剂盒E.coli phagelysateTBSTNZY agar platesMgSO4IPGTTBSBCIP-NBTSM bufferchloroformLB培养基仪器、耗材nitrocellulose membranes滤纸恒温培养箱-80℃低温储藏箱分光光度计低温离心机恒温

血清学选克隆新抗原或新基因

实验材料 血清试剂、试剂盒 E.coli phagelysateTBSTNZY agar plates MgSO4IPGTTBSBCIP-NBTSM bufferchloroformLB培养基仪器、耗材 nitrocellulose membranes滤纸恒温培养箱-80℃低温储藏箱分光光度计低温离

关于细菌噬菌体的基本信息介绍

  噬菌体(phage)是侵袭细菌的病毒,也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。噬菌体必须在活菌内寄生,有严格的宿主特异性,其取决于噬菌体吸附器官和受体菌表面受体的分子结构和互补性。噬菌体是病毒中最为普遍和分布最广的群体。通常在一些充满细菌群落的地方,如:泥土、动物的肠道里,都可以找到噬菌体。