Cosmid提取技术
Day OneStart overnight cultures of Cosmid in fresh L-Broth + 25 ug/ml kanamycin. 4 x 250 ml each, inoculate each with metal loop from frozen glycerol stocks.Grow cultures for 12 hours(do not let go for more than 14 hrs.)Day TwoSpin down cultures in 250 ml bottles in Beckman JA-17 rotor at 6,000 rpm for 15 min.Pour off sups, freeze pellets at -20°C for 10 min.Resuspend in 10 ml GET solution + 1 mg/ml lysozyme each, tr......阅读全文
溶菌酶的粗提取
一、实验目的与内容目的:1. 掌握等电点沉淀法进行初级分离的操作方法和注意事项;2. 掌握测定蛋白质标准曲线的制作方法;3. 能针对不同的目标产物选择恰当的初级分离方法,锻炼应用生物分离技术知识分析、解决实际问题的能力。内容:1. 从鸡蛋清中粗提取出溶菌酶; 2. 制作测定蛋白质的标准曲线。
胰酶分离提取
一、原理与目的提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活
提取悬浮细胞RNA
提取RNA器械:离心管2支,吸管4个,酒精灯,打火机,记号笔,200ul,1000UL枪,DEPC泡过的枪头EP管,紫外照过的手套。滤纸,DEPC纯水(750ml无水乙醇+150mlDEPC水,剧烈振荡,使劲的摇晃,直至混匀),氯仿,75%酒精,异丙醇,Trizol,预冷的离心机(两种),EP管架(
DNA提取方法介绍
DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式:酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有硅质材料、阴离子交换树脂等。
植物病毒RNA提取
大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。 一、材料 提纯TMV病毒液(10mg/ml)。 二、设备 冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。 三、试剂 TE-饱和酚:氯仿(1:1),氯仿
提取核酸的步骤
一、DNA的分离利用核蛋白溶于水和高盐溶液,但不溶于生理盐溶液的性质进行分离。流程:破细胞→浓盐溶液提取→生理盐溶液沉淀→苯酚变性除蛋白→水相DNA用冷乙醇沉淀。
动物DNA提取实验
标签: 动物肝脏 DNA 提取动物肝脏DNA提取可以:(1)用于法医学鉴定;(2)
DNA提取仪特点
大屏幕全中文操作 大屏幕全中文显示;触屏式操作,简单易用。 精确控制 内建工程用电脑,无需再连接个人电脑;单机操作节省更多的空间与能源,并提供高稳定度的自动化控制系统。 温度控制 可根据需求自定义裂解、洗脱温度。 自由编程 强大的程序编辑功能;灵活、高效地定义您的应用,可满足不同试剂要求。
几种核酸提取方法
(1)浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M Nacl抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的CCL3一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及CCL3相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来. 也可用
核酸提取那些事儿
最近有篇报道“Nucleic acid purification from plants,animals and microbes in under 30 seconds”即利用试纸条30秒内纯化动物、植物和微生物的核酸,发表在PLoS Biology期刊上,引起热议,故对现核酸提取扩增尽己所能进行
质粒提取实验步骤
实验原理现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法,前两种方法较为剧烈,适用于较小的质粒(<15Kb),而去污剂裂解法则比较温合,一般用于分子量较大的质粒(>15Kb)。碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为:染色体DNA远大于质粒DNA,且染色体DNA为线状分
辣椒精油提取设备
分子蒸馏是一种特殊的液--液分离技术,它不同于传统蒸馏依靠沸点差分离原理,而是靠不同物质分子运动平均自由程的差别实现分离。所谓分子运动自由程是指相邻量词碰撞之间所走的路程。 当液体混合物沿加热筒体流动并被加热,轻、重分子会逸出液面而进入气相,由于轻、重分子的自由程不同,因此,不同物质的分子
如何提取总蛋白?
大家目前最常用的方法是利用溶液法进行蛋白提取(如 RIPA 裂解液),但是往往会在蛋白质提取中产生两个不同的组分,即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分。通常 RIPA 不可溶性组分被我们直接丢弃忽略。但是已经有文章证实许多蛋白质存在于被丢弃的 RIPA 不可溶性组分中。也就是说
几种核酸提取方法
几种核酸提取方法(1)浓盐法 利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M Nacl抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的CCL3一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及CCL3相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀
植物RNA提取实验
直接研磨法 液氮研磨法 实验方法原理 通过裂解液β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离
核蛋白提取实验
实验材料水稻悬浮细胞试剂、试剂盒匀浆液裂解缓冲液SDS 样品缓冲液磷酸缓冲液实验步骤( 1 ) 按照 Morre 和 Anderson 的方法从水稻悬浮细胞中分离细胞核,本文对方法进行了一些改动。所有分离细胞核的步骤都在冰上或 4°C 进行。( 2 ) 3000 g 离心 5 min 收集约 3 g
核酸提取方法大全
核酸是生物体内的高分子化合物。它包括脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)和核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)两大类。DNA和RNA都是由一个一个核苷酸(nucleotide)头尾相连而形成的。RNA平均长度大约为2000个核苷酸,而人的DNA却是很长的,约
dna提取实验步骤
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液。在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M。加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出。分别用66%,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品。此法提取的DNA中
真菌RNA提取实验
液氮研磨法 实验方法原理 液氮研磨可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚
怎样提取上清液
这个还是有难度的,一般上清里分泌的目的蛋白很少。所以首先建议您用无血清培养基培养你的细胞。 收集上清比较简单,直接把上清收到离心管里,离心一下去掉细胞什么的,再用超滤管浓缩一下上清,不然的话上清还是太稀了。。
RNA提取与纯化
实验概要掌握RNA提取的基本技术,了解RNA提取过程中的各种注意事项。实验原理RNA提取是分子生物学实验中难度较大的实验技术。 RNA提取和DNA提取有类似的地方,因为它们都是核酸,都具有较好的水溶性。提取RNA首先破碎细胞,然后用提取液将RNA溶出,反复抽提去除蛋白质,加入乙醇沉淀RNA,将RNA
中药提取方法详解
中药的化学成所含成份十分复杂,既有含有多种有效成份,又有无效成份,也包含有毒成份。提取其有效成分并进一步加以分离、纯化,得到有效单体是中药研究领域中的一项重要内容。中药提取就是利用一些技术最大限度提取其中有效成份,使得中药制剂的内在质量和临床治疗效果提高,使中药的效果得以最大限度的发挥。 中
细菌DNA提取方案
细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,如E.coli,一般有三种可以选择的方法。一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时。2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟。3、12000转/分钟 离心10分钟
组织mRNA提取方法
(一)总RNA提取-Trizol法Trizol法适用于人类、动物、植物、微生物的组织或培养细菌,样品量从几十毫克至几克。用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染。RNA可直接用于Northern斑点分析,斑点杂交, Poly(A)+分离,体外翻译,RNase封阻分析和分子克隆。1、将组织在
DNA提取的原理
原理:1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5min2.溶解DNA:3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤:取黏稠物5.再溶解:顺时
总RNA的提取
完整RNA 的提取和纯化,是进行RNA 方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA 分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点,即1):样品细胞或组织的有效破碎;2),有效地使核蛋白复合体变性;3),对内源RNA酶的有效抑制;4)
如何提取卵黄抗体?
卵黄的收集:首先需要从鸡蛋中收集卵黄。 卵黄的破碎和匀浆:将收集到的卵黄通过机械或化学方法破碎,形成均一的悬浮液。 初步分离:通过离心等物理方法,将卵黄中的大颗粒物质分离出来,留下上清液。 蛋白质纯化:利用离子交换层析、凝胶过滤层析或亲和层析等技术,根据卵黄抗体与其他蛋白质不同的物理化学性
如何提取目的基因
1.从基因文库中获取目的基因(俗称:鸟枪法):将含有某种生物的许多dna片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库。当需要某一片段时,根据目的基因的有关信息,如根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mrna,以及基因的表达产物蛋白
膜蛋白提取方法
膜蛋白具有许多重要的细胞功能,对生物体存在至关重要。他们具有超过 60% 的药物靶点,占细胞总蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋白。 膜蛋白或者附着在脂质双分子层上或者通过疏水,离子或其他非共价与膜周边的完整蛋白结合。 使用表面活性剂进行质膜蛋白分离
核酸提取仪公司
2020年突如起来的新冠肺炎疫情使"核酸检测"进入了公众的视野,核酸检测从工艺上来说包括核酸提取、扩增与检测。 根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》,新冠肺炎确诊标准之一是新型冠状病毒核酸检测阳性。在疑似患者人群中,新冠病毒核酸检出阳性率高低可能与样本采集保存运输、核酸提取、RT-P