BACEndSequencing
BAC End-Sequencing(Diana Bocskai)For every 4 mls of culture, dissolve the BAC DNA pellet in 40 µl of water. for example: Usually each BAC is grown in 20 mls LB/CM total, then is dispensed into one Autogen tube (4 mls in each of the 5 tubes). After miniprep, add 40 µl of water to each tube (200 µl total for each BAC).Vortex the Autogen tube and let sit for at least 0.5 hour. Then pool the 5 samples into one for each B......阅读全文
高容量载体中基因组DNA片段末端的分离(小载体PCR)
实验方法原理 许多真核生物的基因所包含的 DNA,远非单个重组子所能容纳得了的。对于大多数染色体来说,更是如此。因此,必须构建一套重叠的 DNA 克隆,这些克隆的 DNA 按次序排列能形成叠连序列(叠连群),可以涵盖一个很大的基因或目的区域。实验材料 T4 噬菌体 DNA 连接酶限制性内切核酸酶 P
磷酸苯丙哌林的检查方法
检查溶液的澄清度与颜色取本品0.50g,加水5ml溶解后,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液通则0902第一法)比较,不得更浓;如显色,与对照液(取黄色3号标准比色液12.5ml,加水至25m1)比较(通则0901第法),不得更深。氯化物取本品0.50g,依法检查(通则0801),与标准氯化
Southern印迹(DNA从一块琼脂糖凝胶上同时向两张膜转移)
实验方法原理 DNA 可以同时从琼脂糖两面向两张膜上转移。当需要用两种不同的探针分析相同的限制性内切核酸酶酶切片段时,这种方法是很有用的。DNA 片段转移速率较快,但是由于凝胶中的液体从两侧同时流出导致脱水速率太快,所以转移效率较低。当靶
克隆技术(十四)
中国应用作为新世纪的尖端科学,克隆技术从它诞生的那一刻起就吸引了众多世人的目光。作为世界最大的发展中国家,中国一直在致力于前沿科学的研究。据目前的状况来看,克隆作为新兴的技术在中国得到前所未有的关注而且硕果累累:1、2000年6月16日,由西北农林科技大学动物胚胎工程专家张涌教授培育的世界首例成年体
RNA-FISH-on-cultured-cells-in-interphase
IntroductionFluorescence in situ hybridization (FISH) has become a widely used method in genome and molecular genetic studies. The technique is highly
磷酸苯丙哌林的检测方法
溶液的澄清度与颜色取本品0.50g,加水5ml溶解后,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液通则0902第一法)比较,不得更浓;如显色,与对照液(取黄色3号标准比色液12.5ml,加水至25m1)比较(通则0901第法),不得更深。氯化物取本品0.50g,依法检查(通则0801),与标准氯化钠溶
杭州检验检疫局服务高校科研事业侧记
把好实验鼠的进口关―――杭州检验检疫局服务高校科研事业侧记 近年来,随着国内高等院校对外学术交流活动的增多,科研用的实验动物(以实验鼠为主)、病原微生物等进出境数量逐年增加。今年以来,以浙江大学为代表的一批浙江省内高校、科研单位已陆续从美国芝加哥大学、英国剑桥大学等国外著名大学引进了8
Southern印迹(DNA从一块琼脂糖凝胶上同时向两张膜转移)
实验方法原理 DNA 可以同时从琼脂糖两面向两张膜上转移。当需要用两种不同的探针分析相同的限制性内切核酸酶酶切片段时,这种方法是很有用的。DNA 片段转移速率较快,但是由于凝胶中的液体从两侧同时流出导致脱水速率太快,所以转移效率较低。当靶序列的浓度较高时这种方法效率最高,例如分析克隆的
SJ410三丰便携式Mitutoyo粗糙度仪维修
SJ-410三丰便携式Mitutoyo粗糙度仪维修 苏州美方机电有限公司为你提供SJ-410产品型号,产品报价,产品维修,有专业技术人员上门服务! 产品图片: SJ-410三丰便携式Mitutoyo粗糙度仪维修丰富的选件可更加轻松,顺畅的实现正确的测量, 1.专业维修三丰
利用表型组学辅助筛选技术开发高效植物育种表型预测...
利用表型组学辅助筛选技术开发高效植物育种表型预测因子2019年7月,Plant Phenomics刊发了由来自美国爱荷华州立大学(Iowa State University)的Kyle Parmley等人撰写的题为Development of Optimized Phenomic Predi
高容量载体中基因组DNA片段末端的分离(小载体PCR)
实验方法原理 许多真核生物的基因所包含的 DNA,远非单个重组子所能容纳得了的。对于大多数染色体来说,更是如此。因此,必须构建一套重叠的 DNA 克隆,这些克隆的 DNA 按次序排列能形成叠连序列(叠连群),可以涵盖一个很大的基因或目的区域。
磷酸苯丙哌林检查
溶液的澄清度与颜色取本品0.50g,加水5ml溶解后,溶液应澄清无色;如显浑浊,与1号浊度标准液通则0902第一法)比较,不得更浓;如显色,与对照液(取黄色3号标准比色液12.5ml,加水至25m1)比较(通则0901第法),不得更深。氯化物取本品0.50g,依法检查(通则0801),
人源抗体基因小鼠研发及其在治疗疾病中的应用(三)
2014年,科学家们应用细菌人工染色体(BAC)和Cre/loxP重组技术,在体外ES细胞系上,将人源抗体重链(V-D-J)可变区和轻链(Vk-Jk)可变区分别插入到小鼠重链恒定区(Cμ )和轻链恒定区(Ck) 的上游区域,在不影响小鼠抗恒定区的基础上,成功构建了KyMouse小鼠模型。Ky
高容量载体中基因组DNA片段末端的分离(小载体PCR)
许多真核生物的基因所包含的 DNA,远非单个重组子所能容纳得了的。对于大多数染色体来说,更是如此。因此,必须构建一套重叠的 DNA 克隆,这些克隆的 DNA 按次序排列能形成叠连序列(叠连群),可以涵盖一个很大的基因或目的区域。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理许多真核生物
非编码序列内含子子长度多度性((ILPs)
实验概要本实验中运用Perl脚本用于比较Nipponbare和93-11基因组序列,从而开发潜在的ILP标记,通过EPIC-PCR开发候选ILP标记,最后用实验验证及评价了ILP标记。实验步骤1. 水稻釉粳亚种基因组比较搜索ILP我们运用Perl脚本用于比较Nipponbare和93-11基因组序列
Southern印迹(DNA从一块琼脂糖凝胶上同时向两张膜转移)
DNA 可以同时从琼脂糖两面向两张膜上转移。当需要用两种不同的探针分析相同的限制性内切核酸酶酶切片段时,这种方法是很有用的。DNA 片段转移速率较快,但是由于凝胶中的液体从两侧同时流出导致脱水速率太快,所以转移效率较低。当靶序列的浓度较高时这种方法效率最高。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂
GenBank数据库概述(二)
FTP GenBank and Daily Updates:1. GenBank普通文件格式 — 参见GenBank记录样本和在GenBank公布通知中的详细描述,下载大多数最近的完全公告和日常积累或非积累更新数据。 2. ASN.1格式 — 摘要句法记号1,国际标准组织(ISO)数据表示格式,下载
著名华裔院士:CRISPR/Cas9介导的荧光原位杂交
加州大学伯克利分校生物化学与分子生物学系钱泽南(Robert Tjian)教授是美国著名华裔生物化学家,其以研究真核生物细胞遗传信息转录闻名,担任国际顶级生物学期刊《Cell》杂志的编委,1991年当选美国国家科学院院士,2009年担任美国霍华德•休斯医学研究所(HIMI)主席。科学界将其与著名
石墨烯增强车已经问世了,其9大发展趋势赶快看看吧
领先的新技术行业研究公司壹行研(Innova Research)在总结2017年初出版的《2017年全球石墨烯七大趋势》的基础上,最新公布了2018全球石墨烯九大趋势。这九大趋势分别对未来石墨烯制备、行业政策与相关投资、价格走势、以及石墨烯在先进电子、储能、复合材料等各大主要应用领域的发展趋势做
磷酸苯丙哌林鉴别与检查
鉴别(1)取本品约20ng,加水5ml溶解后,加稀盐酸ml,加硫氰酸铬铵试液3~5滴(或少许颗粒),产生粉红色沉淀。(2)取本品少量,加水0.5m1溶解后,加0.2%对二甲氨基苯甲醛试液3ml,振摇,数分钟后显粉红色至红色。(3)取本品制成0.01%水溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,
农林RNA测序助力玉米籽粒Dek10突变体研究
呼吸作用是线粒体最重要的代谢。其中,线粒体中5个和呼吸相关的复合物起到了重要影响。很多呼吸链相关蛋白都是由线粒体基因组编码的。这些RNA会受到细胞核内诸如pentatricopeptide repeat (PPR) 蛋白的转录后修饰。玉米defective kernel 10(dek10) 是一
基因工程操作技术及原理之基因克隆
1.克隆已知序列的基因根据已知基因的序列设计引物(primer),利用PCR方法克隆基因。即使不同种属之间,基因编码区序列的同源性高于非编码区的序列。在某种植物的同源基因被克隆的条件下,可先构建eDNA文库或基因组文库,然后以该基因(或部分序列)为探针来筛选目的基因的克隆。2.功能克隆根据基因的产物
磷酸苯丙哌林的鉴别检查方法
鉴别(1)取本品约20ng,加水5ml溶解后,加稀盐酸ml,加硫氰酸铬铵试液3~5滴(或少许颗粒),产生粉红色沉淀。(2)取本品少量,加水0.5m1溶解后,加0.2%对二甲氨基苯甲醛试液3ml,振摇,数分钟后显粉红色至红色。(3)取本品制成0.01%水溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,
活体电穿孔法介绍1
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~1
活体电穿孔法介绍(一)
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~1
DNA测序仪:454测序仪
454测序仪的出现极大促进了测序业务的开展,科研人员已经将测序技术作为解决科研工作中许多常见 问题的利器。这是因为454测序仪在以下几个方面取得了质的突破:首先是解决了高通量测序问题;其次它简 化了样品准备步骤,将以往转化大肠杆菌扩增质粒的繁琐过程全部用简单的体外PCR扩增法替代了;最后, 它缩小了
广口瓶法测定植物的呼吸速率
呼吸速率是植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。测呼吸速率的方法虽很多,但不外乎测定CO2的释放量或O2的吸收量两类方法。本实验用广口瓶法测定植物的呼吸速率,并比较不同萌发阶段小麦种子及幼芽的呼吸速率。【原理】在密闭容器中加入一定量碱液(一般用Ba(OH)2),并悬
基因工程操作技术及原理之基因克隆
1.克隆已知序列的基因 根据已知基因的序列设计引物(primer),利用PCR方法克隆基因。即使不同种属之间,基因编码区序列的同源性高于非编码区的序列。在某种植物的同源基因被克隆的条件下,可先构建eDNA文库或基因组文库,然后以该基因(或部分序列)为探针来筛选目的基因的克隆。 2.功能克隆 根据基
深度处理“活性炭与超滤膜”组合工艺
据《新世纪周刊》的报道,水源污染日趋严重和饮用水水质标准提高的双重压力,对饮用水处理工艺提出了更高的要求。联合国也曾把饮用水的安全保障和基本卫生设施的扩大,作为千年计划目标之一。可见,针对目前十分严峻的饮用水水源污染的现状,开发可靠、经济、简便,与水源水质相适应的饮用水深度处理技术,保证饮用水安全是
临床诊断中的FISH检测
FISH(即荧光原位杂交)技术作为分子诊断的重要工具,在科研和临床诊断领域都有着广泛的应用。FISH检测是利用荧光基团标记DNA探针,再将标记的DNA探针与样本DNA进行原位杂交,最后在荧光显微镜下对荧光信号进行计数,以此作为诊断的依据。FISH的操作简便快捷,结果直观准确,因此FISH成了许多疾病