噬菌体肽文库的定义
中文名称噬菌体肽文库英文名称phage peptide library定 义将编码多肽的外源基因插入含噬菌体外壳蛋白基因的载体,构建得到能与外壳蛋白融合表达多肽的基因文库。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)......阅读全文
噬菌体肽文库的定义
中文名称噬菌体肽文库英文名称phage peptide library定 义将编码多肽的外源基因插入含噬菌体外壳蛋白基因的载体,构建得到能与外壳蛋白融合表达多肽的基因文库。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
什么是噬菌体肽文库?
中文名称噬菌体肽文库英文名称phage peptide library定 义将编码多肽的外源基因插入含噬菌体外壳蛋白基因的载体,构建得到能与外壳蛋白融合表达多肽的基因文库。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
噬菌体文库的扩增实验
文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但在扩增时由于克隆的生长速率不同,文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但
噬菌体文库的扩增实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 MgSO4麦芽糖琼脂糖氯仿DMSOSM仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅实验步骤 1. 制备铺平板菌(1)2.5 ml 新鲜过夜培养的宿主菌液接种于250 ml 含0.2%麦芽糖和10 mmol/l MgSO4的LB培养液中。(2)在37℃恒温摇床剧烈摇荡2~4 h,
噬菌体文库的扩增实验
基本方案 实验材料 噬菌体 试剂、试剂盒
创建轻链改组噬菌体文库
[器材和试剂]● PCR试剂和设备● 含有起始scFV基因的载体pHENl单链模板DNA(50ng/ul)● Geneclean试剂盒● Wlzard PCR纯化试剂盒● scFvJHL2XhoFOR引物:5'-GAG TCA TTC TCG TCT CGA GAC GGT GAC
噬菌体文库的铺平板和转移实验
基本方案 实验材料 噬菌体 试剂、试剂盒
文库甘油储存料中噬菌体抗体的制备
实验概要本实验从文库甘油储存料中制备了噬菌体抗体。主要试剂1. 2×TY/amp/glu培养基2. TYE/amp/glu平板3. 含有25ug/ml卡那霉素和2%葡萄糖的TYE平板(TYE/kan/glu)4. 含100ug/ml氨苄青霉素和25ug/ml卡那霉素的2×TY培养基(2×TY/amp
噬菌体文库的铺平板和转移实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 琼脂糖LBNaOHSSCTris·Cl仪器、耗材 硝酸纤维素膜培养箱实验步骤 1. 通过系列等比稀释滴定噬菌体文库的滴度。 2. 重组噬菌体与铺平板的宿主菌混合于培养试管中(表一),于37 ℃温育20 min。 表一、噬菌体文库铺平板组分最佳配制方法 3. 按每个
文库甘油储存料中噬菌体抗体的制备
实验概要本实验从文库甘油储存料中制备了噬菌体抗体。主要试剂1. 2×TY/amp/glu培养基2. TYE/amp/glu平板3. 含有25ug/ml卡那霉素和2%葡萄糖的TYE平板(TYE/kan/glu)4. 含100ug/ml氨苄青霉素和25ug/ml卡那霉素的2×TY培养基(2×TY/amp
肽库合成技术及文库介绍
肽库是用于从大批量多肽中筛选极少量具关键生物活性的多肽的一种方法,在生物学和化学研究中,肽库是一种强大的筛选工具,在蛋白质组学及其相关领域应用范围非常广泛,如药物研发、蛋白-蛋白相互作用、抗原表位筛选、GPCR配体筛选、蛋白功能分析、酶底物或抑制剂筛选、信使分子研发及多肽/蛋白信号对答等。1. 截头
温和噬菌体的定义
噬菌体侵入宿主细胞后,噬菌体的DNA只整合在宿主的核染色体上,并可长期随宿主DNA的复制而进行同步复制,一般情况下不进行增殖,不引起宿主细胞裂解的噬菌体,称温和噬菌体或溶源噬菌体。
脂肽的定义
中文名称脂肽英文名称lipopeptide定 义含有脂质与氨基酸的化合物或复合体。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),脂质(二级学科)
利用λ噬菌体文库筛选-DNA-结合蛋白实验
可利用合成双链寡核苷酸筛选构建于λ噬菌体的 cDNA 表达文库,以鉴定与特异 DNA 结合蛋白质相对应的克隆(Singhetal.1988,Vinsonetal.1988)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒ATP结合缓冲液变性溶
利用λ噬菌体文库筛选-DNA-结合蛋白实验
试剂、试剂盒 ATP结合缓冲液变性溶液二硫苏糖醇EDTA乙醇激酶 连接酶缓冲液酚氯仿筛选缓冲液SDS醋酸钠TET4 噬菌体 DNA 连接酶T4 噬菌体多核苷酸激酶合成的寡核苷酸[a-32P]ATP非变性聚丙烯酰胺凝胶仪器、耗材 烤盘结晶皿平头镊子装有防水黑墨水注射器硝酸纤维素滤膜Sephadex G
利用λ噬菌体文库筛选-DNA-结合蛋白实验
试剂、试剂盒 ATP 结合缓冲液 变性溶液 二硫苏糖醇 EDTA 乙醇激酶 连接酶缓冲液 酚 氯
噬菌体展示技术的定义
噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白基因与噬菌体特定蛋白基因在其表面进行融合表达的新技术。该技术实现了表型与基因型的统一。随着噬菌体展示技术的进一步发展,其优越性被越来越多的实验室所认识,使得该技术的使用范围不断扩展,也使该技术得以不断的完善和发展。
尾紧张肽的定义
中文名称尾紧张肽英文名称urotensin定 义最初发现是由硬骨鱼的尾垂体分泌的而得此名。主要有两种类型。尾紧张肽Ⅰ是四十一肽,存在于中枢神经系统中,通过释放儿茶酚胺发挥作用,调节血管弹性,影响血压;尾紧张肽Ⅱ在灵长类动物中是强烈血管收缩剂。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),激素与维生素(
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验
在典型的免疫筛选实验中,λ噬菌体表达载体构建的文库应铺在不含异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG) 的大肠杆菌菌株的平板上。诱导物的缺少保证了噬菌斑顺利形成前不产生对宿主有毒性的融合蛋白,2~4 h 后,将平板从 42°C 移到 37°C 以稳定温度敏感型的所有融合蛋白。本实验来源于分子克隆实验指
利用血清筛选噬菌体文库PCR扩增的模板
[器材和试剂] ●MicroAmp反应管(PerkinElmer) ●洗脱缓冲液(20mmol/LTris—ClpH8.5,2mmol/LEDTA,1%TritonX—100) ●GeneAmp9600PCR仪(PerkinElmer) ●正向引物:5’—AGAGATTA
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液 氯仿 IPTG 抗原-抗体复合物检测试剂 SM TNT 缓冲液 洗涤缓冲液 放射
噬菌体文库的铺平板和转移实验——基本方案
文库一旦包装就应该尽快进行扩增,它可以大大增加文库的拷贝数,但在扩增时由于克隆的生长速率不同,文库的组成可能会出现某种潜在的改变。这种文库克隆组成比率的变化可以通过把文库克隆预吸附到细菌上并使用一种高密度铺平板和短期培养的方法而尽量减少。实验材料噬菌体试剂、试剂盒琼脂糖LBNaOHSSCTris·C
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验(一)
试剂、试剂盒 封闭缓冲液氯仿IPTG抗原-抗体复合物检测试剂SMTNT 缓冲液洗涤缓冲液放射性碘标记第二抗体第一抗体LB 琼脂板LB 顶层琼脂板硝酸纤维素滤膜λ噬菌体表达文库E.coli仪器、耗材 预设 42°C 的空气培养箱培养管平头镊子装有防水黑墨水(印度墨水)并带有 18 号针头的注射器实验步
筛选构建于λ噬菌体载体的表达文库实验(二)
方法λ噬菌体的平板培养1. 取适当大肠杆菌菌株的单克隆进行接种,按第 2 章方案 1 介绍的方法制备用于铺平板的培养细菌。2. 假定每个 90 mm 平皿和 150 mm 平皿分别可长出 2X104 个和 5X104 个噬菌斑,计算筛选文库所需平皿数。对应每个平皿准备一个无菌试管(13 mm
食欲肽的定义和功能
食欲肽, 亦称为下丘脑泌素,亦有人称之为食欲肽、食欲肽及食欲因子,是对两种不同的神经肽激素的统称。食欲肽具高度兴奋作用。食欲肽是两组不同的研究者通过老鼠大脑的研究同时被发现的。
促信息素肽的定义
中文名称促信息素肽英文名称pheromonotropin定 义能促进信息素生成的神经肽。应用学科生态学(一级学科),化学生态学(二级学科)
抑信息素肽的定义
中文名称抑信息素肽英文名称pheromonostatin定 义能抑制信息素生成的神经肽。应用学科生态学(一级学科),化学生态学(二级学科)
肽合成的定义和特点
中文名称肽合成英文名称peptide synthesis定 义(1)细胞内蛋白质合成过程中多肽的形成。(2)用人工方法将各种氨基酸按照预先设计顺序依次连接成多肽的方法。目前最常用的是固相合成法,将氨基酸挂在树脂上合成肽链,可以自动化操作。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学
噬菌体展示技术常见问题与解答
1、在噬菌体展示技术的应用中,M13噬菌体与其他噬菌体比有什么优点? M13噬菌体和与其密切相关的丝状噬菌体fd和f1均为非裂解性噬菌体,它们在增殖期间均不裂解宿主菌。这就极大地简化了每轮淘选过程之间的中间噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法就足以将噬菌体与其他所有污染的细胞蛋白分开
λ噬菌体的溶源性的定义
溶源性,代表λ噬菌体在大肠杆菌体内可以呈环形分子存在于细胞质中,也可通过整合酶的作用而整合到寄主染色体上成为原噬菌体状态。